Análisis de la inmunidad en los residentes del Sector Sanitario 3 de Zaragoza en 2018.

Objetivo: Valorar el estado inmune de los residentes de la promoción del año 2018 del Sector Sanitario Zaragoza 3. Introducción: Los profesionales médicos se consideran población de riesgo por su continua exposición a diversas enfermedades. Los virus de las hepatitis A (VHA), B (VHB), C (VHC), el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), y los virus de la rubéola, sarampión, parotiditis y varicela son ocho agentes para los que disponemos técnicas serológicas de detección de anticuerpos. Su utilización en personal sanitario es útil para determinar el estado inmune y, en su caso, establecer medidas preventivas de cara a la protección del trabajador y de los pacientes a los que atiende. Material y métodos: Se han realizado pruebas serológicas a los 93 residentes de la mencionada promoción para realizar un estudio transversal. Se ha analizado el grado de inmunidad de cada patógeno por separado aplicando test estadísticos para comprobar asociaciones con otras variables como la edad o de sexo. Resultados: Se han detectado anticuerpos específicos en el 45,16% para VHA, el 77,42% para VHB, el 0% para VHC y VIH, el 90,32% para rubéola, el 91,40% para sarampión, el 88,17% para parotiditis y el 97,85% para varicela. Conclusión: Se aprecian tasas de inmunidad subóptimas para VHA, VHB y parotiditis, sin diferencias significativas por razón de edad o sexo. El reconocimiento médico de los residentes de primer año es una buena oportunidad para detectar individuos no inmunizados y proceder a su vacunación. Aim: Value the immunity level of the hospital residents who started working in the Sanitary Sector Zaragoza 3 in 2018. Introduction: Healthcare workers are considered risk population because of their continued exposure to several illnesses. Serological tests for HAV, HBV, HCV, HIV, rubella, measles, mumps and varicella are available. Its use in healthcare workers is useful to determine the immune condition and, where appropriate, to establish preventive measures for the protection of the worker and the patients attended. Material and methods: 93 serological samples were obtained to carry out a cross-sectional study. Each pathogen was analyzed individually, applying statistical tests to check associations with other variables such as sex or age. Results: Specific antibodies were detected 45,16% for HAV, 77,42% for HBV, 0% for VHC and HIV, 90,32% for rubella, 91,40% for measles, 88,17% for mumps and 97,85% for varicella. Conclusion: Suboptimal immunity rates are observed for HAV, HBV and mumps, without significant differences considering age or sex. Medical recognition of first-year residents is a good opportunity to detect non-immunized individuals and to proceed with vaccination.<br /

Virus Chikungunya, una infección emergente

El virus Chikungunya (CHIKV) es un Alphavirus de la familia Togaviridae que se transmite por la picadura de mosquitos del género Aedes. Inicialmente CHIKV se aisló en Tanzania. En la última década ha experimentado una importante diseminación mundial en forma de brotes esporádicos, siendo muy llamativa la magnitud del actual brote en la región de las Américas y su aparición, tanto importada como autóctona, en regiones templadas. La infección se manifiesta con síntomas inespecíficos autolimitados que se acompañan de dolor articular. Característicamente estas artralgias pueden llegar a ser crónicas e invalidantes. De momento no se dispone de tratamiento ni vacunas específicas para esta enfermedad, siendo su prevención, mediante el control del vector, la principal medida de contención. Su diagnóstico se basa en la determinación del virus mediante técnicas moleculares, cultivos celulares y la detección de la respuesta inmune por técnicas serológicas. En este artículo se revisan los conocimientos e investigaciones más relevantes en cuanto al CHIKV, su vector, la clínica y patogénesis de la enfermedad, los métodos diagnósticos y los últimos avances en tratamiento y prevención

Virus Respiratorio Sincitial en Zaragoza en 2017

Análisis de base de datos de 1416 pacientes del Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa cuyas muestras fueron tomadas entre el 1 de enero y el 31 de diciembre del 2017, para conocer la prevalencia del Virus Respiratorio Sincitial. Las muestras, de vías respiratorias altas, se analizaron con la técnica RT-PCR en array. Se obtuvo predominio del VRS tipo B frente al A. Gran prevalencia de VRS en todos los grupos de edad, especialmente en menores de 2 años y mayores de 85. Relación entre infección y meses fríos. Cabe destacar la necesidad de conocer la prevalencia extrahospitalaria para establecer el impacto real.<br /

Valoración del antígeno del core como alternativa en el cribado rutinario y de urgencia del virus de la hepatitis C

