In vivo and in vitro activity of isolated compounds from Brazilian propolis on the modulation of the inflammatory process

Orientador: Pedro Luiz RosalenTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade e possíveis mecanismos de ação dos compostos isolados de própolis brasileiras sobre a modulação do processo inflamatório. As atividades anti-inflamatórias dos compostos vestitol e neovestitol, isolados da própolis vermelha brasileira e do cinamoiloxi-mammeisina (CNM), isolado da geoprópolis de Melipona scutellaris, foram avaliadas e os seguintes resultados obtidos: 1) O composto vestitol apresentou atividade inibitória sobre a migração de neutrófilos induzido por LPS ou mBSA, bem como sobre a liberação das quimiocinas CXCL1/KC e CXCL2/MIP-2 in vivo e in vitro. Foi também observado que o tratamento com vestitol reduziu o rolamento e adesão de leucócitos na microcirculação mesentérica de camundongos. Quanto à sua atividade em neutrófilos in vitro, o vestitol reduziu a quimiotaxia de neutrófilos induzida por CXCL2/MIP-2 e LTB4 e bloqueou o influxo de cálcio nestas células. Não foi constatada alteração da expressão do receptor CXCR2 com o pré-tratamento de vestitol. 2) Em relação ao composto neovestitol, foi verificada que a sua administração reduziu a migração de neutrófilos, o rolamento e adesão de leucócitos e a expressão de ICAM-1 em camundongos desafiados com LPS. No que diz respeito à liberação de TNF-?, CXCL1/KC e CXCL2/MIP-2, não foi constatada atividade do neovestitol sobre estes mediadores inflamatórios. Além disso, o composto não alterou a expressão de ICAM-1 in vitro. Por outro lado, foi observado que a administração de um inibidor da óxido nítrico sintetase, aboliu o efeito anti-inflamatório do neovestitol sobre a migração de neutrófilos. No modelo de artrite induzida por colágeno, a administração diária do neovestitol pelo período de 12 dias, reduziu o escore clinico de artrite dos animais, as lesões articulares e a liberação de IL-6. 3) Em relação aos resultados obtidos com o composto CNM, foi observado que a sua administração reduziu a migração de neutrófilos na cavidade peritoneal e articular, bem como a liberação de TNF-? e CXCL2/MIP-2 in vivo e in vitro. Foi verificado também, que o CNM reduziu a expressão das proteínas fosforiladas ERK 1/2, JNK, p38 MAPK e c-jun em macrófagos RAW 264.6. Da mesma forma, o CNM reduziu a ativação de NF-?B, entretanto, não alterou a degradação de I?B? e a translocação de p65 nuclear. Portanto, conclui-se que a própolis brasileira é uma importante fonte de compostos ativos com potencial biológico e que os compostos isolados delas como vestitol, neovestitol e CNM, são promissores agentes anti-inflamatórios com mecanismos distintos e de interesses para os desfechos de processos inflamatórios agudos ou crônicos, com possibilidades de uso terapêuticoAbstract: The objective of this study was to evaluate the activity and possible mechanisms of action of compounds isolated from Brazilian propolis on modulation of the inflammatory process. The anti-inflammatory activities of vestitol and neovestitol, isolated from Brazilian red propolis and cinnamoyloxy-mammeisin (CNM), isolated from Melipona scutellaris geopropolis were evaluated and the following results were observed: 1) Vestitol had inhibitory activity against LPS or mBSA induced neutrophil migration as well as on the release of chemokines CXCL1/KC and CXCL2/MIP-2 in vivo and in vitro. It was also found that treatment with vestitol reduced leukocytes rolling and adhesion in mice mesenteric microcirculation. Regarding the activity on neutrophil in vitro, vestitol reduced CXCL2/MIP-2 and LTB4 induced neutrophils chemotaxis and blocked the calcium influx in these cells. No change was observed in CXCR2 receptor expression with vestitol pretreatment. 2) The administration of neovestitol reduced neutrophil migration, leukocytes rolling and adhesion and ICAM-1 expression in mice challenged with LPS. Despite the release of TNF-?, CXCL1/KC and CXCL2/MIP-2, we found no activity of neovestitol on these inflammatory mediators. Furthermore, the compound did not alter the in vitro ICAM-1expression. Moreover, it was observed that administration of a nitric oxide sintase inhibitor abolished the anti-inflammatory effect of neovestitol neutrophils migration. In the of collagen-induced arthritis model, it was found that the daily administration of neovestitol for 12 days, reduced the clinical arthritis score of the animals, joint injury and IL-6 release. 3) Regarding the results obtained with CNM, it was found that administration reduced neutrophil migration into the peritoneal and joint cavity, as well as TNF-? and CXCL2/MIP-2 release in vivo and in vitro. Concerning mechanism of action, it was found that CNM reduced the expression of the phosphorylated proteins ERK 1/2, JNK, p38 MAPK and c-jun in RAW 264.6 macrophages. Furthermore, it was observed that CNM reduced NF-kB activation, however, did not affect the I?B? degradation and p65 nuclear translocation. Thus, we conclude that Brazilian propolis is an important source of active compounds with biological potential. Also, some of isolated compounds such as vestitol, neovestitol and CNM are promising anti-inflammatory agents with distinct mechanisms of action with possible therapeutic use in acute or chronic inflammatory processesDoutoradoFarmacologia, Anestesiologia e TerapeuticaDoutor em Odontologia2012/01365-0, 2012/22378-2FAPES

