El antígeno NcSRS2 de <i>Neospora caninum</i>: su aplicación en el diagnóstico y estrategias de prevención

Neospora caninum es un parásito protozoo responsable de abortos y pérdidas económicas en bovinos. La realización de un diagnóstico serológico preciso y con resultados comparables obtenidos por diferentes pruebas contribuye al manejo de este problema y a encarar medidas de control. Los objetivos de este trabajo fueron evaluar una prueba de ELISA con el antígeno nativo NcSRS2 (p38) de N. caninum para el diagnóstico de la neosporosis bovina en Argentina. Asimismo, se analizó el desempeño de la prueba de ELISA-p38 para identificar y diferenciar ratones inmunizados con una vacuna oleosa de N. caninum elaborada con lisado completo de proteínas solubles y otra sin p38. Se evaluó la protección conferida por esas vacunas frente al desafío con una cepa de alta virulencia en el modelo murino. Se purificó la proteína p38 utilizada para el ELISA mediante cromatografía de afinidad, a partir de columnas de sefarosa con el anticuerpo monoclonal 4.15.15 (IgG2a). La prueba se evaluó localmente con sueros de bovinos naturalmente expuestos de Argentina (n= 336) y de bovinos experimentalmente infectados (n= 36). Los sueros que resultaron positivos o negativos a las pruebas de Inmunofluorescencia inidirecta (IFI) e Immunoblot (IB) fueron considerados como Estándares Relativos de Comparación (ERC) para evaluar la prueba de ELISA-p38. Se determinó la concordancia, sensibilidad (Se) y especificidad (Sp) relativa por medio del análisis de caracterísitica operativa del receptor (ROC) de la prueba de ELISA-p38 respecto al ERC. El ERC se conformó por 94 sueros positivos y 231 sueros negativos a las pruebas de IFI e IB (n= 325). El análisis ROC determinó que la prueba de ELISA-p38 fue altamente precisa (área bajo la curva, AUC= 0,982) usando el punto de corte 0,0905 (índice). La Se y Sp relativa del ELISA-p38 fue 97,8% y 99,5%, respectivamente, con una concordancia casi perfecta (k= 0,97) respecto al ERC. La prueba de ELISA-p38 evaluada localmente ha demostrado un buen desempeño y una adecuada performance para el diagnóstico de la neosporosis bovina en Argentina. Se vacunaron ratones BALB/c con un lisado completo de proteínas solubles de N. caninum (VC), y con un lisado de proteínas solubles sin p38 (VS/p38), y se incluyeron grupos controles PBS (C) y adyuvante (CA). En los grupos VC, VS/p38 y CA se utilizó el adyuvante Montanide™ ISA 206 (Seppic, Francia). Los sueros del grupo VC se consideraron como equivalentes a los que se producirían en una infección natural con las proteínas completas del protozoo cuando se realizaron las evaluaciones serológicas previas al desafío. Al día 35 todos los ratones se desafiaron por vía SC con 2 x 106 taquizoítos vivos/ratón del aislamiento NC-Spain 7 de N. caninum. Se realizó la extracción de sangre en los días 13 y 34, para analizar la producción de anticuerpos mediante IFI y ELISA-p38. En el día 34, se sacrificaron 3 ratones de cada grupo con el fin de medir los parámetros inmunes específicos previo al desafío. Los ratones restantes de cada grupo se sacrificaron al final del ensayo (día 65). Se evaluó la respuesta inmune celular y la protección conferida por las vacunas por medio del cultivo de células esplénicas; obtención de sangre para serología y cerebro, pulmón, corazón, hígado y riñón para histopatología e inmunohistoquímica. La respuesta inmune celular fue evaluada por la medición de la producción in vitro de las citoquina IL-4 utilizando un kit comercial de ELISA. Se evaluó el grado de severidad de las lesiones microscópicas en los cerebros y otros órganos según un puntaje asignado. Mediante la prueba IFI se detectaron anticuerpos en los grupos inmunizados (VC y VS/p38) previo al desafío, mientras que con la prueba de ELISA-p38, se detectaron anticuerpos solo en el grupo inmunizado con el lisado completo de proteínas solubles (VC). En los sueros de los ratones inmunizados con lisado completo de proteínas solubles se detectaron anticuerpos, mientras que en el suero de los ratones inmunizados con proteínas solubles sin proteína p38, no se detectaron anticuerpos, resultando serológicamente negativos a la prueba de ELISA-p38. Se estableció un punto de corte de 0,0932 (índice) para una Se y Sp relativa de 100%, con un valor perfecto de AUC para la prueba de ELISA-p38. La prueba de ELISA-p38 en el modelo murino permitió identificar y diferenciar a los ratones inmunizados con y sin la proteína p38 de N. caninum. Al comparar la concentración de IL-4 en los sobrenadantes de los grupos inmunizados con lisado completo de proteínas solubles y sin p38 previo al desafío, se detectaron niveles superiores de IL-4 para el primer grupo con respecto al segundo. Los ratones inmunizados con la vacuna oleosa de N. caninum sin p38 tuvieron mayor severidad de lesiones en cerebro y pulmón, por lo que se considera que el preparado vacunal sin p38 no otorgó suficiente protección frente al desafío con una cepa de alta virulencia. Por lo tanto, la presencia de esta proteina sería necesaria para generar una respuesta inmune protectora. Sería importante investigar otras proteínas que no estén directamente relacionadas con la protección y analizar su potencial uso como indicadores para la diferenciación de animales vacunados de infectados.La tesis contó con la dirección conjunta de las Dras. Maria Cecilia Venturini y Diana Raquel Bacigalupe.Facultad de Ciencias Veterinaria