El virus de la hepatitis C (VHC) es un virus de la familia Flaviviridae cuya transmisión es principalmente por vía parenteral. Es un virus que desarrolla su fase aguda de modo asintomático para el hospedador pero que, superada dicha fase aguda, tiene una tendencia de más del 80% a la cronificación. La cronificación de la hepatitis C desemboca en un elevado número de los casos en cirrosis y en hepatocarcinoma (de hecho el VHC se considera una causa importante de trasplante hepático en España derivado de la elevada tasa de hepatocarcinomas o cirrosis hepática que produce en su fase crónica). La prevalencia de la infección crónica por VHC es elevada en África y Asía (>3%), y en menor proporción en países industrializados de Occidente (En España, la prevalencia actual de la infección parece ser mayor que la descrita en la bibliografía del momento. Según un estudio de Arroyo Fernández y cols. la infección está presente en el 10% de las muertes naturales en nuestro país, alcanzando casi un 40% en los penitenciarios españoles, y el 60% de las muertes relacionadas con el consumo de drogas. El 27% de las cirrosis y hasta el 65 % de los casos de carcinoma hepatocelular (CHC) suceden en pacientes infectados por el VHC.La transmisión de la infección puede suceder de diferentes formas, y podemos dividirla en parenteral (actualmente los factores de riesgo más significativos para la transmisión, por su evidente falta de control, son la adicción a drogas por vía parenteral (ADVP) y la práctica de tatuajes y piercings) y en no parenteral (comprende principalmente vías de contagio de bajo riesgo como la transmisión perinatal y la transmisión sexual).Es por ello que se trata de una enfermedad de primer orden en la sanidad y que, como tal, debe de tenerse en cuenta a la hora de aplicar protocolos profilácticos para minimizar su incidencia sobre la población. 1.-Aspectos clínicos de la hepatitisC¿ Infección agudaComo regla general la primoinfección es asintomática en el 90-95% de los casos. Las formas agudas suelen ser poco habituales (10%) y poco llamativas. El periodo de incubación se estima entre 2 y 26 semanas aunque en el 80-90% de los infectados los síntomas aparecen entre las 4 y 10 semanas; la incubación de las postransfusionales es más corto. El cuadro clínico de la forma aguda es similar al de otras hepatitis, pero el virus C no suele producir ictericia y el nivel de ALT suele ser igualmente más bajo y generalmente fluctuante, alcanzando su máximo nivel entre los 30 - 60 días postinfección y en coincidencia con la inflamación aguda del hígado. Cuadros más intensos no suelen ser habituales (5%) y dependen en gran parte de la dosis infectiva. Las formas fulminantes son muy poco frecuentes.¿ Infección crónicaAunque la resolución definitiva de la enfermedad es posible (10 - 25 % de los casos), lo más frecuente en cualquiera de sus formas clínicas es la evolución a la cronicidad. La proporción de pacientes con infección aguda por virus C que se transforman en infecciones crónicas se estima que es un 60-70%. Si la infección ha sido adquirida por transfusión, la cronicidad es la norma en el 50-70% de los infectados mientras que en los casos esporádicos estas cifras descienden a rangos del 15- 30%. Sólo el 40-60% de los pacientes con infección crónica desarrollan hepatitis, la situación puede variar desde un estado asintomático sin daño hepático hasta una forma con hepatitis rápida que en poco tiempo, 8 o 10 años, produce cirrosis. Lo habitual es que esta evolución se haga en un periodo de 20 o 30 años. La práctica repetida de biopsias hepáticas muestra una gran heterogeneidad entre los pacientes infectados crónicamente por VHC. En algunos casos las lesiones se mantienen estables durante años, en otros empeoran progresivamente y en otros alternan fases de empeoramiento y de mejoría. La progresión a cirrosis, parece producirse de forma gradual, por lo que la proporción de pacientes cirróticos aumenta con el paso de los años. No se han comprobado diferencias claras en la evolución entre los pacientes con hepatitis por VHC adquirida por transfusión y la de adquisición esporádica.Con independencia de la evolución histológica, que puede ser muy evolucionada incluso en pacientes totalmente asintomáticos y con ALT normales, las manifestaciones clínicas de la hepatitis crónica por VHC se mantienen modestas a lo largo de los años. La mayoría de los pacientes siguen libres de síntomas o con mínimas molestias inespecíficas que rara vez interfieren con su actividad cotidiana. Esta ausencia de síntomas se comprueba no sólo en los pacientes que presentan lesiones hepáticas estables y mínimas sino también en los que progresan a la cirrosis, por lo que permanecer asintomático no garantiza una evolución favorable.La gran mayoría de los pacientes con hepatocarcinoma asociado al VHC padecen cirrosis, sin embargo, aproximadamente un 3% de los hepatocarcinomas se desarrollan sobre hígados no cirróticos. A pesar de la ausencia de integración de este virus estos datos confirman la existencia de un efecto oncogénico directo del VHC. El intervalo entre la infección por VHC y la aparición del hepatocarcinoma es de 7 a 25 años. Para terminar, es posible que la aparición de mutantes que escapen a la vigilancia del sistema inmune explique en muchos casos la persistencia de la infección. Es así mismo posible que la infección, por variantes genéticas con distinta capacidad aparecidas en el curso de la infección crónica bajo la presión del sistema inmune o adquiridas en el momento del contagio, pueda contribuir a explicar la marcada variabilidad evolutiva de la infección crónica por VHC. 2.