Evaluation of anti-inflammatory and antinociceptive potential of geopropolis of Melipona scutellaris

Orientador: Pedro Luiz RosalenDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade anti-inflamatória e antinociceptiva do extrato etanólico de geoprópolis (EEGP) de Melipona scutellaris e frações químicas, bem como possíveis mecanismos de ação. Além disso, caracterizar quimicamente o EEGP e frações bioativas. Para avaliação da atividade anti-inflamatória foram aplicados os ensaios de recrutamento de neutrófilos na cavidade peritoneal, microscopia intravital e edema de pata induzido por carragenina. A via do óxido nítrico (NO) foi avaliada através da administração de inibidores desta via, além da avaliação da expressão das moléculas de adesão intercelular tipo 1 (ICAM-1) e quantificação de nitritos. A análise química do EEGP e fração bioativa foram realizadas pelos métodos de cromatografia gasosa com espectrometria de massas (CG/EM) e cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (CLAE-FR). Para avaliação da atividade antinociceptiva, foram aplicados os ensaios de contorções abdominais induzida por ácido acético, teste da formalina, hipernocicepção inflamatória mecânica induzida por carragenina e quantificação das citocinas IL-1 ? e TNF-?. A composição química do EEGP e frações bioativas foram avaliadas pela quantificação de fenóis e flavonóides totais. Conforme os resultados nos ensaios anti-inflamatórios, foi verificado que o EEGP e sua fração aquosa diminuíram a migração de neutrófilos na cavidade peritoneal induzido por carragenina, como também diminuíram a interação dos leucócitos (rolamento e adesão) com as células endoteliais. A administração de inibidores da via do NO suprimiu a atividade inibitória do EEGP e da fração aquosa sobre a migração de neutrófilos. A expressão de ICAM-1 apresentou-se diminuída, e os níveis de nitritos aumentados após o tratamento com EEGP e fração aquosa. No modelo de edema de pata induzido por carragenina, o EEGP e a fração aquosa apresentaram atividade anti-edematogênica. Nenhum padrão de ácido fenólico ou flavonóide, comumente encontrado em amostra de própolis de Apis mellifera, pôde ser detectado nas amostras de EEGP e da fração aquosa pelas técnicas de CG/EM e CLAE-FR. Nos ensaios de atividade antinociceptiva foi verificado que o EEGP e as frações hexânica e aquosa diminuíram o número de contorções abdominais induzida por ácido acético. No teste da formalina, o EEGP e a fração aquosa inibiram ambas as fases (neurogênica e inflamatória), e a fração hexânica apenas a fase neurogênica. Foi evidenciada atividade do EEGP e fração aquosa na hipernocicepção inflamatória mecânica induzida por carragenina, como também foi constatado níveis diminuídos de IL-1? e TNF-?. Para as amostras de EEGP e frações hexânica e aquosa foi verificada a presença de compostos fenólicos e ausência de flavonóides. Estes resultados indicam que as frações bioativas encontradas possuem substâncias promissoras como novos agentes terapêuticos para o controle da inflamação e dorAbstract: The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory and antinociceptive geopropolis of ethanolic extract (EEGP) of Melipona scutellaris and fractions, as well as a possible mechanism of actions. In addition, to characterize chemically EEGP and bioactive fractions. To evaluate the anti-inflammatory activity we used the recruitment of neutrophils into the peritoneal cavity, intravital microscopy and paw edema induced by carrageenan. The pathway of nitric oxide (NO) was demonstrated by administration of antagonists of this pathway, but also evaluated by the expression of intercellular adhesion molecule type 1 (ICAM-1) and quantification of nitrites. Reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) and gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) were used the phytochemical analyses. The tests used to evaluate the antinociceptive activity were abdominal contortions induced by acetic acid, formalin test, carrageenan-induced mechanical inflammatory hypernociception and quantification of IL-1 ? and TNF-?. The quantification of total phenols and flavonoids was also determined in the EEGP and the bioactive fractions. In the anti-inflammatory tests the EEGP and the aqueous fraction decreased the neutrophil migration into the peritoneal cavity induced by carrageenan and also decreased the interaction of leukocytes (rolling and adhesion) with endothelial cells. The route of administration of inhibitors of NO abolished the inhibitory activity of the aqueous fraction and EEGP on neutrophil migration. The expression of ICAM-1 was reduced and nitrite levels increased after treatment with EEGP and aqueous fraction. In the paw edema induced by carrageenan, both EEGP and aqueous fraction showed anti-edema activity. No standards of flavonoid or phenolic acid commonly found in a sample of propolis of Apis mellifera could be detected in any samples of aqueous fraction or EEGP by GC/MS and RP-HPLC techniques. In tests to evaluate the antinociceptive activity was determined that EEGP, hexane and aqueous fractions decreased the number of abdominal constrictions induced by acetic acid. In the formalin test, the aqueous fraction and EEGP inhibited both phases (neurogenic and inflammatory), and the hexane fraction only neurogenic phase. The EEGP and the aqueous fraction showed activity in the carrageenan-induced mechanical inflammatory hypernociception model, as also observed decreased levels of IL-1? and TNF-?. The EEGP, hexane and aqueous fractions was verified the presence of phenolic compounds and absence of flavonoids. These results indicate that the bioactive fractions in the present study showed substances that could be promising new therapeutic agents to control inflammation and painMestradoFarmacologia, Anestesiologia e TerapeuticaMestre em Odontologi

Anti-inflammatory, anti-osteoclastogenic and antioxidant effects of Malva sylvestris extract and fractions: in vitro and in vivo studies

FAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULOGiven their medical importance, natural products represent a tremendous source of drug discovery. The aim of this study was to investigate Malva sylvestris L. extract and fractions and their pharmacological activities followed by chemical identification. The aqueous fraction (AF) was identified as the bioactive fraction in the in vitro and in vivo assays. The AF controlled the neutrophil migration to the peritoneal cavity by 66%, inhibited the antiedematogenic activity by 58.8%, and controlled IL-1 beta cytokine expression by 54%. The in vitro viability tests showed a concentration-dependent effect, where the MSE and fractions at concentrations under 10 mu g/ mL were non-toxic to cells. Transcriptional factors of carbonic anhydrase II (CAII), cathepsin K (Ctsk) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) were analyzed by qPCR in RAW 264.7 cell lines. The gene expression analysis showed that the AF was the only treatment that could downregulate all the study genes: CAII, Ctsk and TRAP (p<0.05). TRAP staining was used to evaluate osteoclast formation. AF treatments reduced the number of osteoclastogenesis 2.6-fold compared to the vehicle control group. Matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) activity decreased 75% with the AF treatment. Moreover, the bioactive fraction had the ability to regulate the oxidation pathway in the ABTS (2,2-Azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) assay with an activity equivalent to 1.30 mu mol Trolox/g and DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radicals 1.01 g/L. Positive ion ESI-mass spectrometry for molecular ions at m/z 611 and 633 confirmed rutin as the major compound in the AF. The AF of M. sylvestris presented anti-inflammatory, controlled osteoclastogenic mechanisms and antioxidant abilities in different in vitro and in vivo methods. In addition, we suggest that given its multi-target activity the bioactive fraction may be a good candidate in the therapy of chronic inflammatory diseases.Given their medical importance, natural products represent a tremendous source of drug discovery. The aim of this study was to investigate Malva sylvestris L. extract and fractions and their pharmacological activities followed by chemical identification. The aqueous fraction (AF) was identified as the bioactive fraction in the in vitro and in vivo assays. The AF controlled the neutrophil migration to the peritoneal cavity by 66%, inhibited the antiedematogenic activity by 58.8%, and controlled IL-1 beta cytokine expression by 54%. The in vitro viability tests showed a concentration-dependent effect, where the MSE and fractions at concentrations under 10 mu g/ mL were non-toxic to cells. Transcriptional factors of carbonic anhydrase II (CAII), cathepsin K (Ctsk) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) were analyzed by qPCR in RAW 264.7 cell lines. The gene expression analysis showed that the AF was the only treatment that could downregulate all the study genes: CAII, Ctsk and TRAP (p<0.05). TRAP staining was used to evaluate osteoclast formation. AF treatments reduced the number of osteoclastogenesis 2.6-fold compared to the vehicle control group. Matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) activity decreased 75% with the AF treatment. Moreover, the bioactive fraction had the ability to regulate the oxidation pathway in the ABTS (2,2-Azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) assay with an activity equivalent to 1.30 mu mol Trolox/g and DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radicals 1.01 g/L. Positive ion ESI-mass spectrometry for molecular ions at m/z 611 and 633 confirmed rutin as the major compound in the AF. The AF of M. sylvestris presented anti-inflammatory, controlled osteoclastogenic mechanisms and antioxidant abilities in different in vitro and in vivo methods. In addition, we suggest that given its multi-target activity the bioactive fraction may be a good candidate in the therapy of chronic inflammatory diseases119FAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULOFAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO2011/23980-

