The Haemophilus ducreyi cytolethal distending toxin induces DNA double-strand breaks and promotes ATM-dependent activation of RhoA

Artículo científico -- Universidad de Costa Rica. Instituto de Investigaciones en Salud, 2003. Este documento es privado debido a limitaciones de derechos de autor.Among bacterial protein toxins, the cytolethal distending toxins (CDTs) are unique in their ability to activate the DNA damage checkpoint responses, causing cell cycle arrest or apoptosis in intoxicated cells. We provide direct evidence that natural intoxication of cells with the Haemophilus ducreyi CDT (HdCDT) holotoxin induces DNA double-strand breaks similarly to ionizing radiation. Upon DNA damage, epithelial cells and fibroblasts promote the formation of actin stress fibres via activation of the small GTPase RhoA. This phenomenon is not toxin specific, but is part of the ATM-induced cellular responses to genotoxic stresses, including ionizing radiation. Activation of RhoA is associated with prolonged cell survival, as HdCDT-treated epithelial cells expressing a dominant-negative form of RhoA detach and consequently die faster than cells expressing a functional RhoA. Our data highlight several novel aspects of CDT biology: (i) we show that a member of the CDT family causes DNA double-strand breaks in naturally intoxicated cells, acting as a true genotoxic agent; and (ii) we disclose the existence of a novel signalling pathway for intracellularly triggered activation of the RhoA GTPase via the ATM kinase in response to DNA damage, possibly required to prolong cell survival.Universidad de Costa Rica. Instituto de Investigaciones en SaludUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto de Investigaciones en Salud (INISA

A DNA pooling based system to detect Escherichia coli virulence factors in fecal and wastewater samples

The availability of a useful tool for simple and timely detection of the most important virulent varieties of Escherichia coli is indispensable. To this end, bacterial DNA pools which had previously been categorized were obtained from isolated colonies as well as selected in terms of utilized phenotype; the pools were assessed by two PCR Multiplex for the detection of virulent E. coli eaeA, bfpA, stx1, stx2, ipaH, ST, LT, and aatA genes, with the 16S gene used as DNA control. The system was validated with 66 fecal samples and 44 wastewater samples. At least one positive isolate was detected by a virulent gene among the 20 that were screened. The analysis of fecal samples from children younger than 6 years of age detected frequencies of 25% LT positive strains, 8.3% eae, 8.3% bfpA, 16.7% ipaH, as well as 12.5 % aatA and ST. On the other hand, wastewater samples revealed frequencies of 25.7% eaeA positive, 30.3% stx1, 15.1% LT and 19.7% aatA. This study is an initial step toward carrying out epidemiological field research that will reveal the presence of these bacterial varieties.UCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto de Investigaciones en Salud (INISA)UCR::Vicerrectoría de Docencia::Salud::Facultad de Microbiologí

Proliferación celular y metabolismo lipídico de células tumorales tratadas con el aceite esencial de un quimiotipo de <i>Lippia alba</i> procedente de Costa Rica

Lippia alba (Miller) N.E. Brown (Verbenaceae) es un arbusto aromático de amplia difusión en el continente americano muy utilizado en la medicina tradicional. Se la conoce como salvia morada o salvia de jardín, entre otros nombres. Su aceite esencial presenta una gran variabilidad química lo cual está relacionado con el origen geográfico de la planta. En Costa Rica se han identificado dos quimiotipos, un tipo denominado "dulce" rico en limoneno y carvona y uno denominado "fuerte" que presenta mayoritariamente ocimenona, mircenona, 1,8-cineol y mirceno. Se ha descrito que los terpenos presentes en algunos aceites esenciales tienen actividad antiproliferativa y podrían representar un nuevo aporte para la quimioprevención y tratamiento del cáncer. El objetivo de este trabajo fue estudiar los efectos del quimiotipo "fuerte" sobre el crecimiento celular y el metabolismo lipídico en células tumorales.Facultad de Ciencias Médica

Prevalence of intestinal parasitosis in children of the community of Los Cuadros, Goicoechea, Costa Rica. 2002-2003