-Diagnóstico de laboratorio de la infección por VHCExisten dos métodos diagnósticos, directos (métodos moleculares o virológicos) que determinan y cuantifican el ARN viral mediante la detección de los componentes estructurales virales, y métodos diagnósticos indirectos entre los que se encuentran las técnicas serológicas que detectan el antígeno del core del VHC y aquellas que detectan anticuerpos específicos del VHC.2.1.-Diagnóstico indirectoa)Detección de anticuerpos:Del 25% al 30% de los pacientes con infección aguda desarrollan síntomas, aproximadamente el 50-70% tendrán anticuerpos detectables en el periodo inicial (4-6 semanas), pero el 90% tendrán anticuerpos detectables después de 3 meses. Los ensayos serológicos detectan una infección activa o pasada, pero no puede discriminar una infección crónica, aguda o resuelta. Los Anti-VHC IgM pueden ser detectados en un 50-93% de pacientes con VHC aguda y en un 50-70% de los casos crónicos, por lo que no son un buen marcador de infección activa. Caso aparte merecen los recién nacidos. En ellos, los anticuerpos maternos, transmitidos pasivamente, pueden mantenerse positivos (siendo sus madres infectadas por VHC) de 12 a 15 meses, y extraordinariamente hasta los 18 meses.La variedad de proteínas producidas durante el proceso de replicación del VHC produce una respuesta serológica muy variada frente a él. No ha podido encontrarse una relación precisa entre los diferentes patrones de respuesta inmune y el estadío biológico o clínico de la infección. Únicamente sabemos con certeza que los anticuerpos frente al core (antígeno c22-c) y NS3 (c33-c) son los primeros en aparecer en los cuadros de primoinfección. PRUEBAS SEROLÓGICAS DE CRIBADO DE ANTICUERPOS TIPO IgG FRENTE AL VHCLos métodos EIA son los que están en uso. Contienen una mezcla de péptidos sintéticos o recombinantes, o una combinación de ambos, frente a los que se miden los anticuerpos IgG que tiene la muestra. Cuando se indica que un suero es reactivo con esta metodología se está diciendo que tiene anticuerpos frente a alguno o todos los antígenos empleados en la prueba pero no sabemos frente a cuál o cuáles. Las pruebas serológicas han evolucionado con el tiempo mejorando su sensibilidad y especificidad. En la actualidad las diferentes marcas poseen diferentes mezclas de antígenos y son considerados de ¿3ª generación¿. Todas poseen antígenos derivados de la nucleocápside (c22-3), de la región no estructural NS3/NS4 (c33-c, c100-3. C200) y de alguna parte de NS5.Han pasado a la historia ¿los EIA de 1ª y 2ª generación¿; nadie los emplea puesto que no se fabrican. Debemos de ser precavidos al interpretar datos epidemiológicos obtenidos con pruebas antiguas que en algunos casos carecían de la suficiente sensibilidad.Un resultado positivo indica exposición al VHC. En la mayoría de los casos se correlaciona con la presencia de ARN-VHC en la sangre por lo que es un marcador de alto valor predictivo de infección viral. Esto es especialmente cierto con las reactividades elevadas de anticuerpos obtenidas con ciertas marcas de EIA. En un 20-25% de los casos, indica también exposición pasada y curada.DETECCIÓN DE ANTICUERPOS TIPO IgM FRENTE AL VHCSe ha detectado respuesta de tipo IgM contra el antígeno ¿core¿, NS3 y NS4, que habitualmente coincide en el tiempo con la respuesta de tipo IgG. La respuesta más intensa de IgM está dirigida contra el antígeno del ¿core¿ y en algunos casos es el primer marcador que aparece tras la infección por el virus. La duración de la respuesta de IgM es habitualmente breve pero es frecuente seguir detectándola en la fase crónica de la enfermedad. En cualquier caso no se ha demostrado que la determinación de IgM anti-VHC en el diagnóstico de la infección aporte datos claros y concluyentes sobre la biología o estadío de la infección viral. ¿ ENSAYOS CONFIRMATORIOS Se han desarrollado ensayos suplementarios para confirmar la especificidad del resultado del EIA. Chiron corporation fue la primera compañía en desarrollar un inmunoensayo en tira de nitrocelulosa para ayudar a diferenciar verdaderos positivos de falsos positivos obtenidos en los enzimoinmunoensayos. Posteriormente la FDA aprobó el inmunoensayo recombinante se segunda generación (RIBA), esto fue en 1993. Los inmunoensayos en tira de nitrocelulosa incluyen los antígenos EIA, y además superóxido dismutasa humana (hSOD). Los antígenos recombinantes c-33-c y NS5 que se usan en el EIA se sintetizaron fusionando el antígeno con la hSOD. La hSOD se incluye para detectar anticuerpos no específicos. El RIBA es considerado positivo si hay reacciones con al menos dos antígenos con intensidades superiores o iguales al control positivo débil y no hay, además, reacción frente a hSOD. Los RIBAs indeterminados se dan cuando hay reacción