Projeto de extensão FutFEB

Introdução: O Projeto de Extensão FutFEB procura estimular o interesse dos alunos do ensino médio, técnico e fundamental para seguirem carreira nas áreas de engenharia e ciência da computação. Para isso são utilizados robôs móveis simples em conjunto com material didático e áudio-visual para despertar de forma lúdica, através de palestras e demonstrações práticas, o interesse dos jovens para os desafios e atrativos das carreiras tecnológicas. Essas atividades são desenvolvidas por alunos do Colégio Técnico Industrial e da Faculdade de Engenharia do Campus de Bauru. Objetivos: Propiciar condições para que os alunos do Colégio Técnico Industrial e da Faculdade de Engenharia desenvolvam atividades de pesquisa e desenvolvimento sobre robôs móveis autônomos funcionando como complemento e estímulo a sua formação acadêmica nas áreas de engenharia elétrica, mecânica, e computação. Assim, espera-se a criação da cultura e de um ambiente propícios para desenvolvimento de pesquisas e de inovação tecnológica, que ajudem a consolidar os Cursos Técnicos, de Graduação e Pós-Graduação da FEB. Métodos: O uso de robôs móveis em cursos de engenharia ou cursos visando o desenvolvimento tecnológico não é uma novidade. Inúmeros experimentos são relatados na literatura, sendo que esta abordagem tem se tornado quase que uma obrigatoriedade nos cursos de boa qualidade [Hoopes, 2003], [Martin, 1994], [Miglino, 1998]. Um dos pilares desta nova linha de ensino tecnológico é o trabalho desenvolvido por Resnick no MIT [Kafai & Resnick, 1996] que é parte importante do conhecido Projeto LEGO Mindstorms. Esta perspectiva altera significativamente o posicionamento do estudante, dando-lhe maturidade profissional e responsabilidade. Com isso espera-se formar um profissional mais capacitado tanto no aspecto de fundamentos e conceitos técnicos, como na capacidade de empreender e inovar. Também existe a expectativa de que muitos dos trabalhos desenvolvidos sejam transformados em projetos de Iniciação Científica. Resultados: oda a tecnologia utilizada no conceito Futebol de Robôs continua sendo desenvolvida e aprimorada, diversos trabalhos científicos de ponta podem ser encontrados na literatura recente, trabalhos que abordam entre outros temas, o problema da navegação autônoma dos robôs móveis. Apresenta-se a seguir trabalhos de alunos vinculados ao Projeto de Extensão FutFEB, submetidos ao Congresso de Iniciação Científica da UNESP - 2011.- Software de Mapeamento para Navegação de Robôs Móveis Autônomos.- Sensoriamento por Infra-Vermelho para Robôs Móveis Autônomos.- Sensoriamento por Ultra-Som para Robôs Móveis Autônomos.- Segmentação de Imagens Coloridas para Reconhecimento de Objetos.- Algoritmos de Subtração de Plano de Fundo em Frames de Vídeo.</p