Artículo científico -- Universidad de Costa Rica. Instituto de Investigaciones en Salud, 2007Se analizó la presencia de parásitos intestinales en muestras de heces de 350 niños, de una población de 1.563 niños de hasta cinco años de edad, de la comunidad urbano marginal de Los Cuadros de Goicoechea, San José, Costa Rica, durante los años 2003 y 2004. El diseño del muestreo fue aleatorio simple, para un tamaño de muestra de 350 y nivel de confianza del 95%. Las muestras se recolectaron median-te visitas a los hogares. Se obtuvo una muestra de heces de cada niño; no se repitieron muestras. La detección de parásitos se realizó mediante un examen directo (salina, lugol), concentrado de Ritchie (formol-éter) y tinción modificada de Zielh Neelsen. Las muestras fueron analizadas por profesionales de laboratorio. Del total de muestras 210 fueron positivas por al menos un parásito, protozoarios y helmintos intestinales, lo que representó una prevalencia total del 60%. Los resultados mostraron la presencia de Giardia intestinalis en el 18,2%; Entamoeba histolytica/E dispar en el 15,7%; Ascaris lumbricoides en el 15,4% y Trichuris 0,8% y Entamoeba coli en el 9,7% de los casos. Los mismos claramente revelan la existencia de un problema en dicha comunidad y dejan al descubierto la necesidad de desarrollar estrategias de educación sanitaria, prevención y tratamiento, a fin de mejorar las condiciones de salud de estas personas y evitar la transmisión de agentes patógenosTo analyze the presence of intestinal parasites, there has been developed a study with a 95% of confidence level at the urban-marginal community of Los Cuadros, Goicoechea, San José, Costa Rica, during the years 2003 and 2004, using a sample random of 350 children up to 5 years of age, from whom faecal samples were collected by visits home by home. The stool samples were analyzed to detect intestinal parasites through a direct exam (saline and iodine solutions), sedimentation of formalin-ether (Ritchie) and Zielh Neelsen modified. From the 350 stool samples, 210 (60%) were positive showing at least one parasite, protozoa and helminths, which represented a 60% prevalence. The results showed the presence of Giardia intestinalis (18.2%); Entamoeba histolytica/E dispar (15.7%); Ascaris lumbricoides (15.4%); Entamoeba coli (9.7%) and Trichuris (0.8%). The present study clearly showes that intestinal parasites represent a serious problem in this community. Therefore, sanitary education, prevention and treatment strategies are necessary to improve people health condition in this communityUniversidad de Costa Rica, Instituto de Investigaciones en SaludUCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto de Investigaciones en Salud (INISA

Detección de anticuerpos contra los Virus Linfotrópicos de Células T Tipo I/II (HTLV I/II) como medida de seguridad sanguínea en donantes de sangre en Costa Rica, mayo del 2002 a diciembre del 2004