con un solo antígeno o cuando hay reacción frente la hSOD y en uno o más antígenos. El cambio de c100 a c22 como proteína recombinante, en la tercera versión del RIBA ha reducido significativamente el número de resultados indeterminados.Otro inmunoblot basado en el mismo principio es en Line Inmuno Assay (LIA) (Innogenetics®), que incorpora antígenos de la región del core, de la región hipervariable de E2, la región NS3, NS4A, NS4B y NS5. En el caso del ensayo LIA, una muestra es positiva para anticuerpos Anti-VHC si al menos dos bandas de antígeno de VHC tienen intensidad ± o superior. Los LIAs indeterminados se dan en dos situaciones: Cuando únicamente una banda de antígeno de VHC tiene una puntuación 1+ o superior o si la banda NS3 reacciona con una intensidad ± o superior y todas las demás bandas de antígeno son negativas.b) Detección del Antígeno del core del VHCHay diferentes argumentos para considerar la proteína del core diana adecuada para el diagnóstico de la hepatitis C. En primer lugar, sus anticuerpos se encuentran en la mayoría de pacientes infectados por VHC, la secuencia de aminoácidos de la proteína del core es común en todos los genotipos y, por último, la presencia de anticuerpos frente al antígeno del core está relacionada con la replicación viral. A modo comparativo con la detección del ARN viral, éste es un método más sencillo de llevar a cabo gracias a que todo su proceso está automatizado, el escaso volumen que necesita (158 µl frente a 650 µl de la PCR en tiempo real), y rápido de llevar a cabo además de otras facilidades de su procedimiento.Los primeros intentos para desarrollar una técnica para la detección del VHC se remontan al año 1992, la diana de estos ensayos era la proteína del core del VHC, que es la más abundante en el virión y cuyos epítopos se hallan bien conservados en los diferentes genotipos y además son bien conocidos.En el año 1999 se publicó el primer método para la detección del antígeno del core de VHC (VHCcAg) en suero. Este método mostró ser capaz de detectar concentraciones de hasta 0.06 pg/mL de VHCcAg recombinante, lo que equivale a una concentración de viriones de aproximadamente 500 copias/mL. También detectó infecciones por cinco genotipos diferentes (1a, 1b, 2b, 3a y 3c), las correlaciones obtenidas sobre muestras positivas por PCR VHC fueron del 94.5-96%. Así mismo el método mostró no verse afectado por la presencia de anticoagulantes en la muestra (EDTA, heparina, citrato) ni de otras sustancias que pueden interferir en este tipo de ensayos, como la hemoglobina, el factor reumatoide, la bilirrubina y los lípidos.Si se exceptúa el periodo de ventana de la infección aguda y las infecciones en pacientes inmunodeprimidos, las partículas virales de VHC circulantes coexisten en el suero del paciente infectado con concentraciones variables de anticuerpos específicos frente a sus distintas proteínas. Al disgregar los viriones para liberar los antígenos, estos vuelven rápidamente a formar inmunocomplejos con sus anticuerpos específicos. Y no es posible detectarlos si no se incluye algún componente que prevenga la formación de inmunocomplejos o algún procedimiento para destruirlos. El primer ensayo se desarrolló para uso en bancos de sangre con el objeto de detectar la infección por VHC en pacientes negativos con el ensayo que detectaba anticuerpos Anti-VHC (donantes en periodo de ventana). Este primer ensayo descrito por Tanaka, no disponía de tratamiento de disociación de inmunocomplejos, por lo que era negativo en los pacientes que poseían los dos marcadores (VHCcAg y Anti-VHC). El primer ensayo, posteriormente modificado por Aoyagy con la adicción en un paso de la disociación de inmunocomplejos, permitía la detección de antígeno, tanto en presencia como en ausencia de anticuerpos Anti-VHC. El uso de una combinación adecuada de agentes detergentes durante el proceso de liberación del antígeno presente en la muestra permite inhibir la formación espontánea de inmunocomplejos en la medida necesaria para detectar los antígenos liberados de los viriones. El ensayo de cuantificación del VHCcAg posee buena especificidad (99,5%), es independiente del genotipo y ha mostrado una baja variación intra e interensayo. Su sensibilidad analítica se ha establecido como ¿ 3.00 fmol/l (3.00 fmol/l se consideran positivas y muestras 3.00-10 fmol/l se consideran resultados en zona gris que deberían repetirse). Después de la infección por el virus de la hepatitis C la detección del antígeno del core se retarda de 1 a 2 días respecto a cuando el ARN viral se hace detectable. También muestra una buena correlación con el ARN viral, por lo que algunos tutores le atribuyen un papel como marcador de la replicación viral.A partir de la incorporación del paso de disociación de inmunocomplejos se han realizado diversos estudios sobre su posible aplicación en la monitorización del tratamiento con ribavirina e interferón y sobre su utilidad para determinar la respuesta temprana al tratamiento en pacientes infectados con el genotipo 1, a la semana 12 del inicio del mismo, tanto sin coinfección por el VIH como coinfectados con el VIH.2.2.