Neosporosis bovina en Argentina: a 25 años del primer reporte en el país

La neosporosis es una enfermedad de gran impacto en el ganado vacuno debido a que causa abortos en el segundo y último trimestre de la gestación. En esta revisión se resume y discute la información sobre la misma, recopilada de dos décadas y media de estudios en bovinos de Argentina. Se aportan datos sobre el diagnóstico, la prevalencia y los avances en el estudio de la enfermedad. Está dirigida a los médicos veterinarios dedicados al diagnóstico y a la investigación de la neosporosis y/o a la producción bovina.Neosporosis is a disease with great impact in cattle, responsible for abortions in the second and last trimester of gestation. The present revision summarizes and discusses information from two and a half decades of studies about the disease in cattle from Argentina, contributing data about prevalence, diagnosis and progress in the knowledge of the disease. this report will be of interest for veterinarians specialized in diagnosis and investigation of neosporosis and/or bovine production.EEA RafaelaFil: Campero, Lucía María. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Inmunoparasitología; ArgentinaFil: Campero, Lucía María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Moore, Prando Dadin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Moore, Prando Dadin. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Echaide, Ignacio Eduardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Campero, Carlos Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Venturini, María C. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentin

Bovine neosporosis in Argentina: 25 years from the first report in the country

La neosporosis es una enfermedad de gran impacto en el ganado vacuno debido a que causa abortos en el segundo y último trimestre de la gestación. En esta revisión se resume y discute la información sobre la misma, recopilada de dos décadas y media de estudios en bovinos de Argentina. Se aportan datos sobre el diagnóstico, la prevalencia y los avances en el estudio de la enfermedad. Está dirigida a los médicos veterinarios dedicados al diagnóstico y a la investigación de la neosporosis y/o a la producción bovina.Neosporosis is a disease with great impact in cattle, responsible for abortions in the second and last trimester of gestation. The present revision summarizes and discusses information from two and a half decades of studies about the disease in cattle from Argentina, contributing data about prevalence, diagnosis and progress in the knowledge of the disease. this report will be of interest for veterinarians specialized in diagnosis and investigation of neosporosis and/or bovine production.Facultad de Ciencias Veterinaria

Neospora caninum

Neospora caninum es un protozoo parásito que causa la neosporosis, una enfermedad global, cuyo efecto negativo sobre la eficiencia reproductiva se manifiesta por las grandes pérdidas económicas que causa en la ganadería bovina. En el bovino provoca abortos y frecuentemente produce el nacimiento de animales congénitamente infectados. En el perro genera diversos cuadros neuromusculares.Facultad de Ciencias Veterinaria

Isolation of Sarcocystis neurona from an opossum (Didelphis albiventris) in Argentina

