Primeiro isolamento de Dengue 4 no Estado de São Paulo, Brasil, 2011

We report the first isolation of Dengue virus 4 (DENV-4) in the state of São Paulo, from two patients - one living in São José do Rio Preto and the other one in Paulo de Faria, both cities located in the Northwest region of the state. The virus isolations were accomplished in the clone C6/36 Aedes albopictus cell line, followed by indirect immunofluorescence assays, performed with type-specific monoclonal antibodies that showed positive reactions for DENV-4. The results were confirmed by Nested RT-PCR and Real-Time RT-PCR assays. The introduction of DENV-4 in a country that already has to deal with the transmission of three other serotypes increases the possibility of the occurrence of more severe cases of the disease. The importance of early detection of dengue cases, before the virus spreads and major outbreaks occur, should be emphasized.Relatamos o primeiro isolamento do vírus Dengue 4 (DENV-4) no Estado de São Paulo, de dois pacientes residentes em São José do Rio Preto e Paulo de Faria, ambos municípios localizados na região Noroeste do Estado. O isolamento do vírus foi realizado em clone C6/36, linhagem de células de Aedes albopictus seguido por imunofluorescência indireta, realizada com anticorpos monoclonais tipo específicos, que apresentou reação positiva para DENV-4. Os resultados foram confirmados por testes de Nested RT-PCR e RT-PCR em Tempo Real. A introdução do DENV-4 no país, com uma população suscetível a esse vírus e que já convive com a transmissão de outros três sorotipos, aumenta a possibilidade da ocorrência de casos mais graves da doença. Deve ser enfatizada a importância da detecção precoce de casos de dengue, antes que ocorra a propagação do vírus e que surtos importantes aconteçam

Inquérito sorológico de hantavírus em roedores, Uberlândia, Minas Gerais, Brasil

Realizamos um estudo transversal para identificar a presença de infecção por hantavírus em roedores em Uberlândia, Minas Gerais, e também para identificar e caracterizar fatores associados. Roedores foram capturados usando armadilhas do tipo Sherman em ambientes rural e periurbano. Um total de 611 roedores foi capturado. Houve maior sucesso de captura na área periurbana (26,3%) e maior prevalência de anticorpos entre os roedores capturados na área rural (2,9%). Necromys lasiurus foi a espécie mais encontrada (42,2%) e a mais frequentemente infectada (4,6%). Um Calomys tener (1/141; 0.7%) e um Calomys sp. (1/14; 7.1%) foram também positivos. Os dados obtidos mostram que em N. lasiurus, a prevalência de anticorpos está relacionada à densidade populacional (p < 0.01), a classe de idade (p = 0.003) e a presença de cicatrizes (p = 0.02), confirmando que a transmissão horizontal é o principal mecanismo que mantém o vírus na natureza. A maior positividade em N. lasiurus é consistente com estudos genéticos que permitem associar esta espécie como reservatório do vírus Araraquara; a soropositividade de C. tener e Calomys sp. pode indicar a ocorrência de "spillover infection" ou a presença de outros hantavírus circulantes.We conducted a serological survey to determine the presence of hantavirus infection in rodents in Uberlândia, Minas Gerais as well as to identify and characterize associated factors. Rodents were captured using Sherman live-capture traps set in rural and peri-urban environments. A total of 611 rodents were captured. There was a higher trap success in peri-urban areas (26.3%) and a higher prevalence of antibodies among rodents captured in rural areas (2.9%). Necromys lasiurus was the most common species (42.2%) and the more frequently infected (4.6%). One Calomys tener (1/141; 0.7%) and one Calomys sp. (1/14; 7.1%) were also positive for the hantavirus infection. In N. lasiurus, antibody prevalence correlated with population density (p < 0.01), age class (p = 0.003) and presence of scars (p = 0.02). The data confirm that horizontal transmission is the main mechanism that maintains the virus in nature. The higher seropositivity in N. lasiurus is consistent with genetic studies that associate this species with an Araraquara virus reservoir; the seropositivity of C. tener and Calomys sp. may indicate the occurrence of spillover infection or the presence of other circulating hantaviruses

