Strategies to obtain tumor-reactive cells for cancer immunotherapy by cell sorting and genetic modifications of T lymphocytes.

Los recientes avances en el campo de la inmunoterapia contra el cáncer han hecho posible que dicha técnica se convierta en uno de los principales tratamientos del cáncer en la actualidad. En particular, la terapia adoptiva de células T (ACT, por sus siglas en inglés) es un enfoque potencialmente poderoso que se basa en la administración al paciente de células T específicas de tumor. Existen varias estrategias para obtener linfocitos T citotóxicos (CTL, por sus siglas en inglés) reactivos frente a tumor, los cuales han demostrado inducir notables respuestas en el contexto clínico. Sin embargo, existen limitaciones con respecto a los enfoques convencionales para obtener células T reactivas frente a tumor, tales como la precisión del procedimiento y la reproducibilidad. Con el fin de abordar estas cuestiones, desarrollamos dos técnicas para mejorar la precisión y la eficacia de la terapia con células T reactivas frente a tumor. Dichas técnicas podrían constituir alternativas eficaces, seguras y ampliamente aplicables a los métodos convencionales para la obtención de CTLs anti-tumorales. El primer enfoque de este estudio es la llamada "Tecnología de Dobletes". En este caso, demostramos que las interacciones péptido-antígeno leucocitario humano-receptor de células T (pHLA-TCR) que implican péptidos inmuno-reactivos son estables y fuertes. Por lo que, los CTLs unidos a través de TCR a las células tumorales pueden ser seleccionados y aislados mediante separación celular basada en citometría aprovechando la interacción estable entre los CTLs y las células diana. Los CTLs de pacientes con leucemia mieloide aguda (LMA) obtenidos mediante esta técnica muestran actividad citolítica contra células blásticas, lo que sugiere el potencial uso clínico de estos CTLs. La “Tecnologia de Dobletes” ofrece una terapia personalizada en la que no es necesario conocer a priori el antígeno tumoral. El segundo enfoque de este estudio es la tecnología de receptores de antígenos quiméricos (CAR, por sus siglas en ingles). Diseñamos varios CARs dirigidos frente al antígeno de maduración de células B (BCMA, por sus siglas en ingles). Las células T BCMA CAR muestran actividad citolítica específica de antígeno, producción de citoquinas incluyendo IFN-γ e IL-2, así como, capacidad proliferativa. Aunque confirmamos la presencia de BCMA soluble en suero de pacientes con mieloma múltiple (MM), demostramos que la presencia de proteína soluble no anula la eficacia de las células T BCMA CAR, lo que sugiere que dichas células pueden ser utilizadas en el contexto clínico para tratar el MM. La alta especificidad antigénica de las células T CAR permite una erradicación eficaz de las células tumorales y hace que la Tecnología CAR sea un tratamiento atractivo y ampliamente aplicable.Premio Extraordinario de Doctorado U

Formation of soy protein-based superabsorbent materials through optimization of a thermal processing