Sarcocystis neurona is an Apicomplexan parasite which affects awide range of animal hosts. This protozoan is the main cause ofequine protozoal myeloecephalitis (EPM) inWestern Hemispherehorses. The parasite reproduces sexually in the intestine ofdefinitive hosts (DH) and asexually in tissues of intermediate andaberrant hosts. The geographical distribution of S. neurona isrelated with the distribution its definitive hosts, the opossumsDidelphis virginiana and D. albiventris. A recent serological studyconducted in Argentinean horses using S. neurona antigenrevealed an overall seroprevalence of 26.1%. However, the parasitehas not been isolated in Argentina. Tissues from an opossum (D.albiventris) hunted by dogs in a farm from the central region ofBuenos Aires province were collected. Horses raised in the farmshowed a 50% (10/20) S. neurona seroprevalence. One seropositivehorse developed neurological signs and evidenced clinicalimprovement after a 2 month treatment with Ponazuril. A completenecropsy of the opossum was conducted and the intestinalmucosal scraping was subjected to a parasitological study withsucrose solution. A high amount of Sarcocystis spp. oocysts/sporocystswere observed (Fig. 1). DNA was extracted from concentratedoocysts with a commercial kit (ZR Fecal DNA, ZymoResearch). The sample was identified as S. neurona by specificPCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) and bysequencing of a fragment of the 18S rRNA gene. Approximately 5 x105 oocysts were subjected to a pepsin-HCl digestion followed bya physical disruption. Released sporozoites were used to infectfresh BM cell cultures, maintained by 3 passages during 2 monthsand further preserved in liquid nitrogen. This study represents thefirst isolation of S. neurona in Argentina. Further studies will beconducted in order to identify antigen expression as well as tocompare genetic characteristics between the isolated strain andreference strains.Fil: Moré, Gastón Andrés. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Rambead, M.. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; ArgentinaFil: Braun, F.. No especifíca;Fil: Campero, Lucía María. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Walkosksi, A.. No especifíca;Fil: Venturini, M. C.. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina10th International Equine Infectious Diseases ConferenceCiudad Autónoma de Buenos AiresArgentinathe Equine Infectious Disease Conferenc

Evaluation of biological behavior of Toxoplasma gondii atypical isolates # 14 and # 163

Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan parasite capable of infecting warm-blooded animals, including humans. A highly diverse genetic population has been reported in Central and South America, predominating mainly atypical genotypes. Different genotypes showed different biological behavior in mice. The aim of this study was to evaluate the biological behavior of T. gondii isolates obtained from Macropus rufogriseus (TgMr) and Saimiri boliviensis (TgSb) identified as atypical genotypes # 14 and # 163, respectively. Strains RH, ME49 and VEG were used as reference for clonal types I, II and III, respectively. In vitro invasion and replication capacity assays were analyzed at 6 and 18 hpi, respectively. In vivo assay was performed in Swiss mice (n = 30) using 1 × 102 and 1 × 103 parasites/mouse as infective doses (ME49, VEG, TgMr, TgSb and negative control). Morbi-mortality and tissues PCR were assessed. Lymphoproliferation assays were performed and gamma interferon was measured by ELISA. The ME49 strain showed the highest invasion, followed by TgSb and VEG, while RH and TgMr presented the lowest invasions. The RH strain and the TgSb isolate showed more endodyogeny events (fastest doubling times) than VEG and ME49 strains and the TgMr isolate. Both atypical isolates showed high virulence (100% morbi-mortality, at 8–10 dpi) and parasite DNA was detected in all tissue samples. Splenocytes from mice inoculated with TgMr and TgSb registered the highest values of gamma interferon. An in vitro invasion-replication index was established which correlates inversely with virulence in mice. In conclusion, T. gondii atypical isolates # 14 and # 163 showed a different in vitro behavior than clonal strains, with low invasion-replication indexes but being highly virulent in mouse model.Fil: Bernstein, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; ArgentinaFil: Pardini, Lais Luján. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Campero, Lucía María. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Helman, María Elisa. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Unzaga, Juan Manuel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; ArgentinaFil: Venturini, María Cecilia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; ArgentinaFil: Moré, Gastón Andrés. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentin

Evaluación y comparación de pruebas serológicas para la detección de la neosporosis bovina en Argentina