Avaliação da detecção do antígeno NS1 para diagnóstico de dengue nos Laboratórios de Saúde Pública, Estado de São Paulo, 2009

The present work evaluated the diagnostic accuracy of detection of Dengue NS1 antigen employing two NS1 assays, an immunochromatographic assay and ELISA, in the diagnostic routine of Public Health laboratories. The results obtained with NS1 assay were compared with virus isolation and, in a subpopulation of cases, they were compared with the IgM-ELISA results obtained with convalescent samples. A total of 2,321 sera samples were analyzed by one of two NS1 techniques from March to October 2009. The samples were divided into five groups: groups I, II and III included samples tested by NS1 and virus isolation, and groups IV and V included patients with a first sample tested by NS1 and a second sample tested by IgM-ELISA. Sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, Kappa Index and Kappa Concordance were calculated. The results showed that NS1 testing in groups I, II and III had high sensitivity (98.0%, 99.5% and 99.3%), and predictive values and Kappa index between 0.9 - 1.0. Groups IV and V only had Kappa Concordance calculated, since the samples were analyzed according to the presence of NS1 antigen or IgM antibody. Concordance of 92.1% was observed when comparing the results of NS1-negative samples with IgM-ELISA. Based on the findings, it is possible to suggest that the tests for NS1 detection may be important tools for monitoring the introduction and spread of Dengue serotypes.Esse estudo avaliou a acurácia do diagnóstico por detecção do antígeno NS1 do vírus Dengue empregando-se ensaios em dois formatos, imunocromatográfico e ELISA, na rotina diagnóstica dos laboratórios de Saúde Pública. Compararam-se os resultados de NS1 com os resultados de isolamento viral e, em parte dos casos, foi feita a comparação com os resultados de IgM-ELISA, obtidos nas segundas amostras. Um total de 2.321 amostras de soros, obtidas no período de março a outubro de 2009, foram analisadas por uma das duas técnicas NS1. As amostras foram divididas em cinco grupos: I, II e III, que incluíram amostras analisadas por testes NS1 e por isolamento de vírus. Os grupos IV e V incluíram pacientes com a primeira amostra processada por NS1 e segunda por IgM-ELISA. Foram analisadas sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e negativo, concordância e índice Kappa. Os resultados mostraram que os grupos I, II e III apresentaram alta sensibilidade (98,0%, 99,5% e 99,3%), valores preditivos e índice Kappa entre 0,9 - 1,0. Nos grupos IV e V, apenas concordância foi calculada, dado que as amostras foram analisadas quanto à presença de antígeno NS1 ou de anticorpos IgM. Comparando-se os resultados negativos de NS1 com IgM-ELISA houve 92,1% de concordância. Com base nas constatações feitas, é possível sugerir que a detecção de NS1 pode ser importante ferramenta para monitorar a introdução e disseminação dos sorotipos de Dengue

