Inducible mouse model of skeletal muscle specific deletion of the Vitamin D Receptor (VDR)

Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Sato, AY. Indiana University School of Medicine. Department of Anatomy & Cell Biology; United States.Fil: Cregor, M. Indiana University School of Medicine. Department of Anatomy & Cell Biology; United States.Fil: Akel, NS. Indiana University School of Medicine. Department of Anatomy & Cell Biology; United States.Fil: Bellido, T.. Indiana University School of Medicine. Department of Anatomy & Cell Biology; United States.Vitamin D3 has beneficial effects on skeletal muscle and can prevent falls leading to reduced bone fracture risk. Excess of glucocorticoids (GC), either endogenous as in aging or due to glucocorticoid administration as immunosuppressants, leads to muscle loss mass and increases the risk of bone fractures. Earlier findings showed that 1,25(OH)2 vitamin D3 (1,25D3) prevents GC-induced skeletal muscle atrophy in vivo, in muscle organ cultures ex vivo, and in C2C12 myoblasts/ myotubes in vitro. Based on these findings, we formulated the hypothesis that the beneficial actions of Vitamin D3 are mediated by direct hormonal effects on skeletal muscle cells. The purpose of this work was to generate mice lacking the receptor for Vitamin D (VDR) in skeletal muscle and test their response to Vitamin D3 signaling. Towards this end, we crossed transgenic mice expressing a tamoxifen-inducible Mer-Cre-Mer driven by Human skeletal muscle alfa actin promoter with mice whose Receptor for Vitamin D, VDR, was flanked with LoxP sites at the exon 3 locus of the gene. So, tamoxifen-induced specific activation of Cre, produces a new genomic structure of VDR. Males and females 3 months old mice VDRf/f;human skeletal muscle α-actin (HSA)-Cre+/- and their littermate control VDRf/f;HSA-Cre-/- mice (C) were injected with tamoxifen for 5 days (2mg/d 1x/d for 5d). In some experiments, vehicle was injected to check the effects of tamoxifen. Fifteen days after the last tamoxifen injection, at 4months old mice, animals were implanted with slow-release pellets of 2.1mg/kg/d prednisolone or placebo and were treated with 50ng/kg/d 1,25D3 or vehicle 5x/wk for 4wks. Mice were fed a regular Vitamin D3-containing diet and maintained in a 12h light/dark cycle. First, we confirmed tissue-specific VDR deletion. HSA-CRE was present in gDNA of CRE positive mice. Also, we confirmed the deletion of VDR only in induced by tamoxifen in CRE-positive mice. The excised form of the VDR is only detected in skeletal muscle (plantaris and tibialis anterior), but not in kidney, intestine, or bone, of Cre positive mice (VDR f/f;HSA-Cre +/-) treated with tamoxifen. VDR deletion induced by tamoxifen is only detected in CRE positive mice (VDR f/f;HSA-Cre +/-), but not in any tissues from control littermate mice (VDR fl/fl;HSA-Cre -/-). In conclusion this model achieves adult-onset deletion of the VDR in skeletal muscle (Cre and tamoxifen dependent) and thus it will allow its use to determine the direct effects of vitamin D3 signaling in this tissue.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Sato, AY. Indiana University School of Medicine. Department of Anatomy & Cell Biology; United States.Fil: Cregor, M. Indiana University School of Medicine. Department of Anatomy & Cell Biology; United States.Fil: Akel, NS. Indiana University School of Medicine. Department of Anatomy & Cell Biology; United States.Fil: Bellido, T.. Indiana University School of Medicine. Department of Anatomy & Cell Biology; United States.Bioquímica y Biología Molecular (ídem 1.6.3

Effect of sodium fluoride or sodium monofluorphosphate treatment in an alveolar bone healing experimental model