Projeto de extensão FutFEB

Introdução: O Projeto de Extensão FutFEB procura estimular o interesse dos alunos do ensino médio, técnico e fundamental para seguirem carreira nas áreas de engenharia e ciência da computação. Para isso são utilizados robôs móveis simples em conjunto com material didático e áudio-visual para despertar de forma lúdica, através de palestras e demonstrações práticas, o interesse dos jovens para os desafios e atrativos das carreiras tecnológicas. Essas atividades são desenvolvidas por alunos do Colégio Técnico Industrial e da Faculdade de Engenharia do Campus de Bauru. Objetivos: Propiciar condições para que os alunos do Colégio Técnico Industrial e da Faculdade de Engenharia desenvolvam atividades de pesquisa e desenvolvimento sobre robôs móveis autônomos funcionando como complemento e estímulo a sua formação acadêmica nas áreas de engenharia elétrica, mecânica, e computação. Assim, espera-se a criação da cultura e de um ambiente propícios para desenvolvimento de pesquisas e de inovação tecnológica, que ajudem a consolidar os Cursos Técnicos, de Graduação e Pós-Graduação da FEB. Métodos: O uso de robôs móveis em cursos de engenharia ou cursos visando o desenvolvimento tecnológico não é uma novidade. Inúmeros experimentos são relatados na literatura, sendo que esta abordagem tem se tornado quase que uma obrigatoriedade nos cursos de boa qualidade [Hoopes, 2003], [Martin, 1994], [Miglino, 1998]. Um dos pilares desta nova linha de ensino tecnológico é o trabalho desenvolvido por Resnick no MIT [Kafai & Resnick, 1996] que é parte importante do conhecido Projeto LEGO Mindstorms. Esta perspectiva altera significativamente o posicionamento do estudante, dando-lhe maturidade profissional e responsabilidade. Com isso espera-se formar um profissional mais capacitado tanto no aspecto de fundamentos e conceitos técnicos, como na capacidade de empreender e inovar. Também existe a expectativa de que muitos dos trabalhos desenvolvidos sejam transformados em projetos de Iniciação Científica. Resultados: oda a tecnologia utilizada no conceito Futebol de Robôs continua sendo desenvolvida e aprimorada, diversos trabalhos científicos de ponta podem ser encontrados na literatura recente, trabalhos que abordam entre outros temas, o problema da navegação autônoma dos robôs móveis. Apresenta-se a seguir trabalhos de alunos vinculados ao Projeto de Extensão FutFEB, submetidos ao Congresso de Iniciação Científica da UNESP - 2011.- Software de Mapeamento para Navegação de Robôs Móveis Autônomos.- Sensoriamento por Infra-Vermelho para Robôs Móveis Autônomos.- Sensoriamento por Ultra-Som para Robôs Móveis Autônomos.- Segmentação de Imagens Coloridas para Reconhecimento de Objetos.- Algoritmos de Subtração de Plano de Fundo em Frames de Vídeo

