Detección y localización de alteraciones cromosómicas en la oveja (Ovis Aries)

Se han desarrollado estudios citogenéticos en 94 moruecos de la raza Rasa Aragonesa. Con objeto de facilitar las tareas de cartografía génica, se han aplicado procedimientos de bandeo de alta resolución RBG y GTG, que permiten la identificación de cada par cromosómico. El Programa de Análisis de Imagen por ordenador (BIOCOM) se ha utilizado para obtener las longitudes relativas de los cromosomas ovinos y realizar estudios de fotometría en cromosomas. Las técnicas de bandeo cromosómico de alta resolución y de análisis de imagen han servido para determinar la posición de una deleción en el cromosoma9 (9811:13,12-) y para detectar (en dos moruecos diferentes) un locus frágil en la región proximal del brazo p del cromosoma 1 (1p-). Los resultados de estos estudios y la eficacia de los métodos suponen un importante avance en los estudios cromosómicos de la oveja, especialmente en el campo de la detección y localización de alteraciones cromosómicas

Estudios genéticos para la identificación de la estructura genética de la perdiz roja (alectoris rufa l.) y su aplicación en explotaciones y áreas cinegéticas

Como objetivo primordial de este trabajo, se pretende profundizar en el conocimiento del genoma de la especie Alectoris rufa. Estos estudios se concretan en el sexaje a partir del ADN de perdiz en la especie, en el estudio de la dinámica de poblaciones, tanto en silvestres como en cautividad y, por consiguiente, en el conocimiento de la variabilidad genética existente y en la estima de los valores de consanguinidad. Finalmente se pretende la construcción de una genoteca de A. rufa y la posterior búsqueda de marcadores moleculares microsatélites. En la aplicación de la metodología de sexaje se ha introducido una variación respecto a lo publicado por diversos autores, consistente en la necesidad de utilizar enzimas de restricción para la correcta identificación de las bandas que corresponden al sexo femenino, y su diferenciación de los individuos de sexo masculino. En el estudio poblacional se ha puesto de manifiesto la situación genética de dos poblaciones. La primera de ellas, es una población silvestre de Extremadura, y la segunda, una población en cautividad correspondiente a una granja de Cataluña. Se estudian las frecuencias alélicas, las hetercigosidades, el PIC, los estadísticos F de Wright y las distancias genéticas de Nei. Con todos estos estudios se ha comprobado que la situación genética de la población en cautividad presenta más problemas genéticos que la población silvestre, con respecto a la existencia de menor variabilidad genética y de un cierto valor de consanguinidad. Por último, se llevó a cabo la obtención de una genoteca genómica de A. rufa. A partir de ella se puso especial énfasis en la búsqueda de marcadores moleculares microsatélites que ayuden a ampliar los conocimientos que se tienen acerca del genoma de la especie. Se usaron para ello tres vías: una primera, secuenciando al azar colonias con fragmentos de un tamaño adecuado, una segunda; elaborando combinaciones de cebadores con secuencias repetidas en PCR; y, por último, mediante hibridación con sondas fluorescentes de ADN de secuencias microsatélite. Con la primera de las vías se obtuvieron 2 posibles microsatélites, de los que sólo uno resultó tener variabilidad alélica (AG)n. La segunda vía resultó no ser la más adecuada debido a la dificultad de conseguir unas condiciones de PCR optimizadas para cada colonia, obteniéndose de esta manera falsos positivos. Se ha demostrado que la hibridación es la mejor manera de obtener microsatélites a partir de una genoteca. De esta manera se han obtenido dos microsatélites: uno compuesto interrumpido (AT)n (AC)3 T(AC)n (AT)n, y otro sencillo (AC)n

Detección y localización de alteraciones cromosómicas en la oveja (Ovis Aries)

Se han desarrollado estudios citogenéticos en 94 moruecos de la raza Rasa Aragonesa. Con objeto de facilitar las tareas de cartografía génica, se han aplicado procedimientos de bandeo de alta resolución RBG y GTG, que permiten la identificación de cada par cromosómico. El Programa de Análisis de Imagen por ordenador (BIOCOM) se ha utilizado para obtener las longitudes relativas de los cromosomas ovinos y realizar estudios de fotometría en cromosomas. Las técnicas de bandeo cromosómico de alta resolución y de análisis de imagen han servido para determinar la posición de una deleción en el cromosoma9 (9811:13,12-) y para detectar (en dos moruecos diferentes) un locus frágil en la región proximal del brazo p del cromosoma 1 (1p-). Los resultados de estos estudios y la eficacia de los métodos suponen un importante avance en los estudios cromosómicos de la oveja, especialmente en el campo de la detección y localización de alteraciones cromosómicas