Fil: Romanazzi Chumbita, Lucas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Reati, Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Depending on the dose and the way of administration, fluoride (F-) produces different physico-chemicals and biological effects on bone tissue. The F- biodisponibility is higher when it is administrated as sodium monofluorphosphate (MFP) compared to sodium fluoride (NaF) at equivalent doses. OBJECTIVE: to compare the effect produced by F- administratio n in the form of NaF or MFP, post first molar extraction, on biochemicals markers of phosphocalcic metabolism and morphometric parameters of mandibular growth. METHODS: the first right lower molar of twelve 21-days-old male Wistar rats was extracted under anesthesia. Then, rats were divided into three experimental groups which received distilled water (control) or a solution containing 80 mmol of NaF or MFP per day during 21 days. The treatment was administrated by orogastric catheter. After treatment, animals were euthanized by cervical dislocation and mandibles were collected. Plasma Ca and P levels and alkaline phosphatase (ALP) activity were determined. Morphometric parameters of mandible growth were measured on digital radiographic images using the software Romexis. Data were analyzed by ANOVA and Bonferroni?s post hoc test. RESULTS: Phosphatemia increased in animals under F- treatment respect control animals (p<0,05); an increase in ALP activity was observed o nly in NaF group compared to control (p<0,05). The F- treatment, d! id not affect mandible growth parameters. CONCLUSIONS: the administration of F-, as NaF or MFP, by orogastric catheter after first molar extraction, affected some plasma markers related with phosphocalcic metabolism, effect more pronounced in NaF group.Fil: Romanazzi Chumbita, Lucas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Reati, Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Otras Ciencias de la Salu

Chronic exposure to sodium monofluorphosphate post-dental extraction decreases alveolar bone repair

Fil: Romanazzi Chumbita, Lucas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Reati, Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.The most used drugs as sources of fluoride (F-) in human therapeutics are sodium fluoride (NaF) and sodic monofluorphosphate (Na2FPO ? MFP). Fluoride bioavailability is greater when MFP is administrated, which allows to use lower doses to decrease adverse effects. According to the dose and the administration form, this ion produces different biologic and physical-chemical effects on bone tissue. OBJECTIVE: To study the effect triggered by chronic exposure to MFP during the active phase of bone resorption post-dental extraction, on the structural properties of alveolar bone and metabolic parameters associated. METHODS: Male Wistar rats (n=4-6 per group) to which it was extracted the first molar from one of the hemimandible, were divided into two experimental groups who drank water with different F- concentrations during 4 weeks: Controls (0,016 mM of F-) and Treated with MFP (0,4 mM of F-). Biochemical parameters of phosphocalcic metabolism were analyzed in plasma samples. Urinary F- was determined using an ion selective electrode. Complete jaws were extracted, histologically processed and stained with H&E. On digital microphotographs of serial buccolingual sections, at the level of first molar, the percentage of bone formed [BV/TV (%)], in the alveolar cavity during post-extraction period was measured using Image Pro Plus software. Results were analyzed by Student ?t? test and were expressed as media ± SE. RESULTS: No significant differences were observed in water intake nor body weight gain due to treatment. Urinary F- was higher in rats chronically exposed to MFP (p<0,05). Calcemia and phosphatemia were increased in treated animals (p<0,05) and total alkaline phosphatase (FAL) did not showed significant differences between groups. BV/TV (%) in alveolar cavity was lower in treated animals compared to controls (p<0,05). CONCLUSION: Fluoride incorporation in the form of MFP during the immediate post-dental extraction period produced an alteration in phosphocalcic metabolism and a decrease of alveolar bone volume, suggesting a negative effect on the dental bone repair process.Fil: Romanazzi Chumbita, Lucas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Reati, Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Otras Ciencias de la Salu

Effect of sodium fluoride administration on alveolar bone healing after first molar extraction

Fil: Reati, Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Romanazzi Chumbita, Lucas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Departamento de Biología Bucal; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fluoride (Fˉ) is used in the prevention of dental caries because of its remineralizing and antibacterial action. In human therapy, Fˉ is more frequently administered as sodium fluoride (NaF) or sodium monofluorphosphate (MFP). In a previous work, we showed that treatment with MFP decreased bone volume in the alveolar bone post first molar extractionFil: Reati, Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Romanazzi Chumbita, Lucas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Departamento de Biología Bucal; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Otras Ciencias de la Salu

Fluoride increases mandibular bone volume and the number of osteoblasts during pre-eruptive stage

Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Delgado, María Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Ponce, Rubén Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Gallará, Raquel Vivian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Low fluoride (F-) doses stimulate osteoblasts differentiation and promote organic matrix synthesis. There is not much information about the effects of fluoride exposure during fetal and early post-natal period on the properties of the mandibular bone. OBJECTIVE: To study the effect triggered by fluoride exposition during gestation and lactation period, on the early bone modeling of offspring jaws. METHODS: Rat offspring of 10- and 15-days-old from two groups of mothers which drank water with different F- concentrations in form of sodium fluoride (NaF) were used: Controls (0,3 mg F-/L) and Treated (22,6 mg F-/L). Treatment was performed thirty days previous mating, during gestation and lactation. Animals were euthanized by cervical dislocation. Plasmatic calcium (Ca) and alkaline phosphatase (FAL) concentration were determined by the use of commercial kits. Complete jaws were extracted, histologically processed and stained with H&E. On digital microphotographs of serial buccolingual sections, at the level of first molar, different histomorphometric parameters in the basal zone were analyzed: Trabecular bone volume [BV/TV (%)], osteoblasts number per trabecular perimeter (N.Ob/mm) and osteocytes number per trabecular area (N.Ot/mm2). Results were analyzed with Student ?t? test, considering significant differences at p<0,05. RESULTS: Total plasmatic levels of Ca and FAL increased in 10-days-old pups from mothers treated with F- (p<0,05), at 15-days-old FAL activity stayed increased in the treated group (p<0,05). Histomorphometric analysis in the mandibular basal zone showed an increase in BV/TV (%) of pups exposed to F- at 10- and 15-days-old pups (p<0,01); this increase was associated to a higher N.Ob/mm (p<0,01). F- exposure produced an increase in the N.Ot/mm2 only at 15-days-old (p<0,05). CONCLUSION: The results suggest that this way of F- administration to the organism during the early period of bone formation, stimulates the process of mandibular bone formation mediated by the increase in the number of osteoblasts and osteocytes.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Delgado, María Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Ponce, Rubén Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Gallará, Raquel Vivian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Otras Ciencias de la Salu

La ingesta de agua de bebida con concentraciones micromolares de fluoruro aumenta la expresión de conexina 43 en odontoblastos e induce su diferenciación

Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Gallará, Raquel Vivian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Ponce, Rubén Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Rigalli, Alfredo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Biología Ósea; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.La ingesta excesiva de fluoruro (F-) durante la etapa de mineralización dental provoca alteraciones en la estructura y funcionalidad de los diferentes tejidos del diente. Las moléculas de comunicación intercelular, como conexina 43 (Cx43), son importantes durante la dentinogénesis ya que controlan el crecimiento y la diferenciación celular. En trabajos previos demostramos que la ingesta de agua con una concentración de 10mg/L de NaF induce la diferenciación de los odontoblastos e incrementa la expresión de Cx43. OBJETIVO: estudiar el efecto de la exposición crónica a una dosis micromolar de F- sobre la expresión proteica de Cx43 e indicadores morfológicos y moleculares de la diferenciación de odontoblastos y la mineralización dentinaria. MÉTODOS: ratas Wistar macho (n=6 por grupo) bebieron agua con diferentes concentraciones de F- en forma de NaF durante 8 semanas: a) 0,3mg/L (control) y b) 5mg/L (tratado). Los animales se sacrificaron por dislocación cervical, se extrajeron sus mandíbulas para procesamiento histológico y el incisivo superior para la obtención del tejido pulpar. La expresión proteica de Cx43 fue analizada por inmunohistoquímica. Sobre microfotografías digitales se analizó la histología de la dentina y se determinó la relación núcleo/citoplasma de odontoblastos. La expresión génica de Hsp25 (marcador específico de odontoblastos diferenciados), de osteocalcina (OST) y sialofosfoproteína dentinaria (DSPP) (marcadores de matriz dentinaria) se determinó por RT-PCR. Los resultados se analizaron mediante el test ?t? de Student. RESULTADOS: La expresión génica (p<0.05) y proteica de Cx43 incrementó por la exposición a F- respecto de los controles. El tratamiento crónico con 5mg/L de NaF indujo la diferenciación de los odontoblastos, efecto evidenciado por la disminución en la relación núcleo/citoplasma (p<0.01) y el aumento en la expresión del Hsp25 (p<0.01) y DSSP (p<0.05). Además, la dosis de F- utilizada produjo alteraciones en la histología del tejido dentinario. CONCLUSIÓN: Los resultados sugieren que la exposición crónica a F- induce la diferenciación de los odontoblastos aún a bajas dosis, mecanismo posiblemente mediado por Cx43 permitiendo que las células sean más capaces de expresar genes y/o proteínas esenciales para la mineralización.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Gallará, Raquel Vivian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Ponce, Rubén Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Rigalli, Alfredo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Biología Ósea; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Otras Ciencias de la Salu

