Cyclin B1 mRNA의 중심체 상 국소 분포 및 폴리아데닐화에 의한 단백질 발현 조절

Thesis(masters) --서울대학교 대학원 :협동과정뇌과학전공,2009.2.Maste

구매의 시대와 정보주도형 계열 시스템의 확산 -자동차산업을 중심으로-

1999-12미국 자동차 빅3를 중심으로 자동차산업의 표준화를 추진하고 있는 미국AIAG(Automotive Industry Action Group)는 업계표준망인 ANX(Automotive Network Exchange)의 구축을 추진하고 있다. 이미 AIAG에는 4,000개 기업이 협력의사를 표명한 상태이며 2000년내에는 미국에서 자동차 산업의 모든 거래가 ANX를 기본으로 이행할 것으로 예상되고 있다. 또한 ANX는 세계의 모든 자동차업계를 네트워크로 연결할 것으로 기대되고 있다. 빅3의 계획은 21세기의 계열 시스템으로 표현되고 있다. 90년대 들어 일본의 생산방식을 배우면서 부활한 빅3는 지금 인터넷이라는 새로운 수단을 사용해 새로운계열 게다가 일본보다 훨씬 효율적이고 비용도 적게드는 구조를 구축하고 있다

선천성 발프로산 노출 자폐증 흰쥐 모델에서 텔로머라아제 역전사효소에 의해 유도되는 흥분성 신경세포로의 분화 기전 규명

Autism spectrum disorder (ASD) is a kind of pervasive developmental disorder, and characterized by three main behavioral features including social deficits, impaired communication, and stereotyped and repetitive behaviors. The brain of ASD patients has been characterized with specific features including macrocephaly, imbalanced signal between excitation and inhibition, synaptic abnormalities and so on. Among these features, imbalanced excitatory/inhibitory signal in the autistic brain has been recently magnified as a main cause of ASD symptoms. However, mechanism governing the increased excitatory synaptic activity is unclear yet. Because excitatory/inhibitory imbalance in brain can be induced by aberration in glutamatergic/GABAergic neuronal differentiation, the mechanism of excess excitatory neuronal differentiation was investigated in an animal model of ASD induced by prenatal valproate (VPA) exposure, which may produce symptoms like autistic disorders including skeletal malformation, neural tube defects, and several behavioral abnormalities both in human and rodents. Although exposure to VPA at E9.5 showed strong reproductive toxicity, VPA exposure at E12 showed no major reproductive toxicity but most significant changes in behaviors over control animals with reduced sociability and social preference as well as increased sensitivity to electroshock convulsion. In addition to the altered social behavior, VPA exposure induced increased glutamatergic neuronal differentiation in postnatal brains as exemplified by immunostaining and Western blot using specific marker proteins including PSD-95. Similar finding was observed with primary neural progenitor cell culture treated with VPA in vitro. Expression of transcription factors, which has been implicated in glutamatergic neuronal differentiation, i.e., Pax6, Ngn2, and NeuroD1 was increased in VPA-exposed embryonic brains as well as neural progenitor culture in vitro. When we silenced the expression of Pax6 using siRNA transfection in cultured rat primary neural progenitor cells, VPA induced neither expression of Ngn2 and NeuroD1 nor glutamatergic hyper-differentiation suggesting the essential role of Pax6 induction in this process. The expression of telomerase reverse transcriptase (TERT), that elongates telomere and recently known as a transcription factor interacting with Brg1, was increased by VPA. The binding of TERT protein on Pax6 gene promoter was demonstrated by chromatin immunoprecipitation using anti-TERT antibody, which suggests the possible role of TERT in inducing Pax6 expression. Silence of TERT expression using siRNA transfection in vitro inhibited VPA-induced expression of Pax6, Ngn2 and NeuroD1 as well as excess glutamatergic differentiation. Over-expression of TERT protein using hTERT-GFP plasmid transfection in vitro activated glutamatergic neuronal differentiation by inducing expression of Pax6, Ngn2 and NeuroD1. These results suggest that glutamatergic neuronal differentiation is increased in the VPA-induced autistic animal model and TERT over-expression induces sequential increase of Pax6, Ngn2 and NeuroD1 leading to the increased excitatory neuronal maturation. The results from the present study may provide further insights into the molecular basis of increased excitability observed in autistic individuals.자폐 범주성 장애는 전반적 발달장애의 일종으로, 세 가지 주요 행동학적 증상인 사회성 부재, 의사소툥능력의 부재, 제한적