Obtención de DNA para el estudio de BLAD en toros de Argentina y España

Un nuevo método de extracción de muestras para análisis de DNA ha sido utilizado en 24 toros de la Cooperativa de Inseminación Artificial de Venado Tuerto, CIAVT, (Argentina) y en 10 toros del Centro de Selección y Reproducción Animal, CENSYRA, de Movera (España). En estos toros se estudia la Deficiencia de Adhesión Leucocitaria Bovina (BLAD). La enfermedad se debe a una mutación en la posición 488 del gen BOVCD18A o ITG2 (Shuster et al., 1992a) consistente en el cambio de una guanina por adenina, lo que produce el cambio del aminoácido ácido aspártico por glicina en la posición 128 de la cadena de la integrina 2, que en su forma mutada determina la incapacidad de emigración leucocitaria durante el proceso inflamatorio. El estudio se lleva a cabo mediante (PCR). Los fragmentos amplificados, se digieren con el enzima de restricción Taq I y se compara el polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP), respecto de controles positivos homocigotos y heterocigotos, así como también con controles negativos y un marcador de DNA como escala de referencia de tamaño. No se han encontrado portadores o enfermos de BLAD en ninguna de las poblaciones estudiadas

Obtención de DNA para el estudio de BLAD en toros de Argentina y España

Un nuevo método de extracción de muestras para análisis de DNA ha sido utilizado en 24 toros de la Cooperativa de Inseminación Artificial de Venado Tuerto, CIAVT, (Argentina) y en 10 toros del Centro de Selección y Reproducción Animal, CENSYRA, de Movera (España). En estos toros se estudia la Deficiencia de Adhesión Leucocitaria Bovina (BLAD). La enfermedad se debe a una mutación en la posición 488 del gen BOVCD18A o ITG2 (Shuster et al., 1992a) consistente en el cambio de una guanina por adenina, lo que produce el cambio del aminoácido ácido aspártico por glicina en la posición 128 de la cadena de la integrina 2, que en su forma mutada determina la incapacidad de emigración leucocitaria durante el proceso inflamatorio. El estudio se lleva a cabo mediante (PCR). Los fragmentos amplificados, se digieren con el enzima de restricción Taq I y se compara el polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP), respecto de controles positivos homocigotos y heterocigotos, así como también con controles negativos y un marcador de DNA como escala de referencia de tamaño. No se han encontrado portadores o enfermos de BLAD en ninguna de las poblaciones estudiadas

Preliminary studies of the genetic structure of "Cimarron uruguayo" dog using microsatellite markers

Objetive. To analyze the population structure, using microsatellite markers in a sample of �Cimarron Uruguayo� dogs. Materials and methods. Thirty dogs were analyzed in different areas of Uruguay with a set of nine molecular microsatellite markers using PCR. The population structure was analyzed using the free distribution software �Structure��. Results. According to our data, the preliminary results show that it is not possible to establish a subdivision among the animals in the sample. Conclusions. The study supports the hypothesis that the currently existing canines derive from a founding nucleus that took refuge in the Northeastern region of the country. The distribution of the breed among the different areas of Uruguay continues nowadays, so there is no isolation among the different groups of animals, and the exchange is constantObjetivo. Analizar la estructura poblacional en una muestra de perros �Cimarrón Uruguayo� usando marcadores moleculares tipo microsatélites. Materiales y métodos. Se analizaron treinta caninos de diferentes zonas de Uruguay con un set de nueve marcadores moleculares microsatélites empleando PCR. La estructura poblacional se analizó con el software de distribución libre �Structure�. Resultados. Según nuestros datos, los resultados preliminares muestran que no es posible establecer una subdivisión entre los animales de la muestra. Conclusiones. El estudio realizado apoya la hipótesis de que los perros que existen en la actualidad derivan del núcleo fundador que se refugió en la región noreste del país. La distribución de la raza entre las distintas áreas de Uruguay continúa hoy en día, no existe aislamiento entre los diferentes grupos de animales y el intercambio es constante

Evaluación higiénica previa de acrilamida en aire durante la preparación de gel de poliacrilamida (paa) en un laboratorio de genética

