Molekulargenetische Analyse der plastidären Transkription

Im Rahmen dieser Arbeit wurden drei SIG-Faktoren aus Sinapis alba funktionell charakterisiert. Die Proteine zeigen in ihrer Sequenz Ähnlichkeit zu den bakteriellen Sigmafaktoren, die der RNA-Polymerase spezifische Promotorbindung verleihen. Die Proteine wurden ausgehend von den cDNA-Sequenzen mittels bakterieller Überexpression synthetisiert und in Promotor-Bindungsstudien eingesetzt. Es wurde die Bindung zu unterschiedlichen plastidären Promotoren untersucht. Zusätzlich wurden Punktmutationen des psbA-Promotors hergestellt und die Interaktion mit den SIG-Proteinen analysiert. Über ortspezifische Mutagenese konnten einzelnen Aminosäuren die Interaktion mit den Promotorelementen nachgewiesen werden. Western-Analysen zeigten ein unterschiedliches Genexpressionsmuster der Proteine. Über in vitro Transkriptionsexperimente konnte den SASIG-Proteinen Transkriptionsinitiations-Aktivität nachgewiesen werden und die besondere Rolle des N-terminalen Bereichs des SASIG3-Faktors gezeigt werden