العزل, التشخيص الجزيئي والتقييم المخبري للفطريات الممرضة Metarhizium sp. وفطر Beauveria sp للحشرات مثل فطر. واستخدامها ضد حشرة سوسة النخيل الحمراء

Background: Plant diseases generate challenging problems in commercial, agriculture and pose real economic threats. The red palm weevil (Rhynchophorus ferrugineus) (RPW) is one of the most destructive pests of palms in the world. Nowadays, control methods revolve around treatments based on chemicals, biotechnological systems using semichemicals or the development of the sterile insect technique and Biological control. Objectives: Our aim was to evaluate the entomopathogenicity of indigenous Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae against larvae and adults of R. ferrugineus. Methodology: B. bassiana & M. anisopliae taken from dead adults and dead larvae of R. Ferrugineus. Utilizing morphological analysis & molecular identification test by using PCR technique. Evaluation the efficiency of the isolated fungi under lab conditions and optimize it as biological control agent product after divided all adults and larvae into 4 groups. Incubation the adults RPW groups for 28 days and 6 days for larvae RPW groups. On another hand, the ability of treated RPW male to infect if the females was examined. All Data was examined by (Abbott's Formula) in this study. Results: Our results showed that the B. bassiana and M. anisopliae exhibited a good biological control agent against larvae and adults of RPW. The pathogenicity of the two most virulent isolates and the toxicity assay on larvae showed the highest mortality percentage which reached to 100% against the larvae with B. Bassiana, but reaches to 90% after spraying the larvae with M. anisopliae, and reaches 43.3% after treated by pesticide. The bioassay on the adults of RPW and the maximum mortality of weevils reaches 100% on 28th day after spraying the adult with B. bassiana, while the mortality was up to 90% after spraying the adult with M. anisopliae. The mortality for the adults treated with pesticide arrives to 50% and the control group 10% at the same time. Also, our results revealed that the infection males of RPW by EPF can be disseminated into the healthy population, after treatment the male adults of the RPW by B. bassiana and M. anisopliae. The highest mortality of up to 90% for two isolated fungi compare with the group which was treated with pesticide (20%) after incubation for 28 day. Conclusions: Our research concludes that B. bassiana and M. anisopliae locally isolated can be used as biological control agents with great efficacy. Keywords: B. bassiana, M. anisopliae, Red Palm Weevil, Molecular identification, Biocontrol.خلفية الدراسة: أمراض النباتات ينتج عنها خسائر تجارية وزراعية صعبة تشكل تهديدات اقتصادية حقيقية سوسة النخيل الحمراء(R. ferrugineus) هي واحدة من الآفات الأكثر تدميرا لأشجار النخيل في العالم، وخاصة في قطاع غزة. طرق المكافحة تدور حول العلاجات القائمة على المواد الكيميائية، وأنظمة التكنولوجيا الحيوية باستخدام semichemicals أو تطوير تقنية الحشرة العقيمة والمكافحة الحيوية. الأهداف: هدفنا من هذه الدراسة هو تقييم الفطريات الممرضة مثل B. bassiana وفطر M. anisopliae واستخدامها ضد اليرقات والبالغين من حشرة سوسة النخيل الحمراء. الطرق والأدوات: وقد تم عزل الفطريات (B. bassiana وفطر M. anisopliae) من اليرقات والبالغين الفانية من سوسة النخيل الحمراء. حيث تم عزلها وتنميتها على أوساط غذائية عامة واستخدام أوساط غذائية خاصة لنمو الفطريات وتم تحديد البصمة الوراثية باستخدام تقنية PCR لمضاعفة الجينات الخاصة بالفطريات. تم تقييم كفاءة الفطريات المعزولة في ظل ظروف المختبر وذلك على الوجه الأمثل كمنتج للمكافحة الحيوية بعد تقسيم كل من البالغين واليرقات إلى 4 مجموعات. فترة الحضانة لسوسة النخيل الحمراء لمدة 28 يوما للحشرات البالغة و 6 أيام لليرقات من سوسة النخيل الحمراء. علاج البالغين الذكور من سوسة النخيل الحمراء لتقييم ما إذا كانت الذكور ستصيب الإناث بالفطريات الممرضة أم لا، بعد تقسيم كل من الحشرات إلى 4 مجموعات كما هو مبين أعلاه. تم فحص كافة البيانات باستخدام قانون (Abbott's Formula). النتائج: أظهرت نتائجنا أن الفطريات التي تم عزلها (B. bassiana & M. anisopliae) يمكن استخدامها بشكل جيد كعوامل مكافحة حيوية ضد اليرقات والبالغين من سوسة النخيل الحمراء. وقد أظهرت سمية واضحة على اليرقات حيث كانت أكثر ضراوة عليها وكانت أعلى نسبة موت وصلت إلى 100٪ خلال 6 أيام من رشّ اليرقات من فطر B. bassiana ، ولكن نسبة الموت وصلت إلى 90 ٪ بعد رشّ اليرقات من فطر M. anisopliae. في حين وصلت نسبة الموت في اليرقات التي تم معالجتها بالمبيدات الكيميائية إلى 43.3٪ في نفس الوقت. التقييم المخبري على الحشرات البالغة من سوسة النخيل الحمراء وأعلى معدل للموت وصل إلى 100٪ خلال 28 يوماً بعد رش الحشرات البالغة الكبار من فطر B. bassiana, في حين أن معدل الوفيات وصل إلى 90٪ بعد رش الحشرات البالغة من فطر M. anisopliae. ولكن كانت نسبة الوفيات من الحشرات البالغة 50٪ بعد أن تم معالجتها بالمبيدات الكيميائية والمجموعة الضابطة التي تم رشها بالماء المقطر كانت نسبة الموت تصل فيها إلى 10٪ في نفس الوقت. أيضا، كشفت نتائجنا أن العدوى يمكن أن تنشر من ذكور سوسة النخيل الحمراء إلى الإناث أثناء التزاوج، بعد معاملة البالغين الذكور من سوسة النخيل الحمراء من فطر B. bassiana وفطر M. anisopliae. حيث وصل أعلى معدل للوفيات إلى 90٪ لكلا الفطرين مقارنة بالمجموعة التي تم معالجتها كيميائيا باستخدام المبيدات التي وصلت فيها نسبة الموت إلى 20٪ بعد فترة الحضانة التي كانت لمدة 28 يوماً. الاستنتاج: يستنتج من ذلك أن كلا من الفطريات المعزولة ((B. bassiana & M. anisopliae ,والتي تم عزلها محليا يمكن أن تستخدم كعوامل مكافحة حيوية ناجحة. الكلمات المفتاحية: B. Bassiana ,M. anisopliae, سوسة النخيل الحمراء, التشخيص الجزيئي, المقاومة الحيوية