Apport des tests de quantification de la libération d’interféron gamma par les lymphocytes T sensibilisés pour le diagnostic des infections tuberculeuses

RésuméL’intradermoréaction cutanée à la tuberculine, couramment utilisée depuis un siècle pour le diagnostic d’infection tuberculeuse, présente de nombreux inconvénients. De nouveaux tests diagnostiques ont été récemment introduits. Ils mesurent soit la production d’interféron-γ dans le sang total, soit le nombre de lymphocytes T producteurs d’interféron-γ après stimulation in vitro par des protéines spécifiques de M. tuberculosis, absentes du BCG et de la plupart des mycobactéries atypiques. Le gain en spécificité permet de réduire les résultats faux positifs chez les sujets vaccinés, évitant ainsi le coût de chimioprophylaxies inutiles et potentiellement toxiques. Le gain en sensibilité, identifiant les infections tuberculeuses latentes parmi les sujets ayant une IDR faussement négative, permet d’accroître les performances diagnostiques dans les populations les plus à risques de progresser vers la tuberculose maladie, à savoir les patients immunodéprimés. L’évaluation de ces tests doit désormais se focaliser sur certains points qui restent à préciser : leur sensibilité chez l’enfant et le sujet immunodéprimé, leurs valeurs prédictives positive et négative et l’interprétation de leur variation éventuelle au cours du temps, que les patients soient traités ou non

Apport diagnostique du dosage des chaînes légères libres sériques d'immunoglobulines pour l'exploration des gammapathies monoconales

RésuméLes gammapathies monoclonales sont d\u27occurrence non négligeable (3,2 %) chez les sujets de plus de 50 ans. Pour environ la moitié d\u27entre elles, elles correspondent, lors de leur découverte, à une gammapathie monoclonale de signification indéterminée (ou MGUS en anglais pour monoclonal gammopathy of undetermined significance). Un peu plus du tiers sont des hémopathies lymphoïdes B avérées (myélome multiple, maladie de Waldenström, amylose) qui représentent le stade ultime de progression des MGUS avec une incidence annuelle de 1 %. L\u27exploration biologique immunologique validée à ce jour repose sur une analyse conjointe du sérum et des urines par immunoélectrophorèse/immunofixation qui vise à typer l\u27immunoglobuline monoclonale. Depuis 2001, un nouveau dosage est proposé pour la prise en charge diagnostique de ces patients : la détermination néphélémétrique ou turbidimétrique des chaînes légères libres (CLL) d\u27immunoglobulines kappa et lambda à l\u27aide d\u27anti-sérums spécifiques avec détermination du rapport κ/λ dont le déséquilibre peut être indicateur d\u27un excès de production monoclonale. Cela reste cependant un dosage quantitatif qui ne peut faire la preuve d\u27une anomalie qualitative (monoclonalité). L\u27apport pour le diagnostic et pour le suivi de ce dosage doit tenir compte des propriétés de la réaction antigène/anticorps en milieu liquide (phénomène de zone), du métabolisme rénal des chaînes légères avec ses conséquences en cas d\u27insuffisance rénale et des interférences possibles avec les chaînes légères liées des immunoglobulines intactes. L\u27apport diagnostique du dosage des CLL est patent dans les situations cliniques où l\u27absence de marqueur monoclonal peut être un handicap : myélome à chaîne légère, myélome apparemment non sécrétant, amylose et maladie de dépôt des chaînes d\u27immunoglobulines. Dans les autres situations (myélome à immunoglobuline intacte, MGUS), l\u27apport du dosage des CLL comme marqueur diagnostique ou comme indicateur de pronostic ou de suivi thérapeutique n\u27est pas encore prouvé. Son évaluation nécessitera des études prospectives particulièrement rigoureuses

Comparaison et intérêt des dosages des facteurs rhumatoïdes, des anticorps anti-filaggrine (anti-kératine) et des anticorps anti-peptides cycliques citrullinés dans la polyarthrite rhumatoïde

