Hepatic lipogenesis gene expression in two experimental egg-laying lines divergently selected on residual food consumption

Two Rhode Island Red egg-laying lines have been divergently selected on residual food intake (low intake R- line, high intake R+ line) for 19 generations. In addition to direct response, correlated responses have altered several other traits such as carcass adiposity and lipid contents of several tissues, the R+ animals being leaner than the R- ones. In a search for the biological origin of the differences observed in fat deposit, the hepatic mRNA amounts of genes involved in lipid metabolism were investigated. No difference was found between lines for mRNA levels of ATP citrate-lyase, acetyl-CoA carboxylase, fatty acid synthase, malic enzyme and CCAAT/enhancer binding protein α, a transcription factor acting on several lipogenesis genes. The genes coding for stearoyl-CoA desaturase and apolipoprotein A1 displayed significantly lower mRNA levels in the R+ cockerels compared to the R-. All together these mRNA levels explained 40% of the overall variability of abdominal adipose tissue weight, suggesting an important role of both genes in the fatness variability

Messenger RNA levels and transcription rates of hepatic lipogenesis genes in genetically lean and fat chickens

Levels of body fat content in commercial meat chickens have prompted research in order to control the development of this trait. Based on experimentally selected divergent lean and fat lines, many studies have shown that liver metabolism has a major role in the fatness variability. In order to identify which genes are involved in this variability, we investigated the expression of several genes implicated in the hepatic lipid metabolism. The studied genes code for enzymes of fatty acid synthesis [ATP citrate-lyase (ACL), acetyl-CoA carboxylase (ACC), fatty acid synthase (FAS), malic enzyme (ME), stearoyl-CoA desaturase (SCD1)], for an apolipoprotein [apolipoprotein A1 (APOA1)], and for the CCAAT/enhancer binding protein α (C/EBPα), which is a transcription factor implied in the regulation of several genes of lipid metabolism. The results show that the fat-line chickens display significantly higher hepatic transcription rates and mRNA levels than the lean-line chickens for the ACL, ME and APOA1 genes. This suggests that these genes could be responsible for the phenotypic fatness variability

Contribution à l'étude de la modulation allostérique du récepteur muscarinique M1 (Recherche de modulateurs positifs originaux. Caractérisation de l'interaction de divers ligands fluorescents)

Les récepteurs muscariniques appartiennent à la vaste famille des RCPGs, des protéines membranaires assurant la communication entre les cellules de l'organisme. Le récepteur muscarinique M1 est principalement exprimé au niveau central, où il constitue une cible thérapeutique privilégiés pour des pathologies telles que la maladie d'Alzheimer et la schizophrénie.Dans un premier temps, j'ai recherché de nouveaux modulateurs allostériques positifs du récepteur muscarinique M1 par criblage fonctionnel au sein de la chimiothèque Prestwick Chemical. Dans un deuxième temps, j'ai étudié le mode d'interaction des ligands fluorescents Bodipy-pirenzépine avec le récepteur M1, mettant ainsi en évidence la nature bitopique orthostérique/allostérique de tous ces dérivés quelques soit la longueur de leur espaceur. La troisième partie de mon travail est consacré au développement et à la caractérisation d'un dérivé fluorescent d'AC-42 comme traceur allostérique fluorescent du récepteur M1.Muscarinic receptors belong to the large GPCRs family. They are involved in a number of physio-pathological processes and are potential therapeutic targets. During my PhD thesis, I have much interest in the muscarinic M1 sub-type which is essentially expressed in the CNS and is of particular interest for the treatment of Alzheimer Disease or schizophrenia. First, the prestwick chemical library was screened in order to find novels positives allosteric modulators. Calcium mobilization was used as a functional read out, but only leads to identification of signaling pathway modulators. In a second time, the orthosteric/allosteric nature of Bodipy-pirenzepine derivatives/muscarinic M1 receptor interaction was studied. All bodipy-pirenzepine derivatives are bitopic ligands whatever the nature and the length of their linker.Finally, AC-42 fluorescent derivatives were developed and characterized as fluorescent allosteric tracer of the muscarinic M1 receptor.STRASBOURG-Sc. et Techniques (674822102) / SudocSudocFranceF