Neospora caninum is a protozoan parasite that causes abortion and important economic losses in cattle worldwide. The accurate diagnosis of neosporosis is essential for management and control measures. The aims of this study were: i) to evaluate the performance of an in-house enzyme-linked immunosorbent assay based on the 38 kDa native antigen (p38-ELISA) to diagnose bovine neosporosis in Argentina using a well- characterized local sera panel from experimentally infected and naturally exposed cattle and ii) to compare the diagnostic performance and agreement of three N. caninum serological tests: p38-ELISA, indirect fluorescence antibody test (IFAT) and immunoblotting (IB) using the same sera panel. Serum samples testing either positive or negative by IFAT and IB were considered “Relative Standards of Comparison” (RSC) and used for p38-ELISA evaluation. Receiver operating characteristics analysis revealed that p38-ELISA was highly accurate (area under the curve= 0.982) according to RSC with a cut-off index of 0.0905. Relative sensitivity and specificity of p38-ELISA were 97.8 % and 99.5 %, respectively and agreement between RSC and p38-ELISA was almost perfect (k= 0.97). The evaluation and performance comparison of serological tests were performed according to the definition of gold standard based on the decision of the “majority of tests”. All tests displayed high sensitivity and specificity values (greater than 95 %); and excellent agreement. This study describes the accurate performance of p38-ELISA evaluated locally and the highly accurate diagnostic performance of the studied tests for the detection of anti-N.caninum antibodies in cattle from Argentina.Neospora caninum es un parásito protozoo responsable de abortos y pérdidas económicas en bovinos. La realización de un diagnóstico serológico preciso y con resultados comparables obtenidos por diferentes pruebas contribuye al manejo de este problema y a encarar medidas de control. Los objetivos del presente trabajo fueron los siguientes: 1) evaluar en Argentina una prueba de enzimoinmunoensayo in-house con el antígeno nativo de 38 kDa de N. caninum (ELISA-p38) para el diagnóstico de la neosporosis bovina, utilizando un panel de sueros locales bien caracterizados, procedentes de bovinos infectados de modo experimental o naturalmente expuestos; 2) comparar el desempeno˜ y establecer el nivel de concordancia de tres pruebas serológicas para la detección de N. caninum, ELISA-p38, inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoblot (IB), con el mismo panel de sueros. Los sueros que resultaron positivos o negativos a IFI e IB fueron considerados como estándares relativos de comparación (ERC) para evaluar la prueba de ELISA-p38. El análisis de característica operativa del receptor determinó que la prueba de ELISA-p38 fue altamente precisa (área bajo la curva= 0,982) usando el punto de corte 0,0905. La sensibilidad y especificidad relativa del ELISA-p38 fue 97,8 % y 99,5 %, respectivamente, con una concordancia casi perfecta (k= 0,97) respecto del ERC. La comparación del desempeno˜ de las pruebas se realizó usando como gold standard el criterio de la decisión de la ‘‘mayoría de las pruebas’’. Las pruebas exhibieron altos valores de sensibilidad y especificidad (mayores del 95 %) y excelente concordancia. Este trabajo describe un buen desempeno˜ de la prueba de ELISA-p38 evaluada localmente y adecuada performance diagnóstica de las pruebas serológicas analizadas para la detección de anticuerpos anti N. caninum en bovinos de Argentina.Facultad de Ciencias Veterinaria

Humoral and cellular immune response and transplacental transmission in cows experimentally infected with Neospora caninum NC-6 Argentina strain

La infección por Neospora caninum es una importante causa de aborto en los bovinos. El objetivo de este estudio fue evaluar la respuesta inmune humoral y celular en bovinos y la posibilidad de transmisión transplacentaria durante una infección experimental con la cepa de N. caninum NC-6 Argentina. Se inocularon vacas preñadas de 65 días de gestación seropositivas (SP) y seronegativas (SN) a N. caninum por vía intravenosa con 108 taquizoítos de la cepa NC-6 o con PBS como control negativo.Facultad de Ciencias VeterinariasInstituto Nacional de Tecnología Agropecuari

Atypical isolates of Toxoplasma gondii from chickens from Misiones province Argentina

