Алгоритм молекулярно-генетического обследования для выявления наследственного BRCA-ассоциированного рака молочной железы

Background: About 30%  of cases of hereditary breast cancer (BC) are associated with the BRCA1 and BRCA2 gene mutations. The absence of the programs of mandatory genetic screening for hereditary BRCA-associated BC in Russia, as well as of an algorithm for molecular genetic testing does not allow fully accomplishing the necessary preventive, diagnostic and medical measures.Aim: To elaborate an algorithm for molecular genetic testing of BC patients in order to improve the efficacy of identification of the hereditary nature of the disease.Materials and methods: The study is based on the analysis of the results of molecular genetic testing of 3826 BC patients aged from 22 to 90 years, who were examined and treated in the Russian Research Center of Roentgenoradiology (Moscow) from 2010 to 2016. At the first stage of the study, germinal mutation in the BRCA1 and BRCA2 genes prevalent in the Russian population were identified by the real-time polymerase chain reaction (PCR). At the second stage, we searched for rare genetic variants of these genes by the ‘next generation sequencing’ (NGS) method.Results: The real-time PCR (the first stage) showed that the prevalence of the most typical for the Russian population mutations in the BRCA1 gene, associated with BC risk, was 3.5% (132/3826 BC patients). No carriers of the BRCA2 mutations were identified. Based on the analysis of a  questionnaire survey and primary medical documentation, a group of 717 patients was selected from the total cohort, who had clinical features of the hereditary disease (CFHD). In this group, the BRCA1 and BRCA2 gene mutations were found in 126 patients (17.6%). At the second stage, a group of 193 patients with CFHD and no BRCA1 and BRCA2 mutations prevalent in the Russian population was investigated by NGS. Rare pathogenic mutations of these genes were found in 27  patients (14%). In total, it may be concluded that at least 30% of the BC patients with CFHD have germinal mutations in the BRCA1 and BRCA2 genes. Based on the data obtained, we have developed the algorithm of molecular genetic testing of BC patients aimed at identification of the hereditary nature of the disease.Conclusion: The high frequency of mutations in the BRCA1 and BRCA2 genes found in this study in BC patients with CFHD confirms the necessity of genetic testing for this hereditary disease. The information on its hereditary nature allows for the introduction of essential therapy modification with a personalized approach. Regular follow-up of patients with hereditary BC and prevention of new BC cases and other cancers (ovarian, gastric, pancreatic and prostate cancer, as well as melanoma) in their relatives with BRCA1 and BRCA2 mutations have to be implemented by a multidisciplinary team (specialists in mammology, gynecology, oncology, medical genetics, chemotherapy and psychotherapy). Актуальность. Около 30%  случаев наследственного рака молочной железы (РМЖ) обусловлено мутациями в  генах BRCA1 и  BRCA2. Отсутствие в  России программ обязательного генетического скрининга наследственного BRCA-ассоциированного РМЖ, а также алгоритма молекулярно-генетического обследования не позволяет в  полной мере проводить необходимые профилактические, диагностические и  лечебные мероприятия.Цель  – разработка алгоритма молекулярно-генетического обследования больных РМЖ для повышения эффективности выявления наследственного характера заболевания.Материал и  методы. Работа основана на анализе результатов молекулярно-генетического тестирования 3826  больных РМЖ в возрасте от 22 до 90 лет, которые проходили обследование и  лечение в  ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России в период с 2010 по 2016 г. На первом этапе с  помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени определяли распространенные в российской популяции герминальные мутации в генах BRCA1 и BRCA2, на втором этапе методом секвенирования «нового поколения» (англ. next generation sequencing – NGS) осуществляли поиск редких генетических вариантов в  этих генах.Результаты. Исследование методом ПЦР в  режиме реального времени (первый этап) показало: частота наиболее характерных для российской популяции мутаций в  гене BRCA1, ассоциированных с  риском развития РМЖ, составила 3,5% (132 из 3826  пациентов с  РМЖ); ни одного носителя мутаций в  гене BRCA2 не выявлено. На основании анализа данных анкетирования и первичной медицинской документации из общей когорты обследованных была сформирована группа из 717  человек, в  которую вошли пациенты с  клиническими признаками наследственного заболевания (КПНЗ). В  этой группе мутации в  генах BRCA1 и  BRCA2 были выявлены у  126  человек, что составило 17,6%. На втором этапе методом NGS в  группе из 193  больных РМЖ с  КПНЗ и  отсутствием характерных для российской популяции мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 были найдены редкие патогенные мутации в этих генах у 27 человек, то есть у 14%. Суммируя полученные данные, можно заключить, что не менее 30% больных РМЖ с КПНЗ имеют наследственные мутации в генах BRCA1 и BRCA2. На основании полученных данных разработан алгоритм молекулярно-генетического обследования больных РМЖ для выявления наследственного характера заболевания.Заключение. Выявленная в  настоящей работе высокая частота мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 у  больных РМЖ с  КПНЗ подтверждает необходимость генетического тестирования наследственного заболевания. Информация о  наследственном характере заболевания позволит вносить существенные изменения в  тактику проводимого лечения, применяя персонифицированный подход. Динамическое наблюдение пациентов с наследственным РМЖ и  профилактика возникновения новых случаев РМЖ и других онкологических заболеваний (рак яичника, желудка, поджелудочной железы, предстательной железы, меланомы) у  их родственников – носителей мутаций в генах BRCA1и  BRCA2  – должны осуществляться мультидисциплинарной командой (маммологи, гинекологи, онкологи, медицинские генетики, химиотерапевты, психотерапевты).