Superabsorbent materials are used in a wide range of products (e.g. personal care, controlled-release of nutrients in agriculture). The present study pretends the development of biodegradable materials from a natural source, a soy protein isolate, which eventually would help to diminish the environmental issues associated to the use of common synthetic materials. Moreover, the present work focuses on the modulation of the water uptake exclusively through the modification of the parameters of the thermal processes carried out during the development of those materials. Firstly, the protein isolate is blended with the plasticizer (glycerol) in a 1/1 ratio. Then, the homogeneous blend is injected using different mould temperatures and, subsequently, the bioplastics obtained are submitted to a dehydrothermal treatment (tdeshid) consisting on the storage of the samples at 50 ºC for a certain time (tdeshid). When the mould temperature is 70 ºC, superabsorbent materials are always obtained at tdeshid, shorter than 12 h. Conversely, viscoelastic properties increase as DHT treatment is longer, reducing the swelling that takes place during water absorption, and resulting more compact matrices. Thus, the present study proves how thermal processing modulation can solely determine the superabsorbent ability of soy protein-based biodegradable materials.Los materiales superabsorbentes son aplicables en campos tan diversos como productos de higiene personal o liberación controlada de nutrientes en agricultura. El presente estudio pretende el desarrollo de materiales biodegradables a partir de una materia prima natural, un aislado de proteína de soja, cuya aplicación supondría una disminución en el uso de materiales sintéticos, repercutiendo beneficiosamente en el medio ambiente; y la modulación de su capacidad de absorción de agua, que se modificará exclusivamente variando las condiciones de los procesos térmicos a los que son sometidas durante su obtención. En primer lugar, el aislado se mezcla con glicerina (plastificante)en una proporción 1/1, para después inyectar la masa homogénea utilizando diferentes temperaturas de moldeo (Tmold). Posteriormente, son sometidas a un tratamiento deshidrotérmico. o almacenamiento a 50ºC, durante cierto periodo de tiempo (tdeshid). Cuando la Tmold utilizada es 70ºC, se obtienen siempre materiales superabsorbentes, cuando el tdeshid seleccionado sea menos de 12h. Por otra parte, las propiedades viscoelásticas aumentan con la duración del tratamiento deshidrotérmico, provocando un menor hinchamiento durante la absorción de agua, resultando matrices menos porosas. Así, el presente estudio permite comprobar cómo modulando exclusivamente las condiciones de procesado pueden conseguirse capacidades superabsorbentes para materiales biodegradables basados en soja.Ministerio de Economía y Competitividad de España-CTQ2015-71164-

Upregulation of CD38 expression on multiple myeloma cells by novel HDAC6 inhibitors is a class effect and augments the efficacy of daratumumab

Multiple myeloma (MM) is incurable, so there is a significant unmet need for effective therapy for patients with relapsed or refractory disease. This situation has not changed despite the recent approval of the anti-CD38 antibody daratumumab, one of the most potent agents in MM treatment. The efficiency of daratumumab might be improved by combining it with synergistic anti-MM agents. We therefore investigated the potential of the histone deacetylase (HDAC) inhibitor ricolinostat to up-regulate CD38 on MM cells, thereby enhancing the performance of CD38-specific therapies. Using quantitative reverse transcription polymerase chain reaction and flow cytometry, we observed that ricolinostat significantly increases CD38 RNA levels and CD38 surface expression on MM cells. Super-resolution microscopy imaging of MM cells by direct stochastic optical reconstruction microscopy confirmed this rise with molecular resolution and revealed homogeneous distribution of CD38 molecules on the cell membrane. Particularly important is that combining ricolinostat with daratumumab induced enhanced lysis of MM cells. We also evaluated next-generation HDAC6 inhibitors (ACY-241, WT- 161) and observed similar increase of CD38 levels suggesting that the upregulation of CD38 expression on MM cells by HDAC6 inhibitors is a class effect. This proof-of-concept illustrates the potential benefit of combining HDAC6 inhibitors and CD38-directed immunotherapy for MM treatme

Evolution of the microstructure, chemical composition and magnetic behaviour during the synthesis of alkanethiol-capped gold nanoparticles

In the present paper, we show an exhaustive microstructural characterization of thiol-capped gold nanoparticles (NPs) with two different average particle sizes. These samples are compared with the polymer-like Au(I) phase formed as a precursor during the synthesis of the thiol-capped gold NPs. The set of analysed samples shows different microstructures at the nanoscale with different proportions of Au atoms bonded either to S or to Au atoms. It has been experimentally shown that the presence of a ferromagnetic-like behaviour is associated to the formation of NPs with simultaneous presence of Au–Au and Au–S bonds. In order to explain such magnetic behaviour a possible model is proposed based on the spin–orbit coupling so that localized charges and/or spins (Au–S bonds) can trap conduction electrons (Au–Au bonds) in orbits.XAS facilities at BM29 in ESRF and the technical support from G.L. Ciatto are acknowledged. Financial support from the Spanish MEC (NAN2004-09125-C07) and “Junta de Andalucía” is also acknowledged. E. Guerrero thanks the Spanish MEC for financial support.Peer reviewe

Selection of Tumor-Specific Cytotoxic T Lymphocytes in Acute Myeloid Leukemia Patients Through the Identification of T-Cells Capable to Establish Stable Interactions With the Leukemic Cells: “Doublet Technology”

