Detecção de resíduos de enrofloxacina por ensaio imunoenzimático e cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em ovos comerciais de galinha após tratamento

A enrofloxacina é um dos antimicrobianos mais utilizados na avicultura industrial, e a deposição de resíduos em produtos avícolas, como os ovos, são de grande importância para a saúde pública. Na legislação brasileira não existe padronização do período de carência para o seu uso na produção avícola e não há Limite Máximo de Resíduo (LMR) fixado para enrofloxacina em ovos. Neste estudo, foi utilizado o kit de ELISA comercial (Bioo Scientific(r)) e a LC-MS/MS na pesquisa de enrofloxacina em ovos de 30 galinhas tratadas previamente via água de bebida, com 10mg/kg de enrofloxacina, durante cinco dias. Seis ovos foram coletados diariamente e analisados durante o tratamento e após a sua suspensão, durante 15 dias. A deposição de resíduos obteve níveis máximos no quinto dia de tratamento das aves, declinando gradativamente até não ser detectada a partir do nono dia de suspensão do tratamento. Considerando como base o LMR de 100µg/kg fixado pelo Brasil para tecidos comestíveis de aves e pela União Europeia para músculo, gordura e pele, após seis dias de suspensão do tratamento, os níveis de resíduos foram inferiores a esse limite, tendo como médias 37,43µg/kg na LC-MS/MS e 14,731µg/kg no ELISA. Dentro das condições deste estudo, um período de carência de seis dias seria mais adequado para utilização dos ovos para consumo humano. Foram detectados valores de resíduos nos ovos menores no ELISA em relação à LC-MS/MS para a mesma amostra, mas os dois métodos apresentaram concordância estatística entre si. A LC-MS/MS é o teste recomendado pela legislação brasileira para a análise de resíduos em alimentos; entretanto, pelos resultados obtidos, o kit de ELISA utilizado também pode ser aplicado na detecção de resíduos de enrofloxacina em ovos, com as vantagens de rapidez e simplicidade

Efficiency of inactive vaccines against contagious agalactia in Brazil

This paper aims to evaluate the efficiency of three inactive vaccines against contagious agalactia prepared with samples of Mycoplasma agalactiae isolated in Brazil and different adjuvants. Vaccine 1 adsorbed with aluminum hydroxide was administered in 23 goats (Gc1) and 13 sheep (Gov1); vaccine 2 containing Montanide IMS-2215-VG was administered in 22 goats (Gc2) and 12 sheep (Gov2) and vaccine 3, containing Montanide Gel-01 was administered in 22 goats (Gc3) and 12 sheep (Gov3). All animals were negative for Ma at indirect ELISA and received two doses of 2mL each, subcutaneously, within a 21 day interval. Five animals from each species were used as control. Seventy-five days after the booster, four animals from each vaccinated group and two from the control group were challenged with 5mL of Ma culture containing 10(7)cfu/mL, orally and through immersion of the female's udder in lactation. The serological response was analyzed during vaccination days (0 and 21) and at 51, 81, 111, 141 and 171 days after vaccination. The collection and analysis of the challenged animals were conducted at the day of the challenge (D0) and 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49 and 56 days after the challenge. The three vaccines induced the production of antibodies, having no significant statistical difference (p<0.05). Animals from groups Gc1, Gc2 and Gov2 developed higher levels of antibodies, with significant statistical difference compared to the other vaccinated group and control group (p<0.05). After the challenge, the animals from the control presented an increase in regional lymph nodes and conjunctivitis, mastitis and arthritis. In four vaccinated animals, discrete conjunctivitis and congestion of the episcleral veins was observed. It is concluded that vaccines 1 and 2 induced levels of protective antibodies in goats and sheep, sufficient for clinical protection of the animals submitted to the experimental infection, indicating its use on the prevention of contagious agalactia

Infecção congênita em cabritos por Mycoplasma agalactiae

This study aimed to report three cases of contagious agalactia (CA) by Mycoplasma agalactiae in goat kids born with polyarthritis. The nanny goats belonging to two different herds presented clinical signs of CA during pregnancy and in parturition they were apparently healthy. The carpal articulations of the three goat kids, the tarsus articulation in one, and thigh-femoral articulation in another showed swelling, pain and impairment of the flexion-extension movements. The articular liquid was collected from two goat kids at birth and revealed a content which varied from transparent to fibrinopurulent, presenting a yellow coloring. The samples were plated on modified Hayflick. The colonies had the appearance of "fried egg" and were confirmed as being M. agalactiae by biochemical tests and 16S rRNA PCR. Blood was collected from three animals soon after birth and submitted to the indirect ELISA test for the determination of the titration of the anti- M. agalactiae antibodies. The results confirmed that the goat kids were infected during pregnancy by M. agalactiae and resulted in the birth of an offspring with clinical signs of CA being immune tolerant

ELISA com antígeno misto de Mycoplasma pulmonis e M. arthritidis para diagnóstico da micoplasmose murina

A infecção de colônias de roedores por microrganismos do gênero Mycoplasma pode causar interferências no resultado de pesquisas científicas. Mycoplasma pulmonis e Mycoplasma arthritidis são os principais agentes deste gênero, e sua prevalência pode chegar a 100% em biotérios convencionais nos países em desenvolvimento. A detecção pelos métodos disponíveis no mercado normalmente apresenta limitações. Um dos testes mais utilizados é o ELISA, com elevada sensibilidade, especificidade e baixo custo. Este trabalho teve como objetivo desenvolver um teste de ELISA com antígeno misto de M. pulmonis e M. arthritidis e avaliar o seu desempenho como método alternativo de diagnóstico de micoplasmose. Soros de 81 ratos foram testados utilizando antígeno de M. pulmonis (ELISA-Mp), M. arthritidis (ELISA-Ma) e antígeno misto a 1:1 (ELISA-mix). 50,61% dos soros foram positivos no ELISA-Mp, 44,44% no ELISA-Ma e 46,91% no ELISA-mix. No ELISA-mix houve sensibilidade de 72,00%, especificidade de 64,28% e valor preditivo positivo de 47,36%. A análise estatística dos dados mostra concordância entre o ELISA-Mp e o ELISA-mix. O teste de ELISA misto desenvolvido apresenta padrão de sensibilidade e especificidade satisfatório, e pode contribuir de forma expressiva para a melhora do padrão sanitário dos animais de laboratório e para o desenvolvimento de pesquisa experimental