Toxoplasma gondii es un protozoo apicomplexa que puede infectar humanos y una amplia variedad de animales. La toxoplasmosis puede ocasionar signología clínica y lesiones variables acordes a la susceptibilidad de los hospedadores y comportamiento biológico del parásito. En habitantes del sudeste de la provincia de Misiones se ha registrado una elevada proporción de de retinocoroiditis toxoplásmica y la frecuencia de reactivaciones estaría, asociada a las épocas de lluvias intensas. En Sudamérica, especialmente en Brasil, se ha detectado la presencia de aislamientos de T. gondii genotípicamente no canónicos con elevada virulencia. Es importante conocer la variedad de genotipos que circulan en Argentina dado que podrían estar relacionados con casos clínicos en humanos y en animales. Se ha demostrado que las gallinas de traspatio son un excelente indicador epidemiológico de la contaminación del suelo con formas infectantes de T. gondii. El objetivo del presente estudio fue detectar, aislar y genotipificar T. gondii a partir de tejidos de gallinas provenientes de las granjas de los pacientes con retinocoroiditis toxoplásmica.Facultad de Ciencias Veterinaria

Infecções por Toxoplasma gondii e Neospora caninum em roedores sinantrópicos da Argentina

Toxoplasma gondii and Neospora caninum are closely related coccidian parasites (phylum Apicomplexa). This is the firststudy from urban synanthropic rodent species that involved serological and molecular diagnosis of T. gondii and N. caninuminfection, and genotyping of T. gondii in Argentina. A total of 127 rodent samples were trap captured: Mus musculus (n = 78),Rattus norvegicus (n = 26) and Rattus rattus (n = 23). Antibodies against T. gondii and N. caninum were detected by IFAT in32.8% (40/122) and 0.8% (1/122) of rodent samples, respectively, demonstrating contact with these protozoans. Additionally,T. gondii DNA was detected in 3.3% (4/123) of rodent central nervous system samples and 2 samples were genotyped bymultilocus nPCR-RFLP. Neospora caninum DNA was not detected by PCR. The 2 genotyped samples were type III allelefor all markers except for SAG-1 (type I for Rat1Arg and type II/III for Rat2Arg) and were identified as #48 and #2 (likely)according to the allele combinations reported on Toxo DB (Toxo-DB). The results of the present study revealed a widedistribution of T. gondii and less for N. caninum, in synanthropic rats and mice in the studied area.Toxoplasma gondii e Neospora caninum são parasitas coccídeos intimamente relacionados (filo Apicomplexa). Este é o primeiro estudo de espécies de roedores sinantrópicos urbanos, o qual envolveu diagnósticos sorológicos e moleculares da infecção por T. gondii e N. caninum e genotipagem de T. gondii na Argentina. Um total de 127 amostras de roedores foram obtidas: Mus musculus (n = 78), Rattus norvegicus (n = 26) e Rattus rattus (n = 23). Anticorpos contra T. gondii e N. caninum foram detectados pela IFAT em 32,8% (40/122) e 0,8% (1/122) das amostras de roedores, respectivamente, demonstrando contato com esses protozoários. Adicionalmente, o DNA de T. gondii foi detectado em 3,3% (4/123) das amostras do sistema nervoso central de roedores e duas amostras foram genotipadas por nPCR-RFLP multilocus. O DNA de N. caninum não foi detectado por PCR. As 2 amostras genotipadas eram do tipo III para todos os marcadores, exceto para SAG-1 (tipo I para Rat1Arg e tipo II / III para Rat2Arg) e foram identificadas como # 48 e # 2 (provavelmente) de acordo com as combinações de alelos relatadas no Toxo DB (Toxo-DB). Os resultados do presente estudo indicam uma ampla distribuição de T. gondii e menor para N. caninum , em ratos e camundongos sinantrópicos na área estudada.Fil: Dellarupe, Andrea. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Fitte, Bruno. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores; ArgentinaFil: Pardini, Lais Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; ArgentinaFil: Campero, Lucía María. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Bernstein, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; ArgentinaFil: Robles, Maria del Rosario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores; ArgentinaFil: Moré, Gastón Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; ArgentinaFil: Venturini, María Cecilia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Unzaga, Juan Manuel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública. Laboratorio de Inmunoparasitología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentin