New insights on the inhibition of neutrophil extracellular traps enzymes in equine endometrium

Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias na especialidade de Ciências Biológicas e BiomédicasMares physiologically develop a post-breeding endometritis characterized by a fast arrival of neutrophils into the uterine lumen. These neutrophils besides releasing granules of proteolytic and cytotoxic enzymes, may also deliver to the extracellular environment their DNA, histones and enzymes forming neutrophil extracellular traps (NETs). Besides trapping and fighting pathogens, NETs persistence has been also associated to the development of pathological conditions, such as fibrosis. The enzymes found in NETs, such as elastase (ELA), cathepsin G (CAT) and myeloperoxidase (MPO) act as pro-fibrotic factors in equine endometrial fibrosis, by inducing collagen type I (COL1) accumulation. Matrix metallopeptidases (MMPs) are crucial for this extracellular matrix remodeling. Prostaglandins (PG)s E2 and F2α have been described as possessing anti or pro-fibrotic effects. Equine endometrial explants from follicular phase (FP) or mid-luteal phase (MLP) were treated in vitro with ELA, CAT or MPO and their specific inhibitors for 24 or 48h. This work aimed to evaluate the explants response to: (i) ELA inhibition by sivelestat sodium salt (SIV) on COL1A2 transcription and PGE2 and PGF2α secretion; (ii) ELA and SIV treatment on MMP-2 and MMP-9 activity, and the inhibitory effect of SIV on ELA-induced COL1; (iii) CAT and Cathepsin G inhibitor I (β-keto-phosphonic acid; INH) treatment on MMP-2 and MMP-9 activity, and the effect of INH on CAT-induced COL1 production; (iv) the inhibitory effect of 4-aminobenzoic acid hydrazide (ABAH) on MPO-induced COL1 and the effect of MPO and ABAH on MMP-2 and MMP-9 gelatinolytic activity. In FP, COL1A2 transcription decreased in SIV-treated group, simultaneously with reduced pro-fibrotic PGF2α and increased anti-fibrotic PGE2 production. In ELA- and SIV-treated explants, MMPs expression depended on estrous cycle phase and time of treatment. Sivelestat inhibited ELA-induced COL1A2 transcripts in FP (24 h) and MLP (24 h, 48 h). The effect of INH was observed on CAT-induced COL1 in both phases at 48h. The MMP-2 might be involved in an earlier response to CAT, while MMP-9 in a later response in FP. The inhibitory effect of ABAH on MPO-induced COL1 was detected in FP at 48h. Matrix metallopeptidase-2 appears to be involved in an acute response to MPO treatment in MLP and MMP-9 in FP in a prolonged MPO treatment. The use of specific inhibitors of ELA, CAT or MPO, might be the grounds for future development of specific drugs to be used as prophylaxis or therapy of endometrosis in the mare.RESUMO - Novas perspetivas na inibição das enzimas das redes extracelulares dos neutrófilos na edometrose equina - Nas éguas, após inseminação natural ou artificial, é frequente ocorrer endometrite, caracterizada pela chamada de neutrófilos para o lúmen uterino. Os neutrófilos, além de libertarem grânulos de enzimas proteolíticas e citotóxicas, podem também libertar filamentos de DNA, histonas e várias enzimas para o meio extracelular originando as redes extracelulares dos neutrófilos (NETs). Embora a sua principal função seja o aprisionamento e o combate de agentes patogénicos, a persistência de NETs tem sido associada ao desenvolvimento de várias situações patológicas, de entre as quais fibrose. A elastase (ELA), catepsina G (CAT) e mieloperoxidase (MPO) são enzimas pró-fibróticas presentes nas NETs que induzem a produção de colagénio tipo I (COL1) na fibrose endometrial equina. As metalopeptidases da matriz (MMPs) são cruciais nesta remodelação da matriz extracelular. As prostaglandinas (PG)s E2 e F2α têm sido associadas a efeitos anti e pró-fibróticos. Neste trabalho foram utilizados explantes de endométrio equino tanto da fase folicular (FP) como da fase lútea-média (MLP) que foram tratados in vitro com as enzimas presentes nas NETs e seus inibidores durante 24 e 48h. Este trabalho teve como objetivos a avaliação da resposta dos explantes de endométrio equino: (i) à inibição da ELA pelo sal sivelestat de sódio (SIV) na transcrição de COL1A2 e secreção de PGE2 e PGF2α; (ii) ao efeito do tratamento com ELA e SIV na atividade das MMP-2/-9 e inibição pelo SIV no COL1 induzido pela ELA; (iii) ao efeito do tratamento com CAT e Inibidor I da Catepsina G (ácido β-acetofosfónico; INH) na atividade das MMP-2/9 e na inibição pelo INH no COL1 induzido pela CAT; e (iv) à inibição pela hidrazida de ácido 4-aminobenzóico (ABAH) no COL1 induzido pela MPO e os efeitos da MPO e ABAH na atividade da MMP-2/-9. Na FP, o tratamento com SIV reduziu a transcrição de COL1A2 e a produção de PGF2α pró-fibrótica mas aumentou a produção de PGE2 anti-fibrótica. No tratamento com ELA e SIV, a expressão de MMPs variou com a fase do ciclo e a duração do tratamento. Na FP (24h) e MLP (24 e 48h), o SIV reduziu os transcriptos de COL1A2 induzidos pela ELA. O INH reduziu o COL1 induzido pela CAT nas duas fases, às 48h. A MMP-2 parece estar envolvida numa resposta rápida à CAT, e a MMP-9 numa resposta tardia na FP. O ABAH diminuiu o COL1 induzido pela MPO na FP às 48h. A MMP-2 parece estar envolvida numa resposta aguda à MPO, e a MMP-9 numa resposta longa na FP. O uso de inibidores específicos das enzimas das NETs pode constituir a base para o desenvolvimento de potenciais fármacos passiveis de serem utilizados numa abordagem profilática ou terapêutica na endometrose equina.N/

Information systems support for organizational strategy

Nowadays, due to the technological evolution the necessity of companies to face their competitors and the constant market changes, Information Systems (IS) have revealed as a critical success and survival factor in the organizational context. Information with quality and suitable for the companies' objectives are currently one of the main assets of firms, since enable organizations to choose and implement accurate strategies that will probably lead to success and competitive advantage. For that matter, the present research aims to understand what are the benefits that can be achieved by companies through the implementation of Information Systems. The aspects in which companies should invest as way to maximize those benefits and identify the risks associated with Information Systems implementation, as well as what are the answers of firms in regards with those risks, particularly, at a risk mitigation approach. Being the principal objective of the present investigation understand the contribute of Information Systems for organizational strategy. Bearing in mind the variables mentioned in the previous chapter, a data analysis was performed through a combined approach of quantitative methods. The results obtained verify that, in fact, the Information Systems have a positive impact in firms' strategy. Specially through the investments in suitable equipment for IS implementation, namely, technology and Human Resources with specific IS capabilities. Considering the results achieved, one can affirm that those investments are influenced by the Benefits and Risks associated with the use of IS, revealing, in a statistical perspective, a significantly positive relationship.Atualmente, dado o avanço tecnológico e a necessidade das empresas de fazer face aos seus concorrentes e às contantes mudanças de mercado, os Sistemas de Informação (SI) têm revelado ser um fator critico de sucesso e de sobrevivência no contexto organizacional. Informação de qualidade e adequada aos objetivos de uma empresa são atualmente um dos maiores ativos da mesma, pois permite às organizações definir e implementar estratégias apropriadas que levarão, com maior probabilidade, ao sucesso e à vantagem competitiva. Deste modo, a presente dissertação visa compreender quais os benefícios que poderão ser obtidos através da implementação de SI. Os aspetos em que as empresas devem investir de modo a maximizar esses benefícios e a identificação dos riscos associados ao uso desses sistemas, bem como, a resposta das empresas face a esses riscos, particularmente, numa perspetiva de mitigação de risco. Sendo o principalmente objetivo do presente estudo perceber, em concreto, se os SI contribuem para a estratégia. Considerando as variáveis mencionadas no paragrafo anterior, foi realizada uma análise das mesmas através de métodos quantitativos. Os resultados obtidos comprovaram que, de facto, os SI impactam positivamente a estratégia das empresas. Particularmente, através de investimentos em equipamento adequado à implementação dos sistemas, nomeadamente, tecnologia e Recursos humanos com específicos conhecimentos em SI e Tecnologia da Informação. Segundo os resultados alcançados, pode-se ainda constatar, que esses investimentos são, influenciados pelos benefícios e pelos riscos associados ao uso de SI, estando todos eles de um ponto de vista estatístico positivamente relacionados