Epidemiologia da infecção pela dengue em Ribeirão Preto, SP, Brasil

OBJECTIVE: To assess dengue transmission in a correctional facility for juvenile delinquents in Ribeirão Preto, state of São Paulo, Brazil. METHODS: A serological and virology investigation was carried out among inmates and employees of a correctional facility for juvenile delinquents in Ribeirão Preto, Brazil. The study population consisted of 105 inmates and 91 employees representing 89% of the exposed. The collected blood was stored and processed using MAC-ELISA and virus isolation. A questionnaire was applied to each subject at the time of blood collection. RESULTS: Of the total of blood samples collected (n=196), 42 (21.4%) were positive for IgM antibodies and 43 (21.9%) for IgG antibodies; of which, 15 were both IgM and IgG positive and 28 (14.3%) were IgG positive only. Serotype 1 dengue virus was isolated in 5 samples. Out of 42 IgM positive samples, 14 (33.0%) subjects did not have any physical complaints. The incidence rate was 23.8% and 18.6% among inmates and employees, respectively. The first cases in the facility were reported in 1997 and the last ones in March 1997 though results are suggestive of an earlier onset of transmission. CONCLUSIONS: The high incidence rate of dengue infection can be explained by the high population density of the facility, high Aedes aegypti infestation, high numbers of asymptomatic subjects, and a higher transmission of disease in a closed setting.OBJETIVO: Avaliar a transmissão de dengue em uma instituição correcional de adolescentes localizada em Ribeirão Preto, SP, Brasil. MÉTODOS: Foi realizado um inquérito sorológico e virológico da população de internos e funcionários de uma instituição correcional de adolescentes infratores localizada em Ribeirão Preto, SP, Brasil. A população de estudo consistiu em 105 menores e 91 funcionários que representavam 89% do total de pessoas expostas. O sangue coletado da população estudada foi armazenado e processado para avaliação pelas técnicas de MAC-Elisa e de isolamento viral. Cada participante respondeu a um questionário aplicado na ocasião da coleta de sangue. RESULTADOS: Do total de amostras de sangue coletadas (n=196), 42 (21,4%) foram positivas para anticorpos da classe IgM, e 43 (21,9%), para anticorpo IgG; destes, 15 com IgM e IgG positivas e 28 (14,3%) com apenas IgG positiva. Em cinco amostras, foram isolados vírus da dengue, sorotipo 1. Dos 42 casos com IgM positiva, 14 (33,4%) não relataram sintomas característico de dengue. A incidência entre os internos foi de 23,8% e, entre funcionários, de 18,6%. Os primeiros casos foram notificados em fevereiro de 1997, e os últimos, em março do mesmo ano, embora os resultados mostrem a possibilidade de a transmissão ter se iniciado bem antes de ser detectada. CONCLUSÕES: A alta incidência observada pode ser explicada pela grande densidade populacional na instituição, alta infestação do vetor Aedes aegypti, alta taxa de assintomáticos e transmissão favorecida pelo fato de a comunidade ser fechada

Vírus da encefalite São Luis: primeiro isolamento de humano no Estado de São Paulo, Brasil

O presente estudo relata o isolamento do vírus da encefalite São Luis (SLEV) de um caso febril humano suspeito de dengue, em São Pedro, Estado de São Paulo. MAC-ELISA realizado com soros das fases aguda e convalescente foi inconclusivo e anticorpos IgG foram detectados por inibição da hemaglutinação para flavivirus. Imunofluorescência indireta com cultura de células C6/36 inoculadas com soro da fase aguda foi positivo para flavivirus mas negativo quando testado com anticorpos monoclonais para dengue. O RNA extraído de cultura de células infectadas foi amplificado na presença de primers universais para o gênero Flavivirus, deduzidos de uma região da proteína não estrutural 5 e diretamente sequenciado. Os resultados da pesquisa no BLAST indicaram que a seqüência apresenta 93% de similaridade de nucleotídeos com a seqüência de SLEV (cepa MS1.7), confirmado por RT-PCR, realizado com primers específicos para SLEV. O fato de SLEV ter sido identificado como a causa de doença humana indica a necessidade de aprimorar a vigilância a fim de detectar precocemente esse agente no Estado de São Paulo e no Brasil. Esse caso é também um alerta para os profissionais de saúde sobre a necessidade de investigações clínicas e epidemiológicas mais completas sobre doenças febris como no caso relatado. Infecções por SLEV podem não ser reconhecidas ou confundidas com outras causadas por arbovírus como a dengue.This paper reports the isolation of St. Louis encephalitis virus (SLEV) from a febrile human case suspected to be dengue, in São Pedro, São Paulo State. A MAC-ELISA done on the patient's acute and convalescent sera was inconclusive and hemagglutination inhibition test detected IgG antibody for flaviviruses. An indirect immunofluorescent assay done on the C6/36 cell culture inoculated with the acute serum was positive for flaviviruses but negative when tested with dengue monoclonal antibodies. RNA extracted from the infected cell culture supernatant was amplified by RT-PCR in the presence of NS5 universal flavivirus primers and directly sequenced. Results of BLAST search indicated that this sequence shares 93% nucleotide similarity with the sequence of SLEV (strain-MSI.7), confirmed by RT-PCR performed with SLEV specific primers. Since SLEV was identified as the cause of human disease, it is necessary to improve surveillance in order to achieve early detection of this agent in the state of São Paulo and in Brazil. This finding is also an alert to health professionals about the need for more complete clinical and epidemiological investigations of febrile illnesses as in the reported case. SLEV infections can be unrecognized or confused with other ones caused by an arbovirus, such as dengue