Projeto de extensão FutFEB

Introdução: O Projeto de Extensão FutFEB procura estimular o interesse dos alunos do ensino médio, técnico e fundamental para seguirem carreira nas áreas de engenharia e ciência da computação. Para isso são utilizados robôs móveis simples em conjunto com material didático e áudio-visual para despertar de forma lúdica, através de palestras e demonstrações práticas, o interesse dos jovens para os desafios e atrativos das carreiras tecnológicas. Essas atividades são desenvolvidas por alunos do Colégio Técnico Industrial e da Faculdade de Engenharia do Campus de Bauru. Objetivos: Propiciar condições para que os alunos do Colégio Técnico Industrial e da Faculdade de Engenharia desenvolvam atividades de pesquisa e desenvolvimento sobre robôs móveis autônomos funcionando como complemento e estímulo a sua formação acadêmica nas áreas de engenharia elétrica, mecânica, e computação. Assim, espera-se a criação da cultura e de um ambiente propícios para desenvolvimento de pesquisas e de inovação tecnológica, que ajudem a consolidar os Cursos Técnicos, de Graduação e Pós-Graduação da FEB. Métodos: O uso de robôs móveis em cursos de engenharia ou cursos visando o desenvolvimento tecnológico não é uma novidade. Inúmeros experimentos são relatados na literatura, sendo que esta abordagem tem se tornado quase que uma obrigatoriedade nos cursos de boa qualidade [Hoopes, 2003], [Martin, 1994], [Miglino, 1998]. Um dos pilares desta nova linha de ensino tecnológico é o trabalho desenvolvido por Resnick no MIT [Kafai & Resnick, 1996] que é parte importante do conhecido Projeto LEGO Mindstorms. Esta perspectiva altera significativamente o posicionamento do estudante, dando-lhe maturidade profissional e responsabilidade. Com isso espera-se formar um profissional mais capacitado tanto no aspecto de fundamentos e conceitos técnicos, como na capacidade de empreender e inovar. Também existe a expectativa de que muitos dos trabalhos desenvolvidos sejam transformados em projetos de Iniciação Científica. Resultados: oda a tecnologia utilizada no conceito Futebol de Robôs continua sendo desenvolvida e aprimorada, diversos trabalhos científicos de ponta podem ser encontrados na literatura recente, trabalhos que abordam entre outros temas, o problema da navegação autônoma dos robôs móveis. Apresenta-se a seguir trabalhos de alunos vinculados ao Projeto de Extensão FutFEB, submetidos ao Congresso de Iniciação Científica da UNESP - 2011.- Software de Mapeamento para Navegação de Robôs Móveis Autônomos.- Sensoriamento por Infra-Vermelho para Robôs Móveis Autônomos.- Sensoriamento por Ultra-Som para Robôs Móveis Autônomos.- Segmentação de Imagens Coloridas para Reconhecimento de Objetos.- Algoritmos de Subtração de Plano de Fundo em Frames de Vídeo

Apolar bioactive fraction of melipona scutellaris geopropolis on streptococcus mutans biofilm

FAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULOThe aim of this study was to evaluate the influence of the bioactive nonpolar fraction of geopropolis on Streptococcus mutans biofilm. The ethanolic extract of Melipona scutellaris geopropolis was subjected to a liquid-liquid partition, thus obtaining the bioactive hexane fraction (HF) possessing antimicrobial activity. The effects of HF on S. mutans UA159 biofilms generated on saliva-coated hydroxyapatite discs were analyzed by inhibition of formation, killing assay, and glycolytic pH-drop assays. Furthermore, biofilms treated with vehicle control and HF were analyzed by scanning electron microscopy (SEM). HF at 250  μ g/mL and 400  μ g/mL caused 38% and 53% reduction in the biomass of biofilm, respectively, when compared to vehicle control (P 0.05). In conclusion, the bioactive HF of geopropolis was promising to control the S. mutans biofilm formation, without affecting the microbial population but interfering with its structure by reducing the biochemical content of biofilm matrix.The aim of this study was to evaluate the influence of the bioactive nonpolar fraction of geopropolis on Streptococcus mutans biofilm. The ethanolic extract of Melipona scutellaris geopropolis was subjected to a liquid-liquid partition, thus obtaining the bioactive hexane fraction (HF) possessing antimicrobial activity. The effects of HF on S. mutans UA159 biofilms generated on saliva-coated hydroxyapatite discs were analyzed by inhibition of formation, killing assay, and glycolytic pH-drop assays. Furthermore, biofilms treated with vehicle control and HF were analyzed by scanning electron microscopy (SEM). HF at 250 μg/mL and 400 μg/mL caused 38% and 53% reduction in the biomass of biofilm, respectively, when compared to vehicle control (P  0.05). In conclusion, the bioactive HF of geopropolis was promising to control the S. mutans biofilm formation, without affecting the microbial population but interfering with its structure by reducing the biochemical content of biofilm matrix2013FAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULOFAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO2009/12354-6; 2010/20214-7; 2013/10879-

Neovestitol, an isoflavonoid isolated from brazilian red propolis, reduces acute and chronic inflammation: involvement of nitric oxide and IL-6

FAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULOIsoflavonoids have been largely studied due to their distinct biological activities identified thus far. Herein, we evaluated the activity of neovestitol, an isoflavonoid isolated from Brazilian red propolis, in acute and chronic inflammation. As for acute inflammation, we found that neovestitol reduced neutrophil migration, leukocyte rolling and adhesion, as well as expression of ICAM-1 in the mesenteric microcirculation during lipopolysaccharide-induced acute peritonitis. No changes were observed in the levels of TNF-alpha, CXCL1/KC and CXCL2/MIP-2 upon pretreatment with neovestitol. The administration of an inducible nitric oxide synthase (iNOS) inhibitor abolished the inhibitory effects of neovestitol in neutrophil migration and ICAM-1 expression. Nitrite levels increased upon treatment with neovestitol. No effects of neovestitol were observed on the chemotaxis of neutrophils in vitro. As for chronic inflammation, neovestitol also reduced the clinical score and joint damage in a collagen-induced arthritis model. There was no change in the frequency of IL-17-producing TCD4+ cells. In addition, pretreatment with neovestitol reduced the levels of IL-6. These results demonstrate a potential anti-inflammatory activity of neovestitol, which may be useful for therapeutic purposes and/or as a nutraceutical.Isoflavonoids have been largely studied due to their distinct biological activities identified thus far. Herein, we evaluated the activity of neovestitol, an isoflavonoid isolated from Brazilian red propolis, in acute and chronic inflammation. As for acute inflammation, we found that neovestitol reduced neutrophil migration, leukocyte rolling and adhesion, as well as expression of ICAM-1 in the mesenteric microcirculation during lipopolysaccharide-induced acute peritonitis. No changes were observed in the levels of TNF-alpha, CXCL1/KC and CXCL2/MIP-2 upon pretreatment with neovestitol. The administration of an inducible nitric oxide synthase (iNOS) inhibitor abolished the inhibitory effects of neovestitol in neutrophil migration and ICAM-1 expression. Nitrite levels increased upon treatment with neovestitol. No effects of neovestitol were observed on the chemotaxis of neutrophils in vitro. As for chronic inflammation, neovestitol also reduced the clinical score and joint damage in a collagen-induced arthritis model. There was no change in the frequency of IL-17-producing TCD4+ cells. In addition, pretreatment with neovestitol reduced the levels of IL-6. These results demonstrate a potential anti-inflammatory activity of neovestitol, which may be useful for therapeutic purposes and/or as a nutraceutical6FAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULOFAPESP - FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO2012/01365-0; 2012/22378-