-Diagnóstico directo: diagnóstico molecularEl diagnóstico molecular en el caso del VHC se basa en la detección del ARN del virus en la muestra clínica y se puede dividir en dos tipos: métodos cualitativos (sólo detectan) y métodos cuantitativos (detectan y además cuantifican).Las pruebas cualitativas se utilizan para confirmar una infección activa por VHC en algunos pacientes seropositivos con resultados dudosos, para diagnosticar la infección en los seronegativos con alta sospecha (infección muy precoz) y en los pacientes inmunodeprimidos y recién nacidos. Las pruebas de detección cuantitativas de medición de carga vírica y la detección de los genotipos se usan para evaluar la enfermedad por VHC y para establecer un pronóstico sobre la eficacia del tratamiento y monitorizar la respuesta a éste.La detección y cuantificación generalmente se realiza en muestras de suero y plasma, siendo muy importante una estricta y correcta manipulación de las muestras para obtener una buena rentabilidad. Deberían ser separadas de los hematíes en un plazo no superior a las cuatro horas tras la extracción de la sangre, para prevenir la degradación del ARN por las ARNasas endógenas. Se recomienda su rápida refrigeración y almacenamiento a -70ºC para asegurar la óptima estabilidad del ARN. Deben evitarse las sucesivas congelaciones y descongelaciones. El proceso de manipulación preanalítica (separación de sueros y alicuotado) es proclive a producir contaminaciones cruzadas entre muestras negativas y positivas, por lo que deben extremarse las precauciones, al ser técnicas de una gran sensibilidad.Debido a que la cantidad de ARN viral en el suero del paciente es muy baja, se requiere un paso de amplificación de la diana, como la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa, previa retro-transcripción (RT-PCR), o de la señal de detección, como el branched DNA (bDNA). Para la RT-PCR un paso de retro-transcripción convierte el ARN viral en ADN complementario (ADNc) que es utilizado como diana para la PCR. Los cebadores utilizados para la amplificación hibridan en la región 5¿-UTR, que es la más conservada del genoma del virus.PCR en tiempo real En la PCR a tiempo real, los procesos de amplificación y detección se producen de manera simultánea en el mismo vial cerrado, sin necesidad de ninguna acción posterior. Además, mediante detección por fluorescencia se puede medir durante la amplificación la cantidad de ADN sintetizado a cada momento, ya que la emisión de fluorescencia producida en la reacción es proporcional a la cantidad de ADN sintetizado. Esto permite conocer y registrar en todo momento la cinética de reacción de amplificación.Los termocicladores para llevar a cabo la PCR a tiempo real incorporan un lector de fluorescencia y están diseñados para poder medir, en cualquier momento, la fluorescencia emitida en cada uno de los viales donde se realice la amplificación. Los sistemas de detección de fluorescencia empleados en la PCR a tiempo real pueden ser de dos tipos: agentes intercalantes y sondas específicamente marcadas con fluorocromos. Los agentes intercalantes son fluorocromos que aumentan notablemente la emisión de fluorescencia cuando están unidos al ADN de doble cadena. El más utilizado es el SYBR Green I. El principal inconveniente de este tipo de detección es su baja especificidad, ya que estos fluorocromos se unen indistintamente al producto amplificado, a productos generados inespecíficamente o a dímeros de cebadores.Las sondas de hibridación específicas son sondas marcadas con dos tipos de fluorocromos, un donador o un aceptor. El proceso se basa en la transferencia de energía fluorescente mediante resonancia entre las dos moléculas. Las más utilizadas son las sondas de hidrólisis TaqMan.Su coeficiente de variación intra e interensayo es de 1 y 6,2% respectivamente. La sensibilidad puede detectar al menos 10 UI/mL (cuando los métodos convencionales de PCR poseen sensibilidades en torno a 600 UI/mL). Se han desarrollado sistemas comerciales automatizados. La relación entre el nivel de fluorescencia y la carga viral se calcula mediante patrones de concentraciones de ARN del VHC ya conocidas (diluciones estándar). Finalmente, conociendo el nivel de fluorescencia de cada muestra y su relación con la carga viral, se calcula la concentración de ARN de la muestra que, como en el resto de técnicas moleculares, se expresa en UI/mL mediante la incorporación del estándar de la OMS.Evolución de los marcadores durante la primoinfecciónEn estos casos los anticuerpos pueden hacerse detectables entre las semanas 4-6 después del comienzo de la enfermedad pero puede alargarse como media a las 8 semanas (depende en gran parte de la dosis infectiva que aportó el mecanismo de transmisión). También puede detectarse IgM. El título más elevado de anticuerpos suele establecerse después que lo hayan alcanzado las ALT. En esta fase los anticuerpos están dirigidos fundamentalmente contra c22, c33-c, ambos muy antigénicos, y NS5.El ARN es el primer marcador en aparecer y el antígeno del core del VHC aparecerá entre 0 y 2 días después a éste. Por lo tanto ambos son detectables mucho antes de la seroconversión y su concentración suele ir en incremento hasta que los anticuerpos alcanzan su meseta. Luego, si el paciente c