Síndrome de Gilles de La Tourette: Relato de Caso com Diagnóstico Tardio

Gilles de la Tourette syndrome is a neuropsychiatric disease that affects about 1% of the population with frequent onset during childhood or early adolescence. Tics, the central manifestation, tend to decrease in frequency and severity throughout adolescence, even though a small percentage of cases progress to severe illness. We present a clinical case description of a 28‑year‑old patient late diagnosed at 18 years old, with severe disease and no response to treatment as well as a prognostic and maintenance factor exploration and surgical indication in pharmacological resistant cases. The pathophysiology is not well established and there is no approved treatment for all patients. There are alternatives when psychotropic drugs are not effective and a surgical intervention is considered in this case. We highlight the importance of a good co‑work and communication between Child and Adolescent Psychiatry, Psychiatry and Primary Care and early diagnosis. Further studies and evidence will be necessary to define and individualize resistant cases treatment.A síndrome de Gilles de La Tourette é uma doença neuropsiquiátrica que afeta cerca de 1% da população. Tem início frequente na infância ou adolescência precoce. Os tiques, manifestação central, tendem a diminuir em frequência e gravidade durante a adolescência, existindo uma pequena percentagem de casos que evolui para doença grave. A propósito de um caso clínico de uma doente com 28 anos, com diagnóstico tardio aos 18 anos, doença grave e sem resposta ao tratamento, apresenta‑se uma revisão de fatores de prognóstico, manutenção e indicações para alternativa cirúrgica na doença resistente. A fisiopatologia não está definida, não existindo tratamento eficaz comprovada para estes indivíduos. Existem alternativas quando o tratamento com psicofármacos não é eficaz e considera‑se proposta cirúrgica neste caso. Destaca‑se a importância de uma boa articulação entre a Psiquiatria da Infância e Adolescência, a Psiquiatria e os Cuidados Primários. Conclui‑se que serão necessários mais estudos para definir e individualizar o tratamento em casos de doença resistente

Contributo para o estudo de uma relação, considerando as variáveis sociodemográficas género e idade

Recentemente tem-se assistido ao desenvolvimento de inúmeros estudos que visam aprofundar os conhecimentos relativos ao traço Alta Sensibilidade de Processamento Sensorial (ASPS). A presente investigação é transversal, e com uma abordagem quantitativa, descritiva e correlacional, propõe-se a averiguar quais as formas de agressão presentes em indivíduos com ASPS, e se o género e a idade influenciam a passagem ao ato. Os dados foram recolhidos através de um protocolo disponibilizado on-line que incluía a Escala de Alta Sensibilidade de Processamento Sensorial (EASPS), versão em processo de validação à população portuguesa, e o Questionário de Agressividade (QA). A amostra global foi de 1061 sujeitos, tendo sido aplicados critérios de exclusão que a reduziram para 947 indivíduos, dos quais 65.8% do género feminino, com idades entre os 18 e os 80 anos (M = 29.08, DP = 12.034). Os resultados obtidos indicam que 67.9% dos participantes pontuaram acima da mediana teórica na EASPS, e 8.3% revelaram pontuações acima da mediana teórica no QA. O género feminino apresenta resultados mais elevados na EASPS e no fator raiva (QA). O género masculino apresenta resultados mais elevados no fator agressão física (QA). Os participantes com 23 ou menos anos de idade apresenta resultados proeminentes no QA (score total), agressão física (QA) e hostilidade (QA). Os resultados revelam que maiores níveis de ASPS estão associados a maiores níveis de agressão, concretamente no género feminino e nos participantes com idades compreendidas entre os 24 e os 59 anos de idade, que maiores níveis de ASPS estão associados a maiores níveis de hostilidade (QA), e que maiores níveis de facilidade de excitação (EASPS) estão associados a maiores níveis de agressão (score total do QA) e hostilidade (QA). As considerações finais demonstraram as principais contribuições da presente investigação, bem como algumas das suas limitações, indicando-se sugestões para estudos futuros.Recently there has been development a numerous studies that aim to deepen the knowledge about High Sensory-Processing Sensitivity (HSPS) trait. The present investigation is transversal, and has a quantitative, descriptive and correlational approach, it is proposed to investigate the forms of aggression present in individuals with HSPS, and whether gender and age influence the passage to the act. The data was collected through an online protocol that included the High Sensitive Person Scale (HSPS), version in process of validation for the Portuguese population, and the Buss-Perry Aggression Questionnaire (QA). The sample was constituted by 1061 subjects, which reduced to 947 individuals after exclusion criteria were applied, of which 65.8% were females, aged 18 to 80 years (M = 29.08, SD = 12.034). The results indicate that 67.9% of the participants scored above the theoretical median in the HSPS, and 8.3% showed scores above the theoretical median in the QA. The female gender has higher results in HSPS and in anger (QA). The male gender presents higher results in the physical aggression (QA). Participants aged 23 or under present prominent results in QA (total score), physical aggression (QA) and hostility (QA). The results show that higher levels of SPS are associated with higher levels of aggression, specifically in females and in participants aged 24-59 years, with higher levels of SPS being associated with higher levels of hostility (QA), and that higher levels of HSPS are associated with higher levels of aggression (total QA score) and hostility (QA). The final considerations demonstrated the main contributions of the present investigation, as well as some of its limitations, indicating suggestions for future studies