The relevance of the immune system in cancer has long been studied. Autologous adoptive T cell therapies, based on the use of tumor infiltrating lymphocytes (TILs), have made great progress in recent years for the treatment of solid tumors, especially melanoma. However, further work is needed to isolate tumor-reactive T cells among patients diagnosed with hematologic malignancies. The dynamics of the interaction between T cells and antigen presenting cells (APC) dictate the quality of the immune responses. While stable joints between target cells and T lymphocytes lead to the induction of T cell activation and immune response, brief contacts contribute to the induction of immune-tolerance. Taking advantage of the strong interaction between target cell and activated T-cells, we show the feasibility to identify and isolate tumor-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) from acute myeloid leukemia (AML) patients by flow cytometry. Using this technology, CTLs bound through T cell receptor (TCR) to tumor cells can be identified in peripheral blood and bone marrow and subsequently selected and isolated by FACS-based cell sorting. These CTLs display higher percentage of effector cells and marked cytotoxic activity against AML blasts. In conclusion, we have developed a new procedure to identify and select specific cytotoxic T cells in patients diagnosed with acute myeloid leukemia.Instituto de Salud Carlos III PFIS-FI12/00189Instituto de Salud Carlos III ISCIII PI14/02074Instituto de Salud Carlos III PI11/02366Instituto de Salud Carlos III PI17/02177European Union (ERDF/ESF, Investing in your future)CIBER CB16/12/0048

Mezclas de alginato y proteína de soja para el desarrollo de matrices porosas con potencial aplicación en ingeniería tisular

Los biopolímeros, como polisacáridos y proteínas, son materiales extraordinariamente atractivos para la obtención de matrices porosas con potencial aplicación en ingeniería tisular; debido, a la mejor solubilidad en agua, biocompatibilidad, biodegradabilidad y capacidad de funcionalización que presentan estos biomateriales frente a los polímeros sintéticos. El alginato es un polisacárido de bajo coste, capaz de formar geles estables en presencia de iones divalentes como el Ca2+. Sin embargo, también es conocida su pérdida de resistencia mecánica a lo largo del tiempo, lo que ocasiona su desintegración, suponiendo una importante limitación en aplicaciones biomédicas. El objetivo de este estudio ha sido superar este inconveniente mediante el mezclado de alginato con proteína de soja, obteniendo bioplásticos por inyección usando glicerina como plastificante, así como estudiar su posible aplicación como matrices en ingeniería tisular. En el estudio se modificaron las concentraciones de alginato y proteína de soja para observar la variación que esto suponía para las propiedades de los bioplásticos mediante ensayos reológicos de tracción, absorción de agua y pérdida de material soluble.Además, se estudió la influencia de las concentraciones de las disoluciones de CaCl2, utilizadas para promover la retención del alginato en las matrices, las cuales fueron evaluadas mediante ensayos reológicos de compresión.Biopolymers as polisacharydes and proteins are extremely atractive materials to the obtainment of porous matrixes with a potential application in tissue engineering, because of their better solubility in water, biocompatibility, biodegradability and their capacity of functionalization which those materials present versus the synthetic polymers. Alginate is a low cost polysaccharide. It can form stable gels in the presence of divalent ions as Ca2+. However, it is known that its mechanic resistance decreases along time, being that an important limitation to use alginate in biomedicine applications. The principal aim of this study has been overcome this disadvantage mixing alginate with a soy protein isolate, obtaining injected bioplastics using glycerol as plasticizer, study their potential use in tissue engineering. The concentration of alginate and soy protein were modified in blends to observe variations in the properties of bioplastics by means of rheological tests of traction, water uptake and soluble material lost essays. In addition, the influence of different concentrations of CaCl2 in aqueous solution, used to promote the retention of alginate in the matrixes, evaluates then by rheological essays in compression tests.Ministerio de Economía y Competitividad (España) FEDER CTQ2015-71164-

Efecto del procesado sobre las propiedades y morfología de bioplásticos de proteína de soja