Epizootias de febre amarela em primatas não humanos no estado de São Paulo, Brasil, 2008-2009

Desde 2000, vem sendo observada a expansão da febre amarela (FA) no Sudeste do Brasil, sendo detectados casos em áreas consideradas silenciosas por décadas. Epizootias em primatas não humanos (NHPs) são considerados eventos sentinela para a detecção de casos humanos. É importante relatar eventos epizoóticos que podem ter impacto sobre o estado de conservação de espécies sensíveis. Descrevemos as epizootias, notificadas em NHPs no estado de São Paulo, Brasil, entre setembro de 2008 a agosto de 2009. Noventa e um eventos epizoóticos, envolvendo 147 animais, foram notificados em 36 municípios. As amostras foram obtidas a partir de 65 animais (44,2%). A maioria das epizootias (46,6%) foram registradas entre março e abril, no mesmo período no qual YF em que casos humanos ocorreram no estado. As amostras biológicas foram coletadas de animais encontrados mortos e enviadas ao Instituto Adolfo Lutz, em São Paulo. Duas amostras, coletadas em dois municípios, sem indicação para a vacinação de febre amarela, foram positivos para o vírus. Outros 48 animais foram associados com FA por vínculo clínico-epidemiológico com casos confirmados laboratorialmente. Devido a doença em humanos e NHPs terem ocorrido no mesmo período, a detecção do vírus em NHPs não funcionou como sentinela, mas ajudou no processo de delimitação de novas áreas de risco.Since 2000, the expansion of Sylvatic Yellow Fever (YF) has been observed in the southeast of Brazil, being detected in areas considered silent for decades. Epizootics in non-human primates (NHPs) are considered sentinel events for the detection of human cases. It is important to report epizootic events that could have impact on the conservation status of susceptible species. We describe the epizootics in NHPs, notified in state of São Paulo, Brazil, between September 2008 to August 2009. Ninety-one epizootic events, involving 147 animals, were reported in 36 counties. Samples were obtained from 65 animals (44.2%). Most of the epizootics (46.6%) were reported between March and April, the same period during which human cases of YF occurred in the state. Biological samples were collected from animals found dead and were sent to Instituto Adolfo Lutz, in São Paulo. Two samples, collected in two counties without an indication for YF vaccination, were positive for the virus. Another 48 animals were associated with YF by clinical-epidemiological linkage with laboratory confirmed cases. Because the disease in human and NHPs occurred in the same period, the detection of the virus in NHPs did not work as sentinel, but aided in the delineation of new areas of risk

Identifying Rodent Hantavirus Reservoirs, Brazil

Bolomys lasiurus and Oligoryzomys nigripes are rodent reservoirs of Araraquara-like and Juquitiba-like hantaviruses, which cause HPS in Brazil

Hantavirus Pulmonary Syndrome, Central Plateau, Southeastern, and Southern Brazil

This syndrome is an increasing health problem because of human encroachment into habitats of rodent reservoirs