口腔疾患におけるEBウイルスの関与に関する検討

EBVはヒトに極めて広範に常在するヘルペスウイルスであり,バーキットリンパ腫,上咽頭癌の病因ウイルスと考えられる.口腔領域においては免疫不全者の舌白板症,唾液腺腫瘍への関連が指摘されている.今回,我々は当科で治療を行った口腔腫瘍および粘膜疾患105例について,疾患とEBV感染の関連を検討するため,PCR法,PCR-Southern blot hybridization法,PNA probeを使用したin situ hybridization (ISH)法でEBVゲノムの検出およびmRNAの局在の検討を行った.PCRでは口腔扁平上皮癌18/22例,線維腫11/21例,epulis 16/19例,白板症8/16例,多形性腺腫6/10例,乳頭腫6/9例,口腔扁平苔癬7/8例でEBVゲノムが検出され,EBV DNAの発現率は68.5%であった.ISHではEBVのEBERおよびBHLF mRNAの発現部位は主にリンパ球に観察された.EBERとBHLF陽性細胞の局在は調べた疾患によってまちまちであったが,口腔扁平苔癬にはEBERおよびBHLF陽性リンパ球のlabelling indexが他の疾患に比較して有意に高値を示した.以上の結果より口腔組織中にEBVが高率に存在し,EBV感染細胞の局在は主にリンパ球であり,口腔扁平苔癬の病因にEBV感染が関与している可能性が示唆された.To determine the role of the Epstein-Barr virus (EBV) in the pathogenesis of oral diseases, 105 formalin-fixed, paraffin-embeded specimens were examined. These specimens included 22 cases of oral squamous cell carcinoma, 21 cases of fibroma, 19 cases of epulis, 16 cases of oral leukoplakia, 10 cases of plemorphic adenoma, 9 cases of oral papilloma and 8 cases of oral lichen planus (OLP). The specimens were analyzed using for polymerase chain reaction (PCR), PCR-Southern blot hybridization, and in situ hybridization (ISH) with peptid nucleic acid probes for EBV-encoded small RNAs (EBER) and immediate early mRNAs of the BamH fragment of lower strand frame (BHLF). PCR products for EBV DNA were detected in 68.5% of the examined specimens. In the ISH analysis, EBER and BHLF hybridization signals were mainly localized in the infiltrating lymphocytes. Although the proportion of EBER or BHLF positive lymphocytes varied among the examined diseases, OLP specimens expressed a significantly high level of EBER or BHLF. These results suggest that EBV infection may be implicated in the pathogenesis of OLP

口腔疾患におけるEBウイルスの関与に関する検討

EBVはヒトに極めて広範に常在するヘルペスウイルスであり,バーキットリンパ腫,上咽頭癌の病因ウイルスと考えられる.口腔領域においては免疫不全者の舌白板症,唾液腺腫瘍への関連が指摘されている.今回,我々は当科で治療を行った口腔腫瘍および粘膜疾患105例について,疾患とEBV感染の関連を検討するため,PCR法,PCR-Southern blot hybridization法,PNA probeを使用したin situ hybridization (ISH)法でEBVゲノムの検出およびmRNAの局在の検討を行った.PCRでは口腔扁平上皮癌18/22例,線維腫11/21例,epulis 16/19例,白板症8/16例,多形性腺腫6/10例,乳頭腫6/9例,口腔扁平苔癬7/8例でEBVゲノムが検出され,EBV DNAの発現率は68.5%であった.ISHではEBVのEBERおよびBHLF mRNAの発現部位は主にリンパ球に観察された.EBERとBHLF陽性細胞の局在は調べた疾患によってまちまちであったが,口腔扁平苔癬にはEBERおよびBHLF陽性リンパ球のlabelling indexが他の疾患に比較して有意に高値を示した.以上の結果より口腔組織中にEBVが高率に存在し,EBV感染細胞の局在は主にリンパ球であり,口腔扁平苔癬の病因にEBV感染が関与している可能性が示唆された.To determine the role of the Epstein-Barr virus (EBV) in the pathogenesis of oral diseases, 105 formalin-fixed, paraffin-embeded specimens were examined. These specimens included 22 cases of oral squamous cell carcinoma, 21 cases of fibroma, 19 cases of epulis, 16 cases of oral leukoplakia, 10 cases of plemorphic adenoma, 9 cases of oral papilloma and 8 cases of oral lichen planus (OLP). The specimens were analyzed using for polymerase chain reaction (PCR), PCR-Southern blot hybridization, and in situ hybridization (ISH) with peptid nucleic acid probes for EBV-encoded small RNAs (EBER) and immediate early mRNAs of the BamH fragment of lower strand frame (BHLF). PCR products for EBV DNA were detected in 68.5% of the examined specimens. In the ISH analysis, EBER and BHLF hybridization signals were mainly localized in the infiltrating lymphocytes. Although the proportion of EBER or BHLF positive lymphocytes varied among the examined diseases, OLP specimens expressed a significantly high level of EBER or BHLF. These results suggest that EBV infection may be implicated in the pathogenesis of OLP