Objectifs : étudier la sensibilité et la spécificité du dosage sérique des facteurs rhumatoïdes (FR), des anticorps anti-peptides cycliques citrullinés (PCC) et des anticorps antikératine (AKA) vis-à-vis de la polyarthrite rhumatoïde (PR) ; les pathologies autres que la PR où au moins un de ces marqueurs est positif ; la signification de la fluorescence floconneuse des anticorps AKA en immunofluorescence indirecte (IFI). Méthode : deux cent quarante-huit patients ont été recrutés de manière rétrospective : 121 PR, 89 rhumatismes inflammatoires, 23 rhumatismes non inflammatoires et 15 affections non rhumatismales. Les FR ont été recherchés par néphélémétrie, les anti-PCC par immunofluorométrie et les AKA par IFI sur œsophage de rat. Résultats : les spécificités et sensibilités étaient respectivement : 68 % et 83 % pour le FR, 95 % et 76 % pour les anti-PCC, 83 % et 40 % pour les AKA dans les PR d’évolution de moins d’un an. Les taux de concordances suivants ont été observés : FR versus PCC : 81 %, FR versus AKA : 57 %, PCC versus AKA : 73 %. Douze patients ayant une pathologie différente de la PR ont des anti-PCC ou des AKA positifs. Trente-trois pour cent des patients avec des anti-PCC supérieurs à 130 U/mL avaient des AKA floconneux contre seulement 5 % quand les anti-PCC sont inférieurs à 130 U/mL. Conclusion : les recherches des FR et des anti-PCC sont complémentaires dans la PR. D’autres pathologies auto-immunes et néoplasiques peuvent parfois être responsables de la positivité des anti-PCC et des AKA. L’aspect floconneux des AKA en IFI peut être associé à des concentrations élevées en anti-PCC

The scavenger receptors SRA-1 and SREC-I cooperate with TLR2 in the recognition of the hepatitis C virus non-structural protein 3 by dendritic cells

Backgrounds & AimsThe hepatitis C virus NS3 protein is taken up by myeloid cells in a TLR2-independent manner and activates myeloid cells via TLR2. This study aimed to identify the endocytic receptor(s) involved in the uptake of NS3 by myeloid cells and its relation with TLR2. Methods Inhibitors and transfected cells were used to identify the nature of the NS3-binding receptors expressed by myeloid cells. The cooperation between scavenger receptors (SRs) and TLR2 in the NS3-mediated activation of myeloid cells was evaluated using inhibitors, cells from TLR2−/− mice, and confocal microscopy. The involvement of SRs in NS3 cross-presentation was evaluated in vitro using an NS3-specific human T-cell clone. Results We observed that SRs are the main binding structures for NS3 on myeloid cells and identified the SRs SRA-1 and SREC-I as endocytic receptors for NS3. Moreover, both SRs and TLR2 cooperate in NS3-induced myeloid cell activation. Conclusion This study highlights a central role for SRs in NS3 uptake and cross-presentation, and demonstrates a tightly orchestrated cooperation between signalling and endocytic innate receptors in NS3 recognition

PPARα regulates endothelial progenitor cell maturation and myeloid lineage differentiation through a NADPH oxidase-dependent mechanism in mice

Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha (PPARα) is a key modulator of lipid metabolism. Here, we propose that PPARα regulates the maturation and function of bone marrow (BM) progenitor cells. Although PPARα deletion increased the number of BM-resident cells and the differentiation of endothelial progenitor cells (EPCs) and monocytic progenitor cells, it impaired re-endothelization of injured carotid artery that was associated with reduced circulating EPCs. Also, PPARα deletion diminished the in vivo pro-angiogenic effect of PPARα agonist without affecting EPC differentiation markers. Macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) treatment increased the population of monocytic progenitor cells as well as secretome of BM-derived cells in PPARα wild-type but not in knock-out mice. In addition, PPARα-null mice displayed reduced lymphocytes and increased monocytes and neutrophils in the blood. Furthermore, PPARα-null mice exhibited increments in the number of total cells (as well as of phenotypically distinct subpopulations of lymph node cells) but also a significant alteration in the number of various subpopulations of splenocytes and thymocytes. Finally, PPARα negatively regulated reactive oxygen species (ROS) derived by NADPH oxidase in BM-resident progenitor cells. Taken together, our data provide evidence that PPARα is a critical regulator of recruitment, homing and maturation of BM-derived progenitor cells

