Influência de reguladores de crescimento sobre a embriogênese in vitro de nucelos de Citrus sinensis cv. Valência

This paper describes the attempts to determine the methodology for regeneration of plants from nucelli. Nucelli were extracted from 'Valência' fruits (C. sinensis Osb.) twelve weeks after pollination and cultivated in vitro on "MS" mineral salts supplemented with (mg/l): thiamine HCL, 0.2; pyridoxine HCL, 1.0; nicotinic acid, 1.0; mesoinositol, 100; malt extract, 500; sucrose, 50.000; agar, 8.000; pH, 5.7. The treatments were combinations of kinetin (0.0; 0.25; 0.50; 1.0 and 1.5 mg/l) and 2,4 - diclorofenoxyacetic acid (D) (0.0; 0.5; 1.0 and 2.0 mg/l) with ten replications in dark and ten in light (1.500 lux) at 27oC ± 2oC. It was possible to get twelve nucellar embryos from a single nucellus. Kinetin and 2,4-D inhibited the embryogenesis. Ocasionally the formation of globular callus with high embryogenic potential was observed mainly in 0,25 mg/l kinetin and 0,5 mg/l 2,4-D medium. Objetivou-se determinar a metodologia de regeneração de plantas in vitro a partir de núcleos. Foram extraídos núcleos de frutos da cv. Valência (Citrus sinensis Osb.) doze semanas após a polinização, e cultivados em meio constituído pelos macro e micronutrientes do meio "MS", adicionado de (em mg/l): tiamina HCL, 0,2; piridoxina HCL, 1,0; ácido nicotínico, 1,0; mesoinositol, 100; extrato de malte, 500; sacarose, 50.000; ágar, 8.000; e pH, 5,7. Os tratamentos consistiram das combinações em dialélico de cinetina (0,0; 0,25; 0,50; 1,0 e 1,5 mg/l) e 2,4-D (0,0; 0,5; 1,0 e 2,0 mg/l), sendo que dez repetições foram mantidas no escuro e outras dez sob luz (1.500 lux) durante 16 horas diárias a 27oC ± 2oC, em delineamento inteiramente casualizado. Foram obtidos até doze embrióides diretamente de um único núcleo, e a adição de cinetina e 2,4-D inibiu esta embriogênese, principalmente com adição de 0,25 mg/l de cinetina + 0.5 mg/l de 2,4-D em culturas mantidas no escuro.