La industria de los plásticos ha crecido notablemente en los últimos años. Este crecimiento, ligado a la baja biodegradabilidad de estos materiales, ha causado un grave problema medioambiental. La presente investigación pretende la obtención de materiales con alta capacidad de absorción de agua, que sean biodegradables y obtenidos a partir de fuentes renovables. Deberían además poseer propiedades mecánicas adecuadas para constituir una alternativa real a los plásticos sintéticos. Estos bioplásticos son obtenidos mediante un proceso con diferentes etapas: una de mezclado de los componentes para conformar una masa homogénea; y una segunda de inyección en la que, aplicando presión, la masa es introducida en un molde de forma deseada. La capacidad de absorción de agua es afectada por la composición y las condiciones de procesado. El presente documento estudia cómo la temperatura y duración de la etapa de moldeo, además del tratamiento dehidrotérmico, modifican la capacidad de absorción del bioplástico. Los resultados concluyen que la capacidad de absorción de agua aumenta con menores temperaturas y tiempos de moldeo, a la vez que aumenta cuando el tratamiento dehidrotérmico es más corto. Asimismo, los módulos viscoelásticos poseen una tendencia a disminuir cuando la capacidad de absorción de agua en las muestras aumenta.The remarkable growth experienced by the production and demand of the plastic industry during the last few years has resulted in a serious environmental issue associated specially to their low biodegradability. This work is focused on the manufacture of bioplastics with high water absorption capacity, obtained from renewable sources. Bioplastics produced should have adequate mechanical properties to be able to replace eventually synthetic plastics in specific markets. In order to obtain these bioplastics, two steps were carried out: the first one consists of a mixing stage to achieve a homogenous blend that is injection-molded during the second step. The water uptake capacity of these samples is influenced by both the formulation and the processing conditions of the blends. The present study is focused on the evolution of water uptake values when either the molding conditions (temperature and duration) or the length of a post-dehydrothermal treatment are modified. Results indicated an improvement in the water uptake when lower mold temperatures and shorter compaction stages were used. An analogous improvement was observed when the dehydrotermal process was shorter. Mechanical properties usually decreased as the water uptake of samples was improved.Plan Propio de la Universidad de Sevilla Proyecto: 2017/00000962MINECO (España)/FEDER (UE) proyecto CTQ2015-71164-

Combined treatment of graft versus host disease using donor regulatory T cells and ruxolitinib

[EN] Donor derived regulatory T lymphocytes and the JAK1/2 kinase inhibitor ruxolitinib are currently being evaluated as therapeutic options in the treatment of chronic graft versus host disease (cGvHD). In this work, we aimed to determine if the combined use of both agents can exert a synergistic effect in the treatment of GvHD. For this purpose, we studied the effect of this combination both in vitro and in a GvHD mouse model. Our results show that ruxolitinib favors the ratio of thymic regulatory T cells to conventional T cells in culture, without affecting the suppressive capacity of these Treg. The combination of ruxolitinib with Treg showed a higher efficacy as compared to each single treatment alone in our GvHD mouse model in terms of GvHD incidence, severity and survival without hampering graft versus leukemia effect. This beneficial effect correlated with the detection in the bone marrow of recipient mice of the infused donor allogeneic Treg after the adoptive transfer.SITis study is partially funded by NovartisThe authors thank Dr. João Lacerda for critical reading of the manuscript. This work was supported by grants from Novartis and the Andalusian Regional Government (P18-RT-4047, PI-0052-2018). A.R.G. and J.A.P.S. are members of CIBERONC (CB16/12/00480) and TerCel (16/0011/0035). J.V. is member of CIBERNED (CB06/05/0027). A.R.G. is funded by a Grant of the University of Seville (US-1380874) co-funded by the European Regional Development Fund (ERDF)

Planta de producció de clorur de vinil

La proposta que se'ns planteja, i per tant l'objectiu a assolir, és dissenyar una planta productora de clorur de vinil. La producció es realitzarà a partir de clorur d'hidrogen i acetilè, utilitzant clorur d'hidrogen com a catalitzador. Juntament amb el disseny de la planta s'aportarà un estudi econòmic i una proposta de construcció. El projecte de implementarà al Polígon Industrial 'Gasos Nobles' al terme municipal de Sabadell, és per això que s'ha tingut en compte la normativa i legislació vigent tant a nivell urbanístic com sectorial, en les àrees de medi ambient, emmagatzematge, seguretat i prevenció contra incendis