Artículos Originales[ES] Objetivos: Conocer el nivel aproximado de concentración en aire de Acrilamida cancerígeno y mutagénico tipo 2, durante la preparación del gel de Poliacrilamida en el Laboratorio, para verificar si la situación higiénica es tolerable, o si no lo es, para tomar medidas preventivas inmediatamente, antes de llevar a cabo una evaluación detallada con arreglo a UNE-EN 689, con un coste notablemente mayor. Metodología: Una vez seleccionadas las etapas de preparación del gel donde hay emisión de Acrilamida, el método higiénico seguido ha sido el PV2004, de NIOSH, para la toma de muestra y el análisis. Resultados: La concentración de Acrilamida detectada en la fase de pesada es de 723% del Valor Límite de Exposición Profesional para exposición diaria y del 145% del Valor Límite de Exposición Profesional para Corta Exposición. En la fase de agitación no se detectó Acrilamida en la muestra. Conclusiones: Es necesario tomar medidas preventivas inmediatamente. Se proponen varias medidas. Una vez aplicadas, se recomienda realizar la evaluación higiénica según UNE-EN 689. [EN] Aims: To know the approximate level of Acrylamide, carcinogenic type 2, in air, during the preparation of Polyacrylamide-Gel in the laboratory, in order to determine if the occupational hygiene situation is acceptable or not, in order to, if not, to implement immediately preventive measurements, before carring out an hygienical assessment following the UNE-EN 689 standard, with much higher costs. Methods: After the selection of the gel-preparation stages, where evaporation of Acrylamide takes place, the followed method was PV2004, from NIOSH, for the sample collection and for the analyse. Results: The detected level of Acrylamide in the weighting stage is 723 % of the TLV-TWA and 145% of the TLV-C. In the stirring stage there was found no Acrylamide .Conclusions: It is necessary to implement immediately preventive measurements. Some of them areproposed. Once implemented it is recommended to carry out an hygienical assessment according to UNE-EN 689.N

Detección de relaciones genéticas en líneas comerciales de conejos

Cuatro machos aparecieron en un envío de conejas de una línea materna. Las relaciones genéticas entre machos y hembras se analizaron mediante la huella dactilar genética. Dada la existencia de bandas comunes, se introdujo como término de comparación un grupo control (conejos no relacionados entre sí ni con los animales a estudio). Se calcularon las proporciones medias de bandas compartidas (x) dentro y entre estos tres grupos, que se compararon mediante análisis de varianza y test de la diferencia mínima significativa protegida de Fisher (PLSD). Los resultados mostraron que los machos no estaban relacionados con las hembras y probaron la utilidad de la metodología aplicada en ausencia de datos poblacionales y de pedigrí

Análisis electroforéticos de 10 loci enzimáticos en perdices rojas (alectoris rufa) mantenidad en cautividad

Se han analizado muestras individuales correspondientes a 105 perdices rojas (Alectoris rufa) criadas en cautividad y pertenecientes a 10 explotaciones españolas distintas, dedicadas a la cría de perdices para repoblación. Se han considerado 10 loci enzimáticos independientes: PGD, GP1, ME1, GOT1, IDH1, LDHA, LDHB, MDH1, MDH2 y MPI. Mientras que LDHB y MDH2 resultaron ser monomórficos, ME1 e IDHl presentaron tres y dos alelos respectivamente. En el resto, se apreció la presenciade un alelo próximoa la fijación junto con otro u otros dos de baja frecuencia. Es de destacar la presencia de formas anormales de LDH en cinco individuos de la misma explotación, con sólo una, dos o tres bandas, frente a las cinco bandas habituales, que podrían explicarse por la hipotética existencia de un alelo sin actividad para LDHA (LDH*A). La población de granja mostró, en su conjunto, un valor de F sub IS significativo (F sub IS = 0,3501 ; p<0,05). La comparación de esta población de granja con un grupo de 174 perdices rojas silvestres procedentes de diversas regiones españolas presentó un valor de F sub ST significativo aunque bajo (F sub ST 0,0712 ; p<04,05). Los loci que resultaron más informativos para apreciar estas diferencias fueron GOT1 (F sub ST= 0,0087 ; p<0,05), IDH1 (F sub ST = 0,1115 ; p<0,05) y MPI (F sub ST= 0,0251 ; p<0,05)

Estimación de frecuencias genotípicas del gen PRP en la raza ovina rasa aragonesa. Identificación de animales con alelos sensibles a SCRAPIE

Se han estudiado 62 sementales de la raza ovina Rasa Aragonesa, aplicando la metodología de PCR-RFLP con el fin de identificar los animales portadores de alelos resistentes y alelos sensibles a la enfermedad prión o encefalopatía espongiforme transmisible (EET). En el presente trabajo se estiman las frecuencias obtenidas para cada uno de los alelos identificados en la población estudiada