Prevalencia de la rubéola en Aragón en 2016

Objetivo: Comprobar el estado de inmunidad en una muestra de 4017 pacientes en el año 2016 en el Hospital Clínico Universitario (HCU) y evaluar los factores que influyen en la seroprevalencia. Introducción: La rubéola es una enfermedad producida por un virus perteneciente a la familiaTogaviridae, del géneroRubivirus. Se transmite por secreciones respiratorias siendo el ser humano el reservorio del mismo. Produce la rubéola en niños y adultos y el Síndrome de Rubéola Congénito en el feto cuando la infección se adquiere durante el embarazo. Existe una vacuna contra la rubéola de virus atenuados que está contraindicada en el embarazo. Material y métodos: Se analizan los resultados de 4016 sueros recibidos durante el año 2016, tras la exportación de los mismos a una base de datos.Tras la depuración de la misma, se han incluido en este estudio 3768 como muestra final. Resultados: Se obtiene una prevalencia total de 87,79%. En embarazadas se obtiene una prevalencia total de 87,15%. No hubo diferencias significativas en sexo. Hubo diferencias significativas en grupos de edad y continente de procedencia. Conclusión:Se observa una disminución de la prevalencia por lo que hay que estar alerta ante las consecuencias que esto pudiera suponer. Palabras clave: rubéola, síndrome rubéola congénita, embarazo, vacuna, seroprevalencia

Diagnóstico de la Hepatitis E ¿un problema resuelto?

Introducción:La hepatitis E (HE) representa actualmente una de las principales causas de hepatitis aguda en el mundo (1,2). Este trabajo se ha planteado tras observar el aumento de casos de IgM anti virus hepatitis E (VHE) positivos en los últimos años con una predilección por determinadas zonas geográficas de Aragón.Objetivos:Evaluar distintos métodos serológicos comerciales para diagnóstico de la HE, en función de las manifestaciones clínicas, tiempo de evolución y tipo de paciente, entre otros y estimar la situación de la HE en Aragón.Material y métodos:Durante los años 2011-2018, en el Hospital Clínico Lozano Blesa, se ha realizado la serología del VHE de todo Aragón. Las muestras con el marcador IgM positivo por DIA.PRO se guardaron a -80ºC hasta su análisis.Se han clasificado los pacientes en base a la sintomatología clínica, marcadores de infección aguda y análisis bioquímico en: hepatitis aguda, infección asintomática/anticuerpos residuales y falsos positivos. Posteriormente, se han realizado 3 técnicas IgM de distintos fabricantes, una técnica IgG, PCR y secuenciación. Además, ha sido posible el desarrollo de una prueba de avidez IgG. En los pacientes con muestras de seguimiento, pudimos analizar la persistencia depositividad de los distintos marcadores.Resultados:El diagnóstico de infección por VHE ha aumentado de 0,96% en 2011 a 7,40% en 2018, así como el número de peticiones solicitadas.La prevalencia de IgG en la zona noroccidental de la provincia de Zaragoza fue de 18,83%, siendo esta la zona donde se concentran la mayoría de los casos diagnosticados de HE.Existen discordancias entre las técnicas IgM debidas principalmente, a los diferentes antígenos usados en el diseño de las mismas. DIA.PRO ha resultado ser la prueba más sensible, pero con bajo valor predictivo positivo. Índices mayores a 8 y menores a 5 permiten discriminar hepatitis agudas y falsos positivos, respectivamente. La IgM detectada con el equipo de VIRCELL fue la que mejor se asoció con la infección aguda/reciente, avalando su mayor VPP.Se ha detectado que la IgM puede persistir de manera prolongada, en especial con el equipo de DIA.PRO que llegó a ser mayor a 2,5 años, aunque también se han detectado con las otras técnicas, en el caso de MIKROGEN 2,5 años y WANTAI 1 año, y 7 meses en el caso de VIRCELL, lo que complica la interpretación de la IgM como único marcador de infección aguda.La PCR fue útil en pacientes con sintomatología de hepatitis aguda en casos de menos de 30 días de evolución. La avidez tuvo una buena correlación en pacientes con PCR positiva (Índice kappa: 0,88). En las muestras deseguimiento, se comprobó como la avidez aumentaba en un periodo de 8 a 10 semanas.Se han secuenciado 27 muestras de pacientes con PCR positiva a VHE y se ha comprobado que el genotipo que mayoritariamente circula por Aragón es el 3f, a pesar de que también se han detectado casos con genotipo 3m y 3c.Se han identificado dos pacientes con Síndrome Parsonage-Turner asociado a infección por VHE.Conclusiones:El número de pruebas solicitadas de HE ha aumentado considerablemente en los últimos años, así como, el número de casos positivos en Aragón.El diagnóstico de la HE sigue siendo un reto, por la corta duración de la viremia en sangre y la variabilidad de las pruebas serológicas. La PCR y la avidez han resultado ser herramientas útiles en el diagnóstico de la HE.En el análisis por secuenciación, ha demostrado que, en Aragón, el genotipo que circula es principalmente el 3f, el que circula mayoritariamente en Europa, y especialmente en Francia y España.En pacientes con síntomas neurológicos no asociado a traumatismo es necesario realizar diagnóstico diferencial de VHE<br /