Efeitos a curto e a longo prazo do treino vibratório na funcionalidade de um paciente de AVE: estudo de caso

Projeto de Graduação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Licenciada em FisioterapiaIntrodução: O acidente vascular encefálico (AVE) ocorre devido a uma diminuição ou interrupção do fluxo sanguíneo em determinada área do encéfalo provocando défices neurológicos, bem como alterações no equilíbrio e funcionalidade dos pacientes. Objetivo: Testar os efeitos a curto e a longo prazo do treino vibratório, na funcionalidade de um paciente com sequelas de AVE. Metodologia: Foram efetuadas 10 sessões de treino vibratório num paciente com 71 anos e com diagnóstico de sequelas de AVE. Foram aplicados os seguintes testes: Escala de Equilíbrio de Berg; Wolf Motor Function Test; Timed Up and Go; Escala de Ashworth Modificada. Avaliou-se ainda amplitudes articulas de alguns movimentos das seguintes articulações: ombro; cotovelo; punho; coxa; joelho; pé. Resultados: Registaram-se melhorias no equilíbrio, na velocidade da marcha, na funcionalidade do membro superior e em certas amplitudes articulares. A espasticidade melhorou no membro superior, não sofrendo alterações no membro inferior. Conclusão: O treino vibratório parece trazer vantagens para a funcionalidade e independência de um paciente com AVE.Introduction: A stroke occurs due to a decrease or interruption of the blood flow in a certain part of the encephalon causing neurological damage as well as changes on balance and motor function. Objective: To evaluate the short and long term effects of vibration training on motor function of a patient with sequelae of a stroke. Methodology: 10 vibration-training sessions were performed with a 71 years old patient with sequelae of a stroke. The following tests were made: Berg Balance Scale; Wolf Motor Function Test; Timed Up and Go; Modified Ashworth Scale. It was also assessed the amplitude of the following joints: shoulder, elbow, wrist, thigh, knee and foot. Results: We observed improvements on balance, walking speed, upper limb motor function and in certain joint movements. Spasticity improved on the upper limb and kept even on the lower limb. Conclusion: Vibration trainings seem to bring benefits to motor function and independence of a patient with sequelae of a stroke.N/

Desenvolvimento de uma loja online para comércio de cosméticos exclusivos do canal farmácia

A presente tese de mestrado é um projeto em cooperação com a Farmácia Central do Cartaxo, que opera através de um único canal de venda física direta ao cliente final, e tem como objetivo criar um canal de venda (loja online) alternativo de produtos de beleza e bem-estar, que permita atingir mercados de e-commerce emergentes e com elevada expressão global, alavancando o negócio online através da internacionalização com o consequente aumento do volume de vendas. No caso do sector farmacêutico português, o e-commerce ainda é uma realidade com pouca expressão, pois a rede de farmácias existente tem apenas loja física (maioria) ou tem em alternativa e adicionalmente uma loja online que serve apenas o mercado doméstico e que na essência existe para entregas nas zonas onde a farmácia está estabelecida. A área da cosmética que é a categoria a par dos suplementos alimentares onde o e-commerce já tem algum peso, é sobretudo onde já se estão a perder algumas oportunidades. Foi feita uma revisão de literatura a par de uma contextualização com foco no mercado específico da dermofarmácia em Portugal, China e EUA, que permitiu compreender as especificidades do projeto, bem como retirar conclusões aplicáveis à implementação do mesmo, resultando numa proposta para a criação de uma loja online que visa diversificar as operações como estratégia para aumento do volume de vendas da empresa, oferecendo aos clientes um portfolio de produtos indissociáveis de um serviço de excelência, que acompanhe as tendências internacionais de e-commerce na área da saúde e bem-estar.This Master's thesis is a project in cooperation with the Central Pharmacy of Cartaxo, which operates through a single physical sales channel to the final customer, and which aims to create an alternative sales channel (online store) for beauty and well-being products, which allows it to reach emerging ecommerce markets with high global expression, leveraging the online business through internationalization with the consequent increase in volume of sales. In the case of the Portuguese pharmaceutical sector, e-commerce is still a reality with little expression, since the existing pharmacy network has only a physical store (most) or alternatively and additionally an online store that serves only the domestic market and essence exists for deliveries to areas where the pharmacy is established. The area of cosmetics, which is the category alongside food supplements where e-commerce already has some weight, is mainly where some opportunities are already being lost. A literature review was carried out alongside a contextualization focused on the specific dermopharmacy market in Portugal, China and the USA, which made it possible to understand the specifics of the project, as well as draw conclusions applicable to its implementation, resulting in a proposal for the creation of an online store that aims to diversify operations as a strategy to increase the company's sales volume, offering customers a portfolio of products that is linked to an excellent service, which follows international e-commerce trends in the area of health and well-being