Développement d'une technique de PCR quantitative en temps réel pour le diagnostic de la toxoplasmose et application chez les patients allogreffés de moelle osseuse

Des techniques de détection sensibles, rapides et spécifiques sont indispensables au diagnostic de la toxoplasmose chez les patients immunodéprimés ou en cas de suspicion d'atteinte fœtale. L'objectif de ce travail est de mettre au point une technique de diagnostic moléculaire appliquée à Toxoplasma gondii par PCR en temps rél sur le Rotor-Gene6000® avec contrôle interne compétitif. Des amorces et une sonde Taqan (FAM-BHQ1) spécifiques de la séquence répétée de 529 bp ont été sélectionnées. Le contrôle interne d'amplification a été construit par clonage : il s'agit d'un fragment d'ADN d'Arabidopsis thaliana flanqué d'amorces spécifiques à la séquence de 529 pb de T. gondii. Une deuxième sonde TaqMan, spécifique du contrôle interne, a été choisie et testée (YY-BHQ1). La répétabilité et la reproductibilité de notre technique ont été évaluées. Une étude clinique a alors été réalisée sur des patients allogreffés de moelle osseuse du service d'Hématologie Clinique de l'Hôtel Dieu de Clermont-Ferrand, afin d'évaluer la fréquence des réactivations toxoplasmiques dans cette population. Des prélèvements de sang total ont été analysés de façon hebdomadaire puis bi-mensuelle pendant les 6 premiers mois post-greffe. Chez les patients séropositifs pour la toxoplasmose et recevant une prophylaxie adéquate, l'incidence des réactivations est de 3,6%. Chez les allogreffés ne pouvant pas recevoir de prophylaxie, la fréquence des réactivations toxoplasmiques et le risque important de décès en cas de réactivation devrait inciter à faire un suivi hebdomadaire par PCR Toxoplasma gondii.CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocLYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF

Activité transcriptionnelle de genes impliqués dans le métabolisme des lipides chez des lignées grasse et maigre de poulet

*INRA-ENSAR Laboratoire de Génétique Animale 65 rue de Saint-Brieuc 35042 Rennes Diffusion du document : INRA-ENSAR Laboratoire de Génétique Animale 65 rue de Saint-Brieuc 35042 RennesNational audienc

Messenger RNA levels and transcription rates of hepatic lipogenesis genes in genetically lean and fat chickens

Levels of body fat content in commercial meat chickens have prompted research in order to control the development of this trait. Based on experimentally selected divergent lean and fat lines, many studies have shown that liver metabolism has a major role in the fatness variability. In order to identify which genes are involved in this variability, we investigated the expression of several genes implicated in the hepatic lipid metabolism. The studied genes code for enzymes of fatty acid synthesis [ATP citrate-lyase (ACL), acetyl-CoA carboxylase (ACC), fatty acid synthase (FAS), malic enzyme (ME), stearoyl-CoA desaturase (SCD1)], for an apolipoprotein [apolipoprotein A1 (APOA1)], and for the CCAAT/enhancer binding protein $\alpha$ (C/EBP$\alpha$), which is a transcription factor implied in the regulation of several genes of lipid metabolism. The results show that the fat-line chickens display significantly higher hepatic transcription rates and mRNA levels than the lean-line chickens for the ACL, ME and APOA1 genes. This suggests that these genes could be responsible for the phenotypic fatness variability.Niveaux d'ARNm et taux de transcription hépatiques de gènes de la lipogénèse chez des poulets génétiquement gras et maigres. L'engraissement excessif du poulet de chair a conduit à développer des recherches afin de maîtriser ce caractère défavorable. De nombreuses études, effectuées sur des lignées expérimentales de poulets gras et maigres obtenues par sélection divergente, ont montré que le métabolisme hépatique joue un rôle majeur dans la variabilité de l'état d'engraissement. Dans le but d'identifier les gènes impliqués dans cette variabilité, le niveau d'expression hépatique de différents gènes impliqués dans le métabolisme des lipides a été analysé. Les gènes étudiés codent pour des enzymes de la synthèse des acides gras [ATP citrate-lyase (ACL), acétyl-CoA carboxylase (ACC), synthase des acides gras (FAS), enzyme malique (ME), stéaroyl-CoA désaturase (SCD1)], pour une apolipoprotéine [apolipoprotéine A1 (APOA1)], et pour C/EBP$\alpha$ (CCAAT/enhancer binding protein $\alpha$), un facteur de transcription régulant plusieurs gènes du métabolisme des lipides. Les résultats montrent que les poulets de la lignée grasse présentent des taux de transcription et des niveaux de messagers hépatiques des gènes ACL, EM et APOA1 significativement plus élevés que ceux de la lignée maigre. Ce résultat suggère que ces gènes pourraient être responsables de la variabilité d'engraissement observée