Warthin腫瘍におけるEpstein-Barrウイルスの発現

Epstein-Barr virus (EBV)はBurkittリンパ腫,上咽頭癌の発生に関連しているだけでなく,最近では胃癌をはじめとしEBV関連悪性腫瘍が次々と明らかにされてきた.EBVは唾液を介して伝播し,既感染者の唾液中にもEBVがかなりの率で排泄されることから,唾液腺が持続感染の器官として考えられている.今回EBV潜伏感染と唾液腺腫瘍との関連を明らかにする目的で,唾液腺腫瘍組織中におけるEBVの発現を免疫組織化学的,ならびにPCR法,in situ PCR法を用いてEBVゲノムの検出を行い検討した.対象は唾液腺腫瘍18例を対象とし,その内訳はWarthin腫瘍10例,多形性腺腫4例,腺様嚢胞癌2例,粘表皮癌2例でいずれも10%ホルマリン固定,パラフィン包埋組織を用いて検討を行った.免疫組織化学的にはLMP-1を1次抗体として使用しABC法で免疫染色を行った.PCRでは,EBVゲノムのBamHIK領城中の209bpを増幅するprimerを使用し,nested PCRを行った.さらにEBNA-1を組織切片上での同定を行うためin situ PCRで増幅,検出した結果,唾液腺腫瘍において免疫染色では,Warthin腫瘍全例の腺腫部分の細胞質にEBV蛋白の発現が認められたが,その他の唾液線腫瘍においては認められなかった.PCRではWarthin腫瘍全例,多形性腺腫(2/4),腺様嚢胞癌(1/2),粘表皮癌(1/2)が陽性であり,in situ PCRでは,Warthin腫瘍において腺腫部分およびリンパ球の核に一致して高頻度にシグナルが認められた.しかしその他の唾液腺腫瘍においてはリンパ球に陽性細胞を認めるが,上皮部分は陰性であった.Warthin腫瘍においてはEBVゲノムが高頻度に認められ,EBVがWarthin腫瘍の発生に関与している可能性が示唆された.Epstein-Barr virus (EBV) is known to be associated with Burkitt\u27 slymphoma, and undifferentiated nasopharyngeal carcinoma of the major salivary glands has also been found to harbor EBV. The virus can also be recovered from the saliva of healthy seropositive individuals. To determine the pathogenic role of EBV infection in salivary gland diseases, formalin-fixed, paraffin embedded specimens from 18 cases were used to study EBV by nested PCR, PCR-Southern blot hybridization, and in situ PCR for EBNA-1 (EBV nuclear antigen-1) and by immunohistochemistry (IHC) for LMP-1 (latent membrane protein-1). Ten cases of Warthin\u27 s tumor (WT) (100%) were positive by PCR and in situ PCR, and EBV DNA was detected in the nuclei of the epithelial cells and the surrounding lymphocytes. All ten cases of WT were positive for LMP-1 by IHC, and all the other lesions were negative. The positive signals were found in the cytoplasm of the epithelial cells. These results suggest that EBV infection may be involved in the pathogenesis of WT

Warthin腫瘍におけるEpstein-Barrウイルスの発現

Epstein-Barr virus (EBV)はBurkittリンパ腫,上咽頭癌の発生に関連しているだけでなく,最近では胃癌をはじめとしEBV関連悪性腫瘍が次々と明らかにされてきた.EBVは唾液を介して伝播し,既感染者の唾液中にもEBVがかなりの率で排泄されることから,唾液腺が持続感染の器官として考えられている.今回EBV潜伏感染と唾液腺腫瘍との関連を明らかにする目的で,唾液腺腫瘍組織中におけるEBVの発現を免疫組織化学的,ならびにPCR法,in situ PCR法を用いてEBVゲノムの検出を行い検討した.対象は唾液腺腫瘍18例を対象とし,その内訳はWarthin腫瘍10例,多形性腺腫4例,腺様嚢胞癌2例,粘表皮癌2例でいずれも10%ホルマリン固定,パラフィン包埋組織を用いて検討を行った.免疫組織化学的にはLMP-1を1次抗体として使用しABC法で免疫染色を行った.PCRでは,EBVゲノムのBamHIK領城中の209bpを増幅するprimerを使用し,nested PCRを行った.さらにEBNA-1を組織切片上での同定を行うためin situ PCRで増幅,検出した結果,唾液腺腫瘍において免疫染色では,Warthin腫瘍全例の腺腫部分の細胞質にEBV蛋白の発現が認められたが,その他の唾液線腫瘍においては認められなかった.PCRではWarthin腫瘍全例,多形性腺腫(2/4),腺様嚢胞癌(1/2),粘表皮癌(1/2)が陽性であり,in situ PCRでは,Warthin腫瘍において腺腫部分およびリンパ球の核に一致して高頻度にシグナルが認められた.しかしその他の唾液腺腫瘍においてはリンパ球に陽性細胞を認めるが,上皮部分は陰性であった.Warthin腫瘍においてはEBVゲノムが高頻度に認められ,EBVがWarthin腫瘍の発生に関与している可能性が示唆された.Epstein-Barr virus (EBV) is known to be associated with Burkitt' slymphoma, and undifferentiated nasopharyngeal carcinoma of the major salivary glands has also been found to harbor EBV. The virus can also be recovered from the saliva of healthy seropositive individuals. To determine the pathogenic role of EBV infection in salivary gland diseases, formalin-fixed, paraffin embedded specimens from 18 cases were used to study EBV by nested PCR, PCR-Southern blot hybridization, and in situ PCR for EBNA-1 (EBV nuclear antigen-1) and by immunohistochemistry (IHC) for LMP-1 (latent membrane protein-1). Ten cases of Warthin' s tumor (WT) (100%) were positive by PCR and in situ PCR, and EBV DNA was detected in the nuclei of the epithelial cells and the surrounding lymphocytes. All ten cases of WT were positive for LMP-1 by IHC, and all the other lesions were negative. The positive signals were found in the cytoplasm of the epithelial cells. These results suggest that EBV infection may be involved in the pathogenesis of WT