SELEÇÃO DE PRIMERS ISSR PARA ANÁLISES DE DIVERSIDADE GENÉTICA EM Plathymenia reticulata Benth

O objetivo deste trabalho foi selecionar primers ISSR para serem utilizados em futuras análises de diversidade genética em populações naturais de P. reticulata. Amostras foliares de cinco indivíduos da espécie foram coletadas para extração e purificação de DNA. O DNA obtido das amostras foi submetido a ensaios de PCR utilizando 28 primers, seguida de eletroforese em gel de agarose para análise dos fragmentos amplificados. Foram selecionados 10 primers por possuírem número considerado de locos e boa definição dos fragmentos. Os primers selecionados geraram ao todo 121 fragmentos amplificados, sendo 54 polimórficos. Os marcadores moleculares ISSR utilizados nesse estudo permitiram revelar o polimorfismo em Vinhático, indicando que a utilização de 10 primers (44,62% de polimorfismo) são suficientes para quantificar em estudos futuros a diversidade genética existente em indivíduos de P. reticulata

SELEÇÃO DE MARCADORES ISSR PARA Schizolobium parahyba var. amazonicum (Huber ex. Ducke) Barneby

O objetivo deste trabalho foi selecionar primers ISSR para serem utilizados em futuras análises de diversidade genética em população de S. amazonicum, conhecido popularmente como Paricá. Para isto, foram utilizadas folhas coletadas em 5 indivíduos da espécie em estudo, para a realização da extração e purificação do DNA genômico. Posteriormente, as amostras de DNA foram submetidas a ensaios de PCR utilizando 43 primers, seguida por eletroforese em gel de agarose, de modo a permitir a avaliação e seleção dos primers com maior qualidade de amplificação. Foram selecionados 11 primers por possuírem número considerável de locos polimórficos, além de serem nítidos e bem definidos. Os primers selecionados geraram 129 fragmentos, demonstrando que a quantidade de marcadores moleculares ISSR utilizados neste estudo são suficientes para quantificar a diversidade genética em futuros trabalhos com populações da espécie

AVALIAÇÃO DE MÉTODOS PARA ARMAZENAMENTO DE TECIDOS FOLIARES E OBTENÇÃO DE DNA EM CINCO ESPÉCIES DE BROMELIACEAE

Realizaram-se testes comparativos utilizando diferentes metodologias de conservação de material foliar coletado de cinco espécies de Bromeliaceae, visando a obtenção de DNA de alta qualidade que possibilitasse estudos com marcadores moleculares. A qualidade do DNA extraído foi avaliada através de dois métodos: análise da pureza e quantificação em NanoDrop® por e ensaios utilizando três marcadores ISSR. Os resultados revelaram que, todos os métodos disponibilizaram material de qualidade. Entretanto, a obtenção de macerado a partir de folhas de Bromeliaceae liofilizadas demandam de tempo e esforço por parte do manipulador, sendo indicada a aplicação de metodologias de congelamento com nitrogênio líquido, uma vez que produz material de boa qualidade possibilitando a obtenção de resultados nítidos na técnica de eletroforese