C39 - Essai de formulation d’une crème cicatrisante à partir d’un mélange d’extrait de Kalanchoe crenata et Achatina fulica pour la prise en charge des brûlures de deuxième degré sur les rats de souche Wistar

Introduction : Kalanchoe crenata est une espèce utilisée traditionnellement au Cameroun pour le traitement des plaies et la bave d’escargot (Achatina fulica) est reconnue comme efficace pour le renouvellement des cellules de la peau. La présente étude avait pour objectif de formuler une crème cicatrisante du mélange de Kalanchoe crenata et Achatina fulica pour la prise en charge des brȗlures de deuxième degré sur les rats de souche Wistar. Méthodologie : Une étude expérimentale a été menée de décembre 2021 à juin 2022. L’induction des brûlures a été faite sur des rats femelles de souches Wistar selon le modèle de Rozaini et al modifié. Le screening phytochimique a été réalisé selon les principes de Harbone, Sofowora et Evans. Les tests au DPPH, FRAP et TAC ont permis d’évaluer l’activité antioxydante. La propriété cicatrisante quant à elle, a été évaluée selon le modèle de Kamdemir et al. Concernant la fabrication de la crème, la phase hydrophile était constituée de glycérol, de mucus d’Achatina fulica, d’eau purifiée, d’eextrait aqueux de Kalanchoe crenata, et de Tween 20, et portée à 70°C au bain-marie ; parallèlement, la phase lipophile était composée de vaseline, d’huile de coco, d’huile de noisette, de laurylsulfate de sodium, et également portée à 70°C. La phase hydrophile a été additionnée à la phase lipophile sous agitation pendant 20 minutes à 60°C. Le mélange a été laissé à refroidir sous agitation plus lente jusqu'à la température ambiante. Les caractères organoleptiques, le pH, le sens de l’émulsion, l’homogénéité et la stabilité ont été évalués. Résultats : Les composés phénoliques, terpénoïdes et les alcaloïdes ont été révélés dans l’extrait de Kalanchoe crenata et le mucus d’Achatina fulica. Les tests antioxydants ont mis en évidence une activité antiradicalaire (SC50 = 1,25 mg/ml), une activité chélatrice (20 µg EAA/g MS), et un TAC à 11µg EAA/g MS. Les plaies traitées par les produits naturels, le jus de Kalanchoe crenata (98,72% à J10), le mucus d’Achatina fulica (99,40% à J10) et leur mélange (99,76% à J10) présentent une évolution de cicatrisation très proche du produit de référence (100% à J10). La crème élaborée à 8,4 %, dénommée KALANC’AF, était une crème H/L, d’odeur d’huile d’olive, couleur verte olive, consistance molle, aspect lisse et brillant, Ph 4,36, présentant des particules visibles, stable à l’étuve et à la centrifugation. Conclusion : A l’issue de l’étude, une crème stable aux propriétés cicatrisantes à partir du jus de Kalanchoe crenata et du mucus d’Achatina fulica a été formulée

C23 Composition chimique et activité antimicrobienne sur des souches responsables d’infections cutanées de l’extrait méthanoïque d’écorces de Vernonia conferta (Asteraceae)

Introduction : Vernonia conferta est une espèce utilisée par les populations camerounaises dans la prise en charge des plaies. L’objectif de ce travail était de déterminer la composition chimique et d’évaluer les propriétés antimicrobiennes de cette plante. Méthodologie : Nous avons mené une étude expérimentale. Le matériel végétal était constitué d’écorces de tronc de V. conferta récoltées dans la région du Centre, département de la Mefou et Afamba, localité de Nkolafamba, L’identification du spécimen a été effectuée à l’Herbier National du Cameroun sous le n° 10046. Le matériel a été nettoyé, séché durant 14 jours à l’abri du soleil, puis pulvérisé dans un broyeur mécanique. L’extraction a été faite par double macération de 72h dans 11 L de MeOH de la poudre d’écorces de V. conferta. Le mélange a été filtré sur du papier filtre Whatman N°3, le filtrat concentré à l’évaporateur rotatif Heidolph® (Hei-VAP ML/G3). L’extrait sec a été conservé à température ambiante à l’abri du soleil. Le criblage phytochimique qualitatif a été réalisé en utilisant les protocoles standards d’Harbonne de 1998. Pour l’isolement et la caractérisation des molécules, l’extrait brut a été dissout dans du MeOH et fixé sur une quantité équivalente de silice (de granulométrie 60 – 200μm / 60A) puis séché à température ambiante. Le mélange a été ensuite séparé sur une colonne chromatographique ouverte éluée au système de solvants n-hexane/AcOEt à des polarités croissantes. La composition qualitative des fractions recueillies a été déterminée à l’aide de la CCM. L’élucidation des structures des composés isolés a été faite grâce aux méthodes de RMN 1H et 13C. L’évaluation de l’activité antimicrobienne a été réalisée par la détermination des CMI et CMB. Pour les CMI, les tests ont été faits en triplicate dans les microplaques stériles de 96 puits. Cinq dilutions d’ordre 2 ont été réalisées (de 50 μg /mL à 1,56 μg/mL). L’incubation a été faite pendant 24 h à 37 °C (bactéries) et à 28 °C (fungi). La croissance des microorganismes a été observée grâce à un indicateur coloré l’iodonitrotétrazolium qui virait au rose en présence de bactéries viables. La CMI est la plus faible concentration à laquelle l’extrait a empêché la croissance visible des bactéries et fungi. L’activité de l’extrait a été classé en : i) très forte, CMI ≤ 5 μg/mL ; ii) forte, 5 μg/mL ≤ CMI ≤ 50 μg/mL ; iii) modérée, 50 μg/mL ≤ CMI ≤ 325 μg/mL et iv) faible, CMI> 325 μg/mL Concernant les CMB, L’ensemencement a été effectué à partir des puits de CMI, sur les géloses Muller Hinton e et Sabouraud et l’incubation s’est faite à 37 °C pendant 24 h (bactéries) et 28 °C (champignons). La CMB/CMF est la plus petite concentration à laquelle l’extrait a empêché la croissance visible des microorganisemes après repiquage. L’effet de l’extrait a été déterminé par le rapport CMB ou CMF/CMI :    ˂ 1, «bactéricide/fongicide absolu», ≤ 4, «bactéricide/fongicide», > 4, «bactériostatique /fongistatique». Résultats : le rendement d’extraction a été de 2,66%, les composés phénoliques et terpénoïdes ont été révélés. Un mélange de β‐sitostérol et de stigmastérol, ainsi que l’acide bétulinique, ont été isolés. L’extrait méthanolique a montré une forte activité antibactérienne sur les souches de S. aureus et E. coli avec une CMI de 1.25 µg / ml et une très forte activité antifongique sur la souche de C. albicans avec une CMI de 0,78 µg / ml, de plus l’effet a été bactéricide et fongistatique. Conclusion : ces résultats démontrent que l’extrait méthanolique d’écorces de V. conferta présente des propriétés antimicrobiennes