Asociación entre endofitos Epichloë y especies de Trichoderma aisladas de la rizósfera de Bromus auleticus

Bromus auleticus es una gramínea nativa perenne, considerada una excelente forrajera invernal. Sus poblaciones se encuentran asociadas a hongos endofitos del género Epichloë, los cuales establecen asociaciones mutualistas con gramíneas C3 colonizando sistémica e intercelularmente los tejidos aéreos. Se transmiten verticalmente a través de las semillas por lo que esta asociación es previa a que la planta establezca interacciones con otros microorganismos. Evidencias indican que los endofitos Epichloë otorgan beneficios a sus hospedantes por medio de metabolitos que producen dentro de las plantas, los que podrían ser excretados a través de las raíces, afectando las comunidades microbianas del suelo.El objetivo fue evaluar la abundancia y diversidad de cepas de Trichoderma en la rizosfera de plantas de B. auleticus asociadas (E+) o no (E-) a E. tembladera. Se tomaron muestras de raíces de 8 plantas E+ y de 8 plantas E- cultivadas en el campo experimental del INTA Concepción del Uruguay. Para el aislamiento de Trichoderma, de cada planta se cortaron fragmentos de raíz de (1.5-2)cm que fueron lavados con agua durante 15´ y suavemente desinfectados superficialmente (hipoclorito de sodio 0,5% 2´, enjuague con agua estéril y secado con papel estéril). Se sembraron 15 fragmentos por planta en cajas de Petri (90mmØ) en medio agar-agua con cloranfenicol (100µg/ml), 3 placas por planta y fueron incubados a 24°C en oscuridad. Ante la detección de colonias asociadas a las raíces se realizaron repiques en agar-papa-glucosado con mismo antibiótico hasta obtener cultivos puros. La identificación se realizó analizando características morfofisiológicas macro y microscópicas según Druzhinina et al.(2005). Se obtuvieron 38 aislamientos con características afines a especies de Trichoderma, que fueron agrupados en 6 morfotipos: 1 de identificación incierta y 5 identificados como afín a T. harzianum, T. gamsii, T. saturnisporum, T. sp.nov. 1, T. sp.nov. 2 (Barrera V. 2012. Tesis Doctoral UBA). Se comparó la diversidad entre plantas E+ y E- utilizando los índices de Shannon (H) y Simpson inverso (1/D). Se encontró mayor diversidad y abundancia de cepas de Trichoderma en las plantas asociadas a Epichloë (H(E+)=1,54;H(E-)=1,40. 1/D(E+)=4,44;1/D(E-)=3,68), sugiriendo que podría modular la comunidad fúngica asociada. Cepas afines a T. harzianum fueron aisladas únicamente de plantas E+. Considerando que son potenciales biocontroladores, podría ser un beneficio otorgado por Epichloë.Fil: Lanari, Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; ArgentinaFil: Avanzato, María Valeria. University of Arkansas-Fayetteville; Estados UnidosFil: Iannone, Leopoldo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; ArgentinaFil: Novas, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; ArgentinaIV Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental y I Jornada de Microbiología GeneralMar del PlataArgentinaAsociación Argentina de Microbiologí

Asociación entre endofitos Epichloë y la micobiota del rizoplano de bromus auleticus

Bromus auleticus, es una gramínea nativa, considerada una excelente forrajera invernal, . Sus poblaciones establecense asocia asociaciones mutualísticamenteistas con hongos endofitos del género Epichloë. Estos, los cuales colonizan sistémica e intercelularmente los tejidos aéreos y. sSe transmiten verticalmente a través de las semillas, por lo quesiendo esta su asociación es previa a que la planta establezcaotras interacciones con otros microorganismos. Los metabolitos de del origen fúngicoendofito o de la interacción planta-endofito, producidos en el interior del hospedante, son excretados a través de las raíces hacia el rizoplano, afectando a las comunidades microbianas del suelo. El objetivo fue analizar la abundancia y diversidad de la micobiota del rizoplano de B. auleticus asociadas (E+) o no (E-) a Epichloë. Se muestrearon raíces de 8 plantas E+ y 8 E-, cultivadas en el campo experimental del INTA Concepción del Uruguay. Se cortaron fFragmentos de raíz fueron , se desinfectaronesterilizados superficialmente y e incubados se sembraron 15 fragmentos/3 placas por planta en cajas de Petri con medio AgarAgua y fueron incubados a 24°C/oscuridad. Las colonias asociadas a las raíces se repicaron en APG hasta obtener cultivos puros. La identificación se realizó mediante técnicas macro y micromorfológicas. Se obtuvieron 126 aislamientos, identificados como: Alternaria, Clonostachys, Cylindrocarpon, Fusarium, Gonytrichum, Penicillium, Rhizomucor, Trichoderma y Mycelia sterilia. La abundancia fue semejante entre las plantas E+ (61) y en las E- (65), fue semejante. Se comparó la diversidad utilizando los índices de Shannon y Simpson inverso. Si bien lLos géneros más abundantes fueron, Trichoderma y Fusarium, ambos fueron aislados a partir del rizoplano de plantas E+/- y, fue de las E+, y de las E+ de donde se aislaron todos laos hongos especies restantes. Los índices de diversidad muestran leves diferencias entre las E+ y E-. Los resultados obtenidos sugieren que no habría una asociación directa entre la infección con Epichloë y la abundancia de hongos del rizoplano, pero sí con una mayor diversidad. La asociación con Epichloë podría favorecer modular las iasociaciones con organismos benéficos e inhibir nteracciones del hospedante con organismos detrimentales.Fil: Lanari, Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; ArgentinaFil: Avanzato, María Valeria. Coker University; Estados UnidosFil: Iannone, Leopoldo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; ArgentinaFil: Novas, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; ArgentinaXII Reunión Nacional Científico Técnica de Biología del SueloArgentinaUniversidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomí

A Simple Method for Optimal DNA Extraction from Different Filamentous Fungi Species Growing on Earthen Walls of ‘Vale Histórico Paulista’, São Paulo, Brazil

This study aims to describe a new simple and efficient method of extracting DNA from filamentous fungi isolated from historical earthen walls. This method involves growing the mycelium on overlapping cellophane discs on solid medium and the disruption of the fungal cell wall by a combined action of liquid nitrogen and a lytic enzyme. The extraction is performed with the PureLink ™ Genomic DNA Mini Kit protocol from Pure Genomic. The full procedure can be completed in two hours. The new genomic DNA extraction protocol provided good quality and quantity of fungal DNA, from fungal mycelium, with an average yield of 27 ng/µL of DNA per sample. Purified DNA samples yielded 25 ng of DNA ready for sequencing. PCR amplifications of the DNA extracted using the new method were more successful than those extracted using the CTAB method. Thus this new extraction protocol is demonstrated to be an effective method for the identification of a wide range of filamentous fungal species that affect the integrity of buildings with earthen architecture.Fil: Fazio, Alejandra Teresa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Avanzato, María Valeria. Coker University; Estados UnidosFil: Cinto, Isabel Esther. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; ArgentinaFil: Cavicchioli, Andrea. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Araújo de Faria, Dalva Lúcia. Universidade de Sao Paulo; Brasi