Artículo científico -- Universidad de Costa Rica. Instituto de Investigaciones en Salud, 2006Los Virus Linfotrópicos Humanos tipo I y II (HTLV I/II) fueron los primeros retrovirus descritos y aislados en 1980. Tienen distribución mundial y son endémicos en el sur de Japón, el Caribe, algunos países del Sur y Centro América, África occidental y algunas otras poblaciones. Aunque la mayoría de infectados permanecen asintomáticos por largos periodos, el HTLV I es el agente causal de la leucemia/linfoma de células T del adulto (LTA) y de la Paraparesia Espástica Tropical (PET) o Mielopatía asociada (MAH).El HTLV II se identificó inicialmente en un paciente con leucemia peluda de células T, pero se requieren más estudios para establecer la relación entre ambos. Dos de las principales vías de transmisión son la transfusión sanguínea o por compartir agujas de individuos infectados en drogadicción. Para controlar la transmisión de la infección en Costa Rica, se inició en el año 2002 un proyecto de la Sección de Laboratorios Clínicos de la CCSS, para la tamización de anticuerpos contra estos retrovirus a todos los donantes de sangre, fecha histórica para nuestro país por ser el primero en tener una cobertura del 100% de los donantes en América Latina. Se analizaron 106.958 donantes, 582 (0,54%) fueron reactivos iniciales por tamizaje por un primer ELISA, 272 (46,7%) de ellas dieron repetidamente reactivas por duplicado (RR) con el mismo ELISA; un 0.25% de la población inicial analizada. A todas ellas se les realizó un segundo ELISA con diferente fuente antigénica y a 232 un WB (40 sueros insuficientes).El 0.03%(27) confirmaron positivas y un 0.13 (136) fueron indeterminadas. De las 27 positivas, 13 en donde hubo suero disponible, se procesaron por el WB comercial HTLV Blot 2.4 (ABBOTT) y se obtuvieron:7 positivas para HTLV II, 5 para HTLV I y un indeterminado. Además, de 14 segundas muestras recibidas (positivas e indeterminadas) que se analizaron por PCR, 10 fueron negativas, 3 positivas por HTLV 1 y una fue positiva por HTLV 2. La mayor prevalencia se presentó en la región Huetar Atlántica con un 0,09% y la Brunca y Central Sur un 0,05%.. Las regiones Pacífico Central,Chorotega y el área Metropolitana un 0,02%.. No se detectó ningún caso en las regiones Huetar Norte y Central Norte. Con este estudio, se documentó una seropositividad general para el HTLV I / II de 0.22% y una prevalencia nacional de 0.033% en los donantes de sangre. Lo que indica la relevancia del tamizaje obligatorio como medida de seguridad sanguínea y de Salud Pública para impedir la transmisión de estos agentes a través de sangre o sus hemoderivados a pacientes y población general.During 1980, Human T lymphotropic virus (HTLV-I /II) were the first retrovirus identified and isolated.The geographic distribution of the virus is global, with endemic regions like south Japan, the Caribbean islands, western Africa, some South and Central America countries and other specific populations. Most infected patients remain without symptoms for long periods of time but association with human disease has been demonstrated. HTLV-II has been linked to adult T-cell leukemia/lymphoma (ATL/ATLL) and is also the causative agent of a neurological disorder termed HTLV-II associated Myelopathy/ttropical Spastic Parapesis.HTLV-II was first identified in a patient with hairy-cell leukemia, however better studies are needed to establish the relation between both. HTLV can be transmitted by blood transfusion and sharing of needles and syringes. During 2002, Costa Rica became the first Latin American country with 100% coverage of blood donors. In this year, the Sección de Laboratorios Clínicos de la CCSS began as a project the screening for antibodies against HTLV in order to avoid transmission through this route. Of 106958 blood donors, 582 (0,54%) were initially reactive by enzyme-immunolinked assay (EELISA), 272 (46,7%) were reactive in duplicated with the same ELISA and they were analyzed by a second ELISA and 232 were confirmed with an "in-house "Western Blot (WB).. Those represent the 0.25% of the initial population. Twenty seven samples (0.03%)confirmed positives and 136 (0.13%) were indeterminate. A commercial WB was performed with 13 of these positive samples, 7 were HTLV-II, 5 were HTLV-III and 1 was an indeterminate pattern. PCR samples were received for 14 patients (positives and indeterminates), 10 were negative, 3 were positive for HTLV-II and 1 was positive or HTLV-II. The higher prevalences were found in the Huetar Atlántica region with 0,09% and Brunca and Central Sur regions with 0,05%.The Pacífico Central,Chorotega and Metropolitan area showed a prevalence of 0,02%.. No positive serum samples were detected in Huetar Norte or Central Norte regions. This study demonstrates a general seropositivity of 0,22% and a national prevalence of 0,033% in blood donors. The present work highlight the relevance of the HTLV I/II mandatory screening as a measure for safe blood and public health.info:eu-repo/grantAgreement/Universidad de Costa Rica/Instituto de Investigaciones en Salud////UCR::Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto de Investigaciones en Salud (INISA

Calidad microbiológica y aislamiento de Shigella Flexneri en vegetales frescos del Área Metropolitana de Costa Rica, 2001-2002

El objetivo de este estudio fue evaluar la calidad microbiológica de vegetales (lechuga y tomate)que se producen y se comercializan en el Á rea Metropolitana de Costa Rica. Se determinóla presencia de los patógenos Shigella sp. y Salmonella ssp. así como de indicadores de vida útil(recuento aerobio mesófilo) y de contaminación general y fecal (coliformes totales y fecales). De107 muestras de vegetales analizadas, se obtuvo un aislamiento positivo por Shigella flexneri. Encuanto a indicadores, el recuento aerobio mesófilo demostró niveles mayores de 105 UFC/g en el72% de las muestras. En coliformes totales el 80 % de las muestras presentó niveles entre 10 y 105UFC/g, y en un 12% niveles mayores de 105 UFC/g. En cuanto a coliformes fecales, el 40% de lasmuestras fueron positivas con niveles entre 10 y 105 UFC/g.Aunque los datos obtenidos no muestran una relación estadísticamente significativa, sí permitenevidenciar una tendencia hacia mayor contaminación en época seca que en época lluviosa,con valores más elevados en todos los indicadores, lo que implica un riesgo potencial para la saluddel consumidor. Del mismo modo, Shigella sp. se ha asociado a brotes originados de alimentosfrescos alrededor del mundo. Su aislamiento en este estudio y la prevalencia del agente en el país,  nos permiten postular la hipótesis de que ésta podría ser una vía de transmisión relevante y de lanecesidad de realizar estudios que permitan determinar su frecuencia en productos frescos.UCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias de la Salud::Instituto de Investigaciones en Salud (INISA