Assessment of UHF frequency range for failure classification in power transformers

Ultrahigh-frequency (UHF) sensing is one of the most promising techniques for assessing the quality of power transformer insulation systems due to its capability to identify failures like partial discharges (PDs) by detecting the emitted UHF signals. However, there are still uncertainties regarding the frequency range that should be evaluated in measurements. For example, most publications have stated that UHF emissions range up to 3 GHz. However, a Cigré brochure revealed that the optimal spectrum is between 100 MHz and 1 GHz, and more recently, a study indicated that the optimal frequency range is between 400 MHz and 900 MHz. Since different faults require different maintenance actions, both science and industry have been developing systems that allow for failure-type identification. Hence, it is important to note that bandwidth reduction may impair classification systems, especially those that are frequency-based. This article combines three operational conditions of a power transformer (healthy state, electric arc failure, and partial discharges on bushing) with three different self-organized maps to carry out failure classification: the chromatic technique (CT), principal component analysis (PCA), and the shape analysis clustering technique (SACT). For each case, the frequency content of UHF signals was selected at three frequency bands: the full spectrum, Cigré brochure range, and between 400 MHz and 900 MHz. Therefore, the contributions of this work are to assess how spectrum band limitation may alter failure classification and to evaluate the effectiveness of signal processing methodologies based on the frequency content of UHF signals. Additionally, an advantage of this work is that it does not rely on training as is the case for some machine learning-based methods. The results indicate that the reduced frequency range was not a limiting factor for classifying the state of the operation condition of the power transformer. Therefore, there is the possibility of using lower frequency ranges, such as from 400 MHz to 900 MHz, contributing to the development of less costly data acquisition systems. Additionally, PCA was found to be the most promising technique despite the reduction in frequency band information.This work was supported by São Paulo State University, Brazil, and Agencia Nacional de Investigación y Desarrollo (ANID) through Fondecyt regular 1230135 and Fondef ID22I10153, Chile.São Paulo State University, Brazil, and Agencia Nacional de Investigación y Desarrollo (ANID

Geopropolis from Melipona scutellaris decreases the mechanical inflammatory hypernociception by inhibiting the production of IL-1 beta and TNF-alpha

Ethnopharmacological relevance: The pharmacological activity of geopropolis collected by stingless bees (important and threatened pollinators), a product widely used in folk medicine by several communities in Brazil, especially in the Northeast Region, needs to be studied. Objective: The aim of this study was to evaluate the antinociceptive activity of Melipona scutellaris geopropolis (stingless bee) using different models of nociception. Material and methods: The antinociceptive activity of the ethanolic extract of geopropolis (EEGP) and fractions was evaluated using writhing induced by acetic acid, formalin test, carrageenan-induced hypernociception, and quantification of IL-1 beta and TNF-alpha. The chemical composition was assessed by quantification of total flavonoids and phenolic compounds. Results: EEGP and its hexane and aqueous fractions showed antinociceptive activity. Both EEGP and its aqueous fraction presented activity in the mechanical inflammatory hypernociception induced by the carrageenan model, an effect mediated by the inhibition of IL-1 beta and TNF-alpha. The chemical composition of EEGP and its hexane and aqueous fractions showed a significant presence of phenolic compounds and absence of flavonoids. Conclusion: Our data indicate that geopropolis is a natural source of bioactive substances with promising antinociceptive activity. (C) 2012 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.FAPESP [2009/12352-3, 2010/20214-7