Circulating Very Small Embryonic-Like Stem Cells in Cardiovascular Disease

Very small embryonic-like cells (VSELs) are a population of stem cells residing in the bone marrow (BM) and several organs, which undergo mobilization into peripheral blood (PB) following acute myocardial infarction and stroke. These cells express markers of pluripotent stem cells (PSCs), such as Oct-4, Nanog, and SSEA-1, as well as early cardiac, endothelial, and neural tissue developmental markers. VSELs can be effectively isolated from the BM, umbilical cord blood, and PB. Peripheral blood and BM-derived VSELs can be expanded in co-culture with C2C12 myoblast feeder layer and undergo differentiation into cells from all three germ layers, including cardiomyocytes and vascular endothelial cells. Isolation of VSLEs using fluorescence-activated cell sorting multiparameter live cell sorting system is dependent on gating strategy based on their small size and expression of PSC and absence of hematopoietic lineage markers. VSELs express early cardiac and endothelial lineages markers (GATA-4, Nkx2.5/Csx, VE-cadherin, and von Willebrand factor), SDF-1 chemokine receptor CXCR4, and undergo rapid mobilization in acute MI and ischemic stroke. Experiments in mice showed differentiation of BM-derived VSELs into cardiac myocytes and effectiveness of expanded and pre-differentiated VSLEs in improvement of left ventricular ejection fraction after myocardial infarction

Randomizowane badanie aktywności płytek krwi po jednorazowym lub stopniowym zaprzestaniu podawania klopidogrelu u pacjentów po zabiegach angioplastyki tętnic wieńcowych

Background: Clinical studies have suggested increased risk of thrombotic events after planned cessation of clopidogrel therapy, due to increased platelet reactivity (platelet rebound); however, in many studies platelet function was not assessed before introducing clopidogrel. Patients who are scheduled to stop clopidogrel therapy, do it abruptly, so a gradual drug cessation might provide a beneficial treatment strategy. Aim: To determine whether a clopidogrel discontinuation results in platelet rebound hyperaggregability with increased activity compared to pre-treatment values and to assess whether abrupt or tapering clopidogrel cessation may affect platelet reactivity. Methods: Patients with stable coronary artery disease (n = 49), on chronic acetylsalicylic acid treatment, who underwent coronary angiography, and were scheduled for elective percutaneous coronary intervention with stent implantation were en­rolled. Patients were randomised to either a tapering clopidogrel discontinuation during a two-week period (tapering group, n = 25) or abrupt drug cessation (abrupt group, n = 24). After 12 months of dual antiplatelet therapy with clopidogrel and acetylsalicylic acid, we performed three follow-up visits with blood sampling. Platelet aggregation was assessed using a mul­tiple electrode aggregometer at inclusion, at cessation day, and seven and 14 days after complete clopidogrel discontinuation. The primary endpoint was the level of adenosine-diphosphate (ADP)-induced platelet aggregation. We also analysed platelet function in the ASPI test and platelet count as secondary endpoints. Results: In 36 patients included in the main analysis, we found significant differences between the two study groups in the levels of ADP-induced platelet aggregation at days seven and 14 after cessation of clopidogrel (p = 0.004 and p = 0.04, respectively). In the abrupt group, platelet aggregation returned to the values similar to baseline at day seven. There were no significant differences between baseline, seven, and 14 days after drug cessation (p = 0.92 and p = 0.37, respectively). However, in the tapering group, ADP values at seven and 14 days after drug cessation were significantly decreased, comparing to baseline (p < 0.0001 and p = 0.009, respectively). For the ASPI test and platelet count we did not find significant differ­ences between the groups. All values returned to levels similar to the baseline. During the follow-up there were no serious cardiovascular events or bleedings. Conclusions: Tapering vs. abrupt discontinuation of clopidogrel treatment results in significantly lower platelet aggregation values after 14 days from complete drug cessation. We found no evidence of a platelet rebound effect.Wstęp: Wyniki badań klinicznych pokazały przejściowy wzrost częstości występowania incydentów zakrzepowych po zaprzestaniu długoterminowej terapii klopidogrelem. Za zjawisko to może odpowiadać zniesienie hamującego wpływu klopidogrelu na płytki krwi i występowanie mechanizmu z odbicia — wzrost aktywności płytek krwi po odstawieniu klopidogrelu do poziomów wyższych niż aktywność płytek przed zastosowaniem tego leku. Cel: Celem badania była ocena aktywności płytek krwi po standardowym, nagłym zaprzestaniu stosowania klopidogrelu i stopniowym odstawianiu tego leku przeciwpłytkowego u pacjentów po zabiegach angioplastyki tętnic wieńcowych. Metody: Do badania włączono 49 pacjentów z chorobą wieńcową, długotrwale leczonych kwasem acetylosalicylowym (ASA), którzy po koronarografii zostali zakwalifikowani do angioplastyki tętnic wieńcowych z implantacją stentu. Pacjenci zostali losowo przydzieleni do grupy stopniowego wyłączania klopidogrelu przez okres 14 dni lub do grupy standardowego zakończenia terapii przeciwpłytkowej. Aktywność płytek krwi oceniano na podstawie agregacji płytek wywołanej przez adenozynodifosforan (test ADP) w chwili włączania pacjenta do badania i podczas trzech wizyt po zaprzestaniu podawania klopidogrelu. Drugorzędowy punkt końcowy obejmował aktywność płytek krwi w odpowiedzi na kwas arachidonowy (test ASPI). Wyniki: Wykazano istotne różnice w aktywności płytek krwi w teście ADP między obiema badanymi grupami w 7. i 14. dniu po zaprzestaniu podawania klopidogrelu (odpowiednio, p = 0,004 i p = 0,04). W grupie jednorazowego odstawienia leku zaobserwowano powrót aktywności płytek krwi do wartości wyjściowych już w 7. dniu po odstawieniu klopidogrelu. Aktywność płytek nie różniła się znamiennie w dniu 7. i 14. po zakończeniu leczenia od wartości wyjściowych (odpowiednio p = 0,92 i p = 0,37). W grupie stopniowego odstawiania klopidogrelu wartości aktywności płytek krwi w 7. i 14. dniu po zaprzestania przyjmowania leku były istotnie mniejsze od wartości wyjściowych (odpowiednio, p < 0,0001 i p = 0,009). W przypadku testu ASPI nie stwierdzono istotnych statystycznie różnic między badanymi grupami. Podczas obserwacji pacjentów nie wystąpiły żadne poważne incydenty sercowo-naczyniowe ani epizody krwawienia. Wnioski: Stopniowe odstawianie klopidogrelu w porównaniu z odstawieniem nagłym prowadziło do istotnie mniejszej aktywności płytek krwi 14 dni po zaprzestaniu leczenia klopidogrelem.