Effect of pre- and post-natal exposure to fluoride on fluorosis indicators in offspring of rats

Controversy exists over the maternal–fetal passage of fluoride (F-). This work sought to explore different aspects of F-metabolism during pregnancy and lactation in mothers and offspring. The specific aim was to study F-accumulation in bones and teeth and growth morphometric parameters in the offspring of mothers exposed to high levels of F- in drinking water. Pups aged 10-, 15- and 21-day-old from 2 groups of mothers were used: a) control mothers (0.3 mg/L F-); b) treated mothers (50 mg/L F-). The treatment was performed during the period of pregnancy and lactation. All animals were euthanized and the upper and lower jaw and tibia of mothers were removed for the determination of F-. Incisor diameter, mandibular growth and tibia length were determined on RX digitalized images. Results were analyzed by Student t test. Accumulated F-content was significantly higher in the jaws (p b 0.05), incisor (p b 0.01) and tibia (p b 0.05) of mothers exposed to F- compared to control. In 10- and 15-day-old pups born to treated mothers, F-content in jaws did not differ from the control. However, in 21-day-old pups, accumulated F- was higher (p b 0.05). No differences were found in Fcontent or growth parameters in tibia of the offspring in all studied groups. Lower incisor diameter was lower in 21-day-old pups born to mothers exposed 50 mg/L F-compared to their controls (p b 0.01). The results suggest that F-accumulation in calcified tissues of the offspring is lower than in maternal tissues. The passage of F- mother-offspring could occur through milk during lactation. Further studies would help to elucidate the mechanism of this process.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Ponce, Rubén Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Tirao, Germán Alfredo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Matemática, Astronomía, Física y Computación; Argentina.Fil: Rigalli, Alfredo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Biología Ósea; Argentina.Fil: Gallará, Raquel Vivian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Bioquímica y Biología Molecular (ídem 1.6.3

Effect of pre- and post-natal exposure to fluoride on fluorosis indicators in offspring of rats

Controversy exists over the maternal-fetal passage of fluoride (F-). This work sought to explore different aspects of F- metabolism during pregnancy and lactation in mothers and offspring. The specific aim was to study F- accumulation in bones and teeth and growth morphometric parameters in the offspring of mothers exposed to high levels of F- in drinking water. Pups aged 10-, 15- and 21-day-old from 2 groups of mothers were used: a) controls mothers (0.3 mg/L F-); b) treated mothers (50mg/L F-). The treatment was performed during the period of pregnancy and lactation. All animals were euthanized and the upper and lower jaw and tibia of mothers were removed for the determination of F-. Incisors diameter, mandibular growth and tibia length were determined on RX digitalized images. Results were analyzed by Student t test. Accumulated F- content was significantly higher in the jaws (p &lt;0.05), incisor (p&lt;0.01) and tibia (p &lt;0.05) of mothers exposed to F- compared to control. In 10- and 15-day-old pups born to treated mothers, F- content in jaws did not differ from the control. However, in 21-day-old pups, accumulated F- was higher (p &lt;0.05). No differences were found in F- content or growth parameters in tibia of the offspring in all studied groups. Lower incisor diameter was lower in 21-day-old pups born to mothers exposed 50 mg/L F- compared to their controls (p&lt;0.01). The results suggest that F- accumulation in calcified tissues of the offspring is lower than in maternal tissues. The passage of F- mother-offspring could occur through milk during lactation. Further studies would help to elucidate the mechanism of this process.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; ArgentinaFil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Metodología de la Investigación en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Ponce, Rubén Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; ArgentinaFil: Tirao, Germán Alfredo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Matemática, Astronomía, Física y Computación; ArgentinaFil: Rigalli, Alfredo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Biología Ósea; ArgentinaFil: Gallará, Raquel Vivian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; ArgentinaFil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; ArgentinaPatologí

Morphological and functional changes in rats incisor triggered by chronic exposure to fluoride

It is well known that excessive intake of fluoride (F-) during dentinogenesis causes dental fluorosis. However the molecular mechanism underlying fluorosis remains unclear. Connexins (Cxs) are important to control growth and cell differentiation of dental tissues.The aim of the present study was to assess the impact of chronic exposure of F- on Cxs expression in dental pulp, and on morphometric parameters of adult rat mandible and incisors. Three groups of male Wistar rats (22 days-old) were given water containing: a) 0.3 mg/L (Control), b) 10 mg/L and c) 50 mg/L of NaF for eight weeks. Incisor pulp homogenates were prepared for determination of Cx32, Cx43 and Cx45 gene expression,using semi-quantitative RT-PCR, and of ALP activity. Morphometric parameters of mandible and incisors were determined on radiographs. Histomorphometric parameters were evaluated with Image Pro Plus 6.1 software. Results were analyzed by ANOVA and Bonferroni´s test. Expression of Cx43 increased with exposure to F- in a dose-dependent manner. Cx32 mRNA levels were higher than controls in the 10 mg/L NaF group only; Cx45 mRNA levels were lower in groups given 10 and 50 mg/L of NaF than in controls. ALP activity was higher in both high-NaF dose groups compared to the control group (p&lt;0.05). Lower incisor diameter was lower in the 50 mg/L NaF than in the control group (p&lt;0.01). None of the mandibular growth or histomorphometric parameters were affected by NaF treatment. In conclusion, fluorotic alterations in rat incisor were associated with differential expression of Cxs and ALP activity in pulp tissue. The observed changes may have a stimulating effect on dentin mineralization.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Metodología de la Investigación en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; ArgentinaFil: Ponce, Rubén Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; ArgentinaFil: Tirao, Germán Alfredo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Matemática, Astronomía, Física y Computación; ArgentinaFil: Rigalli, Alfredo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Biología Ósea; ArgentinaFil: Gallará, Raquel Vivian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; ArgentinaFil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentin

La ingesta de NaF durante la lactancia afecta el crecimiento mandibular de las crías

Existe poca información sobre el desarrollo de fluorosis durante el periodo fetal y el periodo postnatal inicial. OBJETIVO: estudiar la relación entre el contenido gástrico de F- y parámetros morfométricos de crecimiento y desarrollo alterado de crías expuestas al NaF durante la gestación y lactancia. MÉTODOS: se emplearon crías de 10, 15 y 21 días de vida posnatal, provenientes de 2 grupos de madres: a) controles (0,3mg/L NaF); b) tratadas (50mg/L NaF). El tratamiento se realizó durante el periodo de gestación y lactancia. Todos los animales fueron sacrificados por dislocación cervical. Se determinó la concentración de F- de muestras de contenido gástrico y orina de las crías mediante el empleo de un electrodo de ión selectivo. En imágenes digitalizadas de RX se analizaron los siguientes parámetros empleando el programa Image Pro Plus 6.1: área, base, altura y longitud mandibular y longitud y distancia mínima de tibia. Los resultados se expresaron como la media ± ES y fueron analizados mediante ANOVA y test de Bonferroni. RESULTADOS: el contenido gástrico de F- de crías lactantes de 15 y 21 días provenientes de madres expuestas al NaF en el agua de bebida fue mayor respecto al observado en las crías del grupo control (n=6 por grupo; p<0,05). Los niveles de F- urinarios de crías de 10 y 15 días de ambos grupos experimentales no fueron dosables; sin embargo, la concentración de F- urinario de crías de 21 días fue mayor respecto de sus controles (n=6 por grupo; p<0,05). El área mandibular de las crías de 21 días de madres expuestas crónicamente al NaF fue significativamente mayor que el de las crías de la misma edad del grupo control (p<0,05). No se observaron diferencias en los parámetros de crecimiento óseo en las tibias de las crías de ninguno de los grupos y edades estudiados. CONCLUSIÓN: los resultados obtenidos muestran la relación entre los niveles de F- en el contenido gástrico y en orina de las crías de madres expuestas a 50 mg/L de NaF en el agua de bebida y las alteraciones en parámetros morfométricos de crecimiento mandibular. Esto sugiere que el pasaje materno del F- , a la dosis estudiada, ocurre fundamentalmente durante el periodo de lactancia.Fil: Interlandi, Victoria. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Introducción a la Química y Física Biológicas A; Argentina.Fil: Ponce, Rubén Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Bojanich, María Alejandra. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Tirao, Germán Alfredo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Matemática, Astronomía, Física y Computación; Argentina.Fil: Gallará, Raquel Vivian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.Bioquímica y Biología Molecular (ídem 1.6.3