Multiplex Detection and Genotyping of Point Mutations Involved in Charcot-Marie-Tooth Disease Using a Hairpin Microarray-Based Assay

We previously developed a highly specific method for detecting SNPs with a microarray-based system using stem-loop probes. In this paper we demonstrate that coupling a multiplexing procedure with our microarray method is possible for the simultaneous detection and genotyping of four point mutations, in three different genes, involved in Charcot-Marie-Tooth disease. DNA from healthy individuals and patients was amplified, labeled with Cy3 by multiplex PCR; and hybridized to microarrays. Spot signal intensities were 18 to 74 times greater for perfect matches than for mismatched target sequences differing by a single nucleotide (discrimination ratio) for “homozygous” DNA from healthy individuals. “Heterozygous” mutant DNA samples gave signal intensity ratios close to 1 at the positions of the mutations as expected. Genotyping by this method was therefore reliable. This system now combines the principle of highly specific genotyping based on stem-loop structure probes with the advantages of multiplex analysis

Dysfonction mitochondriale et neuropathies périphériques.

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Neuropathies sensitives d'origine mitochondriale

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Peripheral neuropathies due to genetically-determined mitochondrial disorders

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[Peripheral neuropathies due to mitochondrial disorders] : Dysfonctions mitochondriales à l'origine de neuropathies périphériques

XIIIes Journées des maladies du système nerveux périphériqueNational audienceRésumé : L'atteinte des nerfs périphériques est très fréquente dans les maladies mitochondriales mais sa sévérité est très variable. Ces maladies mitochondriales peuvent être causées par des mutations de l'ADN mitochondrial (ADNmt), comme c'est le cas dans les syndromes MERRF et MELAS ou par des mutations de gènes nucléaires. En outre, des anomalies secondaires de l'ADNmt (telles que des délétions multiples de l'ADNmt musculaire) peuvent résulter de maladies mitochondriales dues à des mutations de gènes nucléaires impliqués dans la maintenance de l'ADNmt. C'est le cas du syndrome Sensory Ataxic Neuropathy with Ophthalmoplegia (Sando) dû à des mutations récessives du gène POLG codant pour la sous-unité catalytique de l'ADN polymérase mitochondriale (ADN polymérase gamma) ou du syndrome Mitochondrial Neuro-Gastro-Intestinal Encephalomyopathy (MNGIE) dû à des mutations récessives du gène TYMP qui code pour la thymidine phosphorylase (TP) cytoplasmique. Des neuropathies génétiquement déterminées dues à des mutations dans le gène de la mitofusine 2, GTPase impliquée dans la dynamique mitochondriale (fusion des membranes mitochondriales) ont été identifiées au cours des dernières années. Des anomalies histopathologiques évocatrices (anomalies des mitochondries axonales) peuvent être observées sur les coupes longitudinales des biopsies nerveuses de ces patients. Abstract : Involvement of peripheral nerves is frequent in mitochondrial disorders but with variable severity. Mitochondrial diseases causing peripheral neuropathies (PN) may be due to mutations of mitochondrial DNA (mtDNA), as is the case in MERRF and MELAS syndromes, or to mutations of nuclear genes. Secondary abnormalities of mtDNA (such as multiple deletions of muscle mtDNA) may result from mitochondrial disorders due to mutations in nuclear genes involved in mtDNA maintenance. This is the case in several syndromes caused by impaired mtDNA maintenance, such as Sensory Ataxic Neuropathy, Dysarthria and Ophthalmoplegia (SANDO) due to recessive mutations in the POLG gene, which encodes the catalytic subunit of mtDNA polymerase (DNA polymerase gamma), or Mitochondrial Neuro-Gastro-Intestinal Encephalomyopathy (MNGIE), due to recessive mutations in the TYMP gene, which encodes thymidine phosphorylase. Genetically-determined PN due to mutations of mitofusin 2, a GTPase involved in the fusion of external mitochondrial membranes, were identified during the last few years. Characteristic ultrastructural lesions (abnormalities of axonal mitochondria) are observed on longitudinal sections of nerve biopsies in patients with PN due to mitofusin 2 mutations

Update on hereditary peripheral neuropathies

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Etude de l'implication de séquences cis-régulatrices du gène EGR2/KROX20 dans les neuropathies de Charcot-Marie-Tooth démyélinisantes

LIMOGES-BU Médecine pharmacie (870852108) / SudocSudocFranceF

La maladie de Charcot-Marie-Tooth

La « maladie » de Charcot-Marie-Tooth (CMT) est le nom générique donné à un ensemble de maladies génétiques caractérisées par une atteinte relativement isolée des nerfs périphériques, à la fois motrice et sensitive. Ces syndromes CMT sont les plus fréquentes des neuropathies périphériques génétiquement déterminées, avec une prévalence comprise entre 4,7 et 36 pour 100 000. Leurs phénotypes cliniques se caractérisent par des signes surtout moteurs avec une amyotrophie distale touchant de façon à peu près symétrique les membres supérieurs et inférieurs. Les modalités de transmission sont variables : autosomique dominante, récessive, liée au chromosome X. Des formes apparemment sporadiques peuvent être de diagnostic difficile et il convient de les évoquer devant toute polyneuropathie chronique dont le caractère acquis n’est pas certain. L’identification de mutations dans plus de vingt-cinq gènes au cours des dernières années n’a pas simplifié la classification des syndromes CMT. Si la connaissance (au moins partielle) de la fonction de certains de ces gènes permet de mieux comprendre les mécanismes lésionnels de la myéline et des axones dans ces polyneuropathies héréditaires, certains autres codent pour des protéines dont le rôle est encore incertain voire inconnu

Neuropathies mitochondriales

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