O papel da Bioimpedância Torácica na caracterização do doente em fase aguda de AVC isquémico da circulação anterior

INTRODUÇÃO: A cardiografia de impedância é um método de determinação de parâmetros hemodinâmicos fiável, rápido, não invasivo e de baixo custo. O acidente vascular cerebral representa, mundialmente, uma das principais causas de morbimortalidade. OBJETIVO: Caracterizar as diferenças no perfil hemodinâmico na fase aguda do acidente vascular isquémico da circulação anterior utilizando a cardiografia de impedância para análise de variáveis hemodinâmicas, nomeadamente os indicadores de contractilidade e trabalho cardíaco, de resistência vascular periférica e de volémia torácica. METODOLOGIA E MATERIAL: Estudo observacional e transversal, de casos e controlos. Os parâmetros em estudo foram determinados através do dispositivo modular HOTMAN System for Adults w/ EXT-TEBCO®. Foi feita uma análise descritiva e os testes t student, McNemar e o coeficiente de correlação de Spearman foram usados para quantificar e caracterizar as diferenças entre as fases em estudo. Foi considerado um nível de significância de 5% para todos os testes de hipótese. [...]BACKGROUND: Impedance Cardiography is an accurate, reliable, easy-to-use, noninvasive and inexpensive diagnostic method for hemodynamic parameters determination. Ischemic stroke is one of the major causes of morbimortality worldwide. OBJECTIVE: Characterize anterior circulation ischemic stroke acute phase hemodynamic profile differences using impedance cardiography to analyze hemodynamic variables namely contractility and cardiac work index, peripheral vascular resistance and thoracic volume. METHODS AND MATERIALS: Case-control, transversal, observational study. Modular device HOTMAN System for Adults w/ EXT-TEBCO® was used to determinate cardiac parameters. Descriptive analysis, student t test, McNemar test and Spearman correlation coefficient were used to quantify and characterize differences between study phase's. A 5% significance level was considered. [...

Relatório de estágio de clínica e cirurgia de animais de companhia: relatório de estágio de dominio fundamental

(Introdução) O presente relatório foi elaborado na sequência do estágio de domínio fundamental do Mestrado Integrado em Medicina Veterinária da Universidade de Évora. O estágio realizou-se no Hospital Veterinário Muralha de Évora (HVME) no período de 1 de Novembro de 2009 a 31 de Março de 2010, com a duração total de cinco meses, sob a orientação da Dra. Maria d’Aires Machado Pereira. A realização do estágio teve como principais objectivos o contacto com a realidade profissional de clínica e cirurgia de animais de companhia, assim como completar a formação académica adquirida ao longo do curso e transpor essa formação para a aplicação prática. Pela quantidade e diversidade de procedimentos que me foi permitido realizar considero que o estágio no HVME permitiu alcançar os objectivos propostos. O relatório encontra-se dividido em duas partes

Addition of a histone deacetylase inhibitor increases recombinant protein expression in Medicago truncatula cell cultures

Plant cell cultures are an attractive platform for the production of recombinant proteins. A major drawback, hindering the establishment of plant cell suspensions as an industrial platform, is the low product yield obtained thus far. Histone acetylation is associated with increased transcription levels, therefore it is expected that the use of histone deacetylase inhibitors would result in an increase in mRNA and protein levels. Here, this hypothesis was tested by adding a histone deacetylase inhibitor, suberanilohydroxamic acid (SAHA), to a cell line of the model legume Medicago truncatula expressing a recombinant human protein. Histone deacetylase inhibition by SAHA and histone acetylation levels were studied, and the effect of SAHA on gene expression and recombinant protein levels was assessed by digital PCR. SAHA addition effectively inhibited histone deacetylase activity resulting in increased histone acetylation. Higher levels of transgene expression and accumulation of the associated protein were observed. This is the first report describing histone deacetylase inhibitors as inducers of recombinant protein expression in plant cell suspensions as well as the use of digital PCR in these biological systems. This study paves the way for employing epigenetic strategies to improve the final yields of recombinant proteins produced by plant cell cultures.publishersversionpublishe