Hepatic lipogenesis gene expression in two experimental egg-laying lines divergently selected on residual food consumption

Two Rhode Island Red egg-laying lines have been divergently selected on residual food intake (low intake R$^-$ line, high intake R$^+$ line) for 19 generations. In addition to direct response, correlated responses have altered several other traits such as carcass adiposity and lipid contents of several tissues, the R$^+$ animals being leaner than the R$^-$ ones. In a search for the biological origin of the differences observed in fat deposit, the hepatic mRNA amounts of genes involved in lipid metabolism were investigated. No difference was found between lines for mRNA levels of ATP citrate-lyase, acetyl-CoA carboxylase, fatty acid synthase, malic enzyme and CCAAT/enhancer binding protein $\alpha$, a transcription factor acting on several lipogenesis genes. The genes coding for stearoyl-CoA desaturase and apolipoprotein A1 displayed significantly lower mRNA levels in the R$^+$ cockerels compared to the R$^-$. All together these mRNA levels explained 40% of the overall variability of abdominal adipose tissue weight, suggesting an important role of both genes in the fatness variability.Expression hépatique de gènes de la lipogénèse chez des lignées divergentes de poules pondeuses sélectionnées sur la consommation alimentaire résiduelle. Deux lignées de poules pondeuses Rhode Island Red ont été sélectionnées de façon divergente sur la consommation alimentaire résiduelle (R$^-$/R$^+$) pendant 19 générations. En plus de la réponse directe à la sélection, des réponses corrélées ont été observées sur d'autres caractères comme l'adiposité de la carcasse et le taux de lipides de plusieurs tissus, les animaux de la lignée R$^+$ étant plus maigres que ceux de la lignée R$^-$. Afin d'identifier l'origine biologique des différences observées dans l'état d'engraissement, les niveaux d'ARNm de gènes impliqués dans le métabolisme des lipides ont été étudiés. Aucune différence d'accumulation n'a été trouvée entre lignées concernant les ARNm de l'ATP citrate-lyase, l'acétyl-CoA carboxylase, la synthase des acides gras, l'enzyme malique et le facteur de transcription CCAAT/enhancer binding protein $\alpha$ qui agit sur plusieurs gènes de la lipogénèse. Les niveaux d'ARNm des gènes codant la stéaroyl-CoA désaturase et l'apolipoprotéine A1 sont significativement plus faibles chez les animaux de la lignée R$^+$ que chez ceux de la lignée R$^-$. Ces deux taux d'ARNm expliquent ensemble 40 % de la variabilité du poids de tissu adipeux abdominal entre les deux lignées, suggérant un rôle important de ces deux gènes dans la variabilité de l'état d'engraissement