Purificación y caracterización del regulador transcripcional All7016 de la cianobacteria Anabaena sp. PCC7120

Para los organismos vivos algunos metales son micronutrientes minerales esenciales en eldesarrollo de procesos celulares que son fundamentales para su viabilidad. En las cianobacterias lademanda de metales es excepcionalmente alta como consecuencia de su capacidad de realizar lafotosíntesis y en algunos casos de fijar nitrógeno. Sin embargo, un desequilibrio en la homeostasisde metales puede comprometer el crecimiento y supervivencia celular. Al igual que la mayoría deprocariotas, las cianobacterias cuentan con reguladores de la familia FUR (Ferric UptakeRegulator) que controlan la homeostasis de metales a nivel transcripcional y regulan la expresiónde otros muchos genes que pertenecen a rutas metabólicas diversas. Anabaena sp. PCC 7120contiene tres parálogos FUR, denominados FurA, FurB y FurC. Estos reguladores, además deregular un gran número de genes de forma directa, se ha propuesto que podrían controlar muchosprocesos celulares de forma indirecta, ya que se ha descrito que modulan la transcripción de otrosreguladores transcripcionales, orquestando redes de regulación transcripcional en estacianobacteria. Con el fin de ampliar el conocimiento de las redes de regulación mediadas porproteínas FUR, en este trabajo se ha llevado a cabo la sobreexpresión, purificación ycaracterización del marco de lectura abierto All7016, anotado en las bases de datos como unregulador transcripcional, cuya transcripción está regulada por la proteína FurC. Además derealizar un estudio bioinformático para conocer sus propiedades fisicoquímicas y determinar lapresencia de dominios funcionales en su secuencia de aminoácidos, se ha optimizado susobrexpresión en E. coli y establecido un protocolo para su purificación. Por último, medianteensayos de retardo de la movilidad electroforética se ha estudiado la capacidad de unión al DNA dela proteína purificada.<br /