VISIÓN DE LA PANDEMIA DE SARS-CoV-2 DESDE EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Evaluar la carga de trabajo que ha supuesto la aparición de la pandemia por el virus SARS-CoV-2 en el Laboratorio de Microbiología del Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa, analizando el número de PCR realizadas desde febrero hasta diciembre del año 2020, clasificando por Servicios y por rangos de edad, junto con el número de pruebas serológicas IgG obtenidas, desde julio hasta diciembre del año 2020. <br /

Virus linfotropo de células T humanas y programas de trasplante

Objetivo: Evaluar la necesidad de la implantación de un cribado sistemático del virus linfotropo de células T humanas (HTLV) en el Programa Nacional de Trasplantes. Introducción: El HTLV es un virus de la familia Retroviridae que se transmite por vía vertical, sexual, parenteral y a través de trasplante de órgano sólido. Produce leucemia/linfoma de células T adultas en un 5% de los infectados, y mielopatía asociada a HTLV o paraparesia espástica tropical en un 3-5%. Actualmente no existe un tratamiento eficaz. Material y métodos: Entre el 14 de diciembre de 1998 y el 30 de abril de 2016, 1651 pacientes han participado en el programa de trasplantes del Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa, siendo el 94,42% españoles y el 5,58% inmigrantes. A lo largo del tiempo, se aplicaron 3 técnicas de cribado de HTLV a todos los posibles receptores y donantes y 2 de confirmación a los positivos en dicho cribado. Resultados: De los 1651 pacientes, 10 resultaron positivos en las pruebas de cribado, siendo, luego, confirmados 5 de ellos para infección por HTLV-2. Conclusión: Pese a la baja prevalencia del virus HTLV en España, dada la elevada transmisión de la enfermedad mediante trasplante, el número creciente de inmigrantes que participan en los programas de trasplante y el antecedente de infección HTLV-1 en pacientes trasplantados en Baracaldo, consideramos necesaria la sistematización del cribado de HTLV en el programa nacional de trasplantes. Palabras clave: HTLV, técnicas de cribado, programa de trasplantes

Antibody response in patients admitted to the hospital with suspected SARS-CoV-2 infection: results from a multicenter study across Spain

Coronavirus SARS-CoV-2; COVID-19; 2019-nCoV; Diagnòstic; IgACoronavirus SARS-CoV-2; COVID-19; 2019-nCoV; Diagnóstico; IgACoronavirus SARS-CoV-2; COVID-19; 2019-nCoV; Diagnosis; IgAAim To evaluate the serological response against SARS-CoV-2 in a multicenter study representative of the Spanish COVID pandemic. Methods IgG and IgM + IgA responses were measured on 1466 samples from 1236 Spanish COVID-19 patients admitted to the hospital, two commercial ELISA kits (Vircell SL, Spain) based on the detection of antibodies against the viral spike protein and nucleoprotein, were used. Results Approximately half of the patients presented antibodies (56.8% were IgM + IgA positive and 43.0% were IgG positive) as soon as 2 days after the first positive PCR result. Serological test positivity increased with time from the PCR test, and 10 days after the first PCR result, 91.5% and 88.0% of the patients presented IgM + IgA and IgG antibodies, respectively. Conclusion The high values of sensitivity attained in the present study from a relatively early period of time after hospitalization support the use of the evaluated serological assays as supplementary diagnostic tests for the clinical management of COVID-19.The ELISA kits for the IgG and IgM + IgA assays were provided by Vircell SL. No additional funding was received

