Biosynthesis of 5-aminolevulic acid in trypanosoma cruzi

Trypanosoma cruzi requires heme-compounds for growing, due to its partially or totally deficient biosynthetic pathway of heme. There are reports that support the functionality of mitochondrial enzymes involved in this pathway, such as 5-aminolevúlico synthetase (ALA-S) and Heme synthetase (Heme-S). T. cruzi genome is known and two homologous genes, Tc00.1047053511899.40 y Tc00.1047053511071.140, were identified by bioinformatic studies. Both of them are candidates to code with high score (50%) for the ALA-S enzyme, responsible for synthesizing ALA from succinyl CoA and glycine. Our hypothesis is that the parasite is able to synthesize ALA (although it cannot be metabolized to heme) and the Tc00.1047053511899.40 y Tc00.1047053511071.140 sequences encodes for a protein with ALA-S activity. Using epimastigotes, we were able to detect and quantify, by spectrophotometric studies and HPLC chromatography, the presence of ALA in the parasite both intra and extracellularly. The mesasurements were made in 30ml of parasite culture which yielded about 608,31 ± 45,20 nmol of ALA. The extracellular content represents 96% of the total synthesized. Such excretion would be avoiding the citotoxicity of ALA since it cannot be metabolized to heme From bioinformatic studies using the Blast, ORF Finder, Mitoprop, Prosite and ClustalW platforms, it was determined that the above genes would code for a mitochondrial protein (98%) which is dependent on pyridoxal phosphate and shown a KBL domain, which is characteristic of enzymes as ALA-S. Both, ALA detection and the computer analysis would support our hypothesis and encourages us to continue trying to confirm it.Fil: Puente, Vanesa Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Martinez, Maria del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Abou Assali, Lubna. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Benlolo, Micaela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Bontempi, Esteban. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Lombardo, Maria Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaLXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; IX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas y VI Reunión Científica Regional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de LaboratorioMar del PlataArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalSociedad Argentina de BiologíaSociedad Argentina de ProtozoologíaAsociación Argentina de NanomedicinasAsociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratori