Bacillus thuringiensis에서 분리된 새로운 독소단백질 유전자 및 포자형성 조절 유전자에 관한 연구

Thesis (doctoral)--서울대학교 대학원 :생명과학부,2001.Docto

Genome editing 기술을 이용한 Bacillus균 시스템 재설계 기술 개발

Genome editing 기술을 이용한 Bacillus균 시스템 재설계 기술 개발PRM102201

A method for tunable control of protein expression

본 발명은 목적단백질의 발현 양상을 미세하게 조절하기 위한, 목적단백질 발현 양상을 나타내는 프로모터, 3의 배수로 도입된 랜덤 염기서열, 및 목적단백질-코딩 뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터; 상기 벡터를 이용하여 생산되는 목적단백질의 발현량과의 관계를 수집하여 목적단백질 발현 양상을 조절할 수 있는 도입된 랜덤 염기서열의 정보 제공방법; 및 상기 벡터를 이용하는 목적단백질의 생산방법에 관한 것이다. 본 발명의 프로모터, 목적단백질-코딩 뉴클레오티드 서열 및 상기 목적단백질-코딩 뉴클레오티드 서열의 개시코돈으로 전사되는 제1 서브뉴클레오티드 서열과 두 번째 코돈으로 전사되는 제2 서브뉴클레오티드 서열 사이에 추가적으로 도입된 3의 배수의 랜덤 염기서열을 포함하는 벡터를 이용하여 목적단백질 발현 양상을 조절할 수 있고, 염기서열 분석을 이용하여 목적단백질의 발현 양상과 상기 도입된 염기서열의 관계를 정립할 수 있다. 이때, 추가적으로 도입되는 염기서열은 3의 배수로 하여 개시코돈 뒤에 도입함으로 목적단백질 유전자 업스트림의 변화없이 목적단백질의 발현량을 조절할 수 있다.open국

Lysin enzyme variant having improved bacteriolytic or antibacterial activity

본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열 중 66번째, 74번째, 81번째, 94번째, 112번째, 177번째, 193번째 또는 204번째 아미노산 중 어느 하나 이상의 아미노산이 치환된 것을 특징으로 하는 병원성 세균에 대한 용균 또는 항균 능력이 개선된 리신 효소 변이체 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명의 리신 변이체는 약학 조성물, 소독제, 항생제 및 항균제로 광범위하게 활용될 수 있으므로, 산업적으로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 판단된다.open국

엄격하게 조절되는 프로모터 변이체 및 이를 이용한 단백질 생산 방법

국

Variant Promoter of Biacillus and Method for Preparing Protein Using the Same

본 발명은 바실러스 유래 목적유전자 발현 증진용 프로모터 변이체 및 그 용도에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 바실러스 츄린겐시스(Bacillus thuringiensis) 유래 Cry3Aa 프로모터를 포함하고, 상기 Cry3Aa 프로모터 -35 부위의 상위(upstream) 영역에 바실러스 서틸리스 (Bacillus subtilis) 유래의 aprE 프로모터 또는 바실러스 서틸리스 (Bacillus subtilis) 유래 rapA 프로모터를 포함하는 목적유전자 발현 증진용 프로모터 변이체 및 그 용도에 관한 것이다. 본 발명 목적유전자 발현 증진용 프로모터 변이체는 바실러스 균주에서 목적 단백질의 발현을 현저히 증진시킬 수 있어, 단백질, 폴리펩티드 약물과 같은 목적단백질의 대량생산을 통해 생명공학, 의학뿐만 아니라 산업적으로 유용한 단백질의 생산에 효과적으로 사용될 수 있다.open국

NOVEL NUCLEIC ACIDS FOR ENHANCING GENE EXPRESSIONS AND A METHOD FOR PROTEIN PRODUCTION USING THE SAME

본 발명은 유전자 발현을 증대시키는 신규한 stab 핵산분자에 관한 것으로서, 상기 stab 핵산분자는 프로모터와 목적유전자 사이에 포함됨으로써 다운스트림 (downstream) 목적유전자의 발현율을 증대시킬 수 있다. 보다 구체적으로,본 발명은 바실러스 츄린겐시스 (Bacillus thuringiensis)의 cry3Ba 유전자의 업스트림 (upstream)에 존재하는 신규한 stab 핵산분자, 및 상기 핵산분자의 3' 말단에 cry3Ba 구조유전자의 5' 말단의 핵산분자가 연결된 신규한 stab핵산분자에 관한 것이다. 또한,본 발명은 상기 stab 핵산분자를 포함하는 벡터, 상기 벡터를 포함하는 숙주세포, 및 상기 숙주세포로부터 목적 단백질을 생산하는 방법에 관한 것이다.국

Method for producing active inclusion body using PoxB gene

본 발명은 목적 단백질의 활성 인클루젼 바디를 생산하기 위한, PoxB 유전자 및 목적 단백질을 코딩하는 유전자를 결합시킨 융합 유전자, 상기 융합 유전자가 코딩하는 융합 단백질, 상기 융합 유전자를 포함하는 발현벡터, 상기 발현벡터가 숙주세포에 형질전환된 형질전환체, 및 상기 PoxB 유전자를 이용하여 목적 단백질의 활성 인클루젼 바디를 생산하는 단계를 포함하는 목적 단백질의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따라 생산된 활성 인클루젼 바디는 별도의 과정없이 단백질의 활성을 나타내므로, 효소반응이 필요한 산업공정에서 효소 생산, 분리 정제 및 효소 고정화의 단계가 필요없어, 효소를 이용하는 공정에서 비용을 절감할 수 있고, 고정화 과정에서 효소 활성이 급격히 감소하는 단점을 보완할 수 있으며, 발현된 단백질의 순수 분리가 용이하다.ope