Utilidad de MALDI-TOF MS en la identificación de garrapatas de interés médico

En España, al igual que en otros países del mundo, el espectro de enfermedades transmitidas por garrapatas, así como su incidencia, han aumentado en los últimos años. Ante un paciente con una picadura de garrapata, la identificación a nivel de especie del ejemplar puede ser complicado fuera del ámbito de los centros especializados. En base al hecho de que, las infecciones transmitidas por la picadura de garrapatas muestran una marcada especificidad vectorial, conocer la identidad de la garrapata puede resultar muy útil en la toma de decisiones clínicas, incluyendo, entre otras, la necesidad (o no) de instaurar un tratamiento antibiótico. Los métodos clásicos de identificación consisten en lainspección visual del espécimen y las técnicas de amplificación de ácidos nucleicos.Sin embargo, ninguno de estos métodos está exento de limitaciones en términos de costes, tiempo de entrega de resultados, laboriosidad, necesidad de personal altamente entrenado, etc.En los últimos años, la espectrometría de masas por desorción-ionización con láser asistida por matriz (MALDI-TOF MS), ha sido aplicada con éxito en la identificación de garrapatas. Sin embargo, el conocimiento acerca del rendimiento de esta tecnología en un contexto clínico (con pacientes reales) es mucho más limitado. Los objetivos del presente estudio fueron, en primer lugar, la optimización de un protocolo de extracción proteica y adquisición de espectros; en segundo lugar, la construcción de una biblioteca de espectros de referencia, suficientemente representativa. Dicha biblioteca fue construida a partir de los espectros adquiridos a partir de muestras de extremidades de garrapatas. Lasespecies de garrapatas que fueron incluidas en la biblioteca incluyen aquellas que suelen picar a humanos en España: Dermacentor marginatus, Dermacentor reticulatus, Haemaphysalis punctata, Hyalomma lusitanicum, Hyalomma marginatum, Ixodes ricinus, Rhipicephalus bursa, Rhipicephalus pusillus y Rhipicephalus sanguineus sensu lato. También se incluyeron aquellas especies que, con menor frecuencia, también están involucradas en picaduras a humanos en nuestro país: Haemaphysalis inermis, Haemaphysalis concinna, Hyalomma scupense, Ixodesfrontalis, Ixodes hexagonus y Argas sp. Los especímenes fueron identificados, primero visualmente, y posteriormente mediante PCR y secuenciación de un fragmento del gen ARNr 16S.La validación del protocolo se ejecutó mediante la realización secuencial de diversos test. En los primeros de estos ensayos de validación, realizados con especímenes recolectados de diversas fuentes, excepto pacientes, se obtuvo una correlación del 100% entre los métodos moleculares y la espectrometría de masas.En las segundas de estas pruebas, realizadas exclusivamente con garrapatas retiradas de pacientes, se observó una correlación del 92.59 %, y todas las especies estudiadas obtuvieron unas puntuaciones de identificación discretamente inferiores respecto a los resultados obtenidos en los primeros ensayos. Sólo se obtuvo la identificación incorrecta en el caso de dos ninfas de I. ricinus, las cuales fueron identificadas como Ctenocephalides felis (una especie de pulga). Sin embargo, el problema de discriminación entre estas dos especies difícilmente presenteun impacto clínico apreciable, debido a que ambas especies de artrópodos presentan rasgos morfológicos muy diferenciados.Tras la validación del protocolo, la tecnología MALDI-TOF MS fue incorporada en el Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa como la técnicade primera elección en la identificación de garrapatas. Tras quince meses de experiencia clínica, los resultados obtenidos permitieron confirmar el excelente rendimiento observado en los ensayos de validación. Un total de 34 ejemplares fueron remitidos al laboratorio para su identificación, de los cuales 33/34 (97,06 %) obtuvieron una identificación correcta. Tan sólo un ejemplar adulto de R. sanguineus s.l. fue incorrectamente identificado como R. pusillus, ambos con un score de identificación prácticamente idénticos (1,93 vs 1,92).Por tanto, la tecnología MALDI-TOF MS puede ser utilizada como herramienta de identificación de garrapatas, con la rápida obtención de resultados altamente fiables. De manera clave, el conocimiento de dicha información puede ayudar al clínico a la toma de importantes decisiones, que incluyen entre otras actitudes: la indicación (o no) de administrar un antibiótico, el seguimiento del paciente (la aparición de qué síntomas, y durante cuánto tiempo deben ser vigilados), la selección de pruebas serológicas. Por último, la simplicidad del protocolo que ha sido cuidadosamente optimizado durante la presente investigación permite que su implementación sea sumamente asequible para cualquierlaboratorio clínico (con una inversión inicial mínima) que esté dotado de un espectrómetro de masas.<br /