Nuclear spin driven quantum relaxation in LiY_0.998Ho_0.002F_4

Staircase hysteresis loops of the magnetization of a LiY_0.998Ho_0.002F_4 single crystal are observed at subkelvin temperatures and low field sweep rates. This behavior results from quantum dynamics at avoided level crossings of the energy spectrum of single Ho^{3+} ions in the presence of hyperfine interactions. Enhanced quantum relaxation in constant transverse fields allows the study of the relative magnitude of tunnel splittings. At faster sweep rates, non-equilibrated spin-phonon and spin-spin transitions, mediated by weak dipolar interactions, lead to magnetization oscillations and additional steps.Comment: 5 pages, 5 eps figures, using RevTe

Nanovesicles from Malassezia sympodialis and Host Exosomes Induce Cytokine Responses – Novel Mechanisms for Host-Microbe Interactions in Atopic Eczema

BACKGROUND: Intercellular communication can occur via the release of membrane vesicles. Exosomes are nanovesicles released from the endosomal compartment of cells. Depending on their cell of origin and their cargo they can exert different immunoregulatory functions. Recently, fungi were found to produce extracellular vesicles that can influence host-microbe interactions. The yeast Malassezia sympodialis which belongs to our normal cutaneous microbial flora elicits specific IgE- and T-cell reactivity in approximately 50% of adult patients with atopic eczema (AE). Whether exosomes or other vesicles contribute to the inflammation has not yet been investigated. OBJECTIVE: To investigate if M. sympodialis can release nanovesicles and whether they or endogenous exosomes can activate PBMC from AE patients sensitized to M. sympodialis. METHODS: Extracellular nanovesicles isolated from M. sympodialis, co-cultures of M. sympodialis and dendritic cells, and from plasma of patients with AE and healthy controls (HC) were characterised using flow cytometry, sucrose gradient centrifugation, Western blot and electron microscopy. Their ability to stimulate IL-4 and TNF-alpha responses in autologous CD14, CD34 depleted PBMC was determined using ELISPOT and ELISA, respectively. RESULTS: We show for the first time that M. sympodialis releases extracellular vesicles carrying allergen. These vesicles can induce IL-4 and TNF-α responses with a significantly higher IL-4 production in patients compared to HC. Exosomes from dendritic cell and M. sympodialis co-cultures induced IL-4 and TNF-α responses in autologous CD14, CD34 depleted PBMC of AE patients and HC while plasma exosomes induced TNF-α but not IL-4 in undepleted PBMC. CONCLUSIONS: Extracellular vesicles from M. sympodialis, dendritic cells and plasma can contribute to cytokine responses in CD14, CD34 depleted and undepleted PBMC of AE patients and HC. These novel observations have implications for understanding host-microbe interactions in the pathogenesis of AE

Endogenous TNF alpha orchestrates the trafficking of neutrophils into and within lymphatic vessels during acute inflammation

This work was supported by funds from Arthritis Research UK (19913 to M.-B.V.) and the Wellcome Trust (098291/Z/12/Z to S.N.). S. A. was supported by a QMUL Principal’s Award PhD Studentship

CCR7 is involved in the migration of neutrophils to lymph nodes

Increasing evidence suggests that neutrophils may participate in the regulation of adaptive immune responses, and can reach draining lymph nodes and cross-prime naive T cells. The aim of this study was to identify the mechanism(s) involved in the migration of neutrophils to the draining lymph nodes. We demonstrate that a subpopulation of human and mouse neutrophils express CCR7. CCR7 is rapidly expressed at the membrane upon stimulation. In vitro, stimulated human neutrophils migrate in response to the CCR7 ligands CCL19 and CCL21. In vivo, injection of complete Freund adjuvant induces a rapid recruitment of neutrophils to the lymph nodes in wild-type mice but not in Ccr7−/− mice. Moreover, intradermally injected interleukin-17–and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor–stimulated neutrophils from wild-type mice, but not from Ccr7−/− mice, migrate to the draining lymph nodes. These results identify CCR7 as a chemokine receptor involved in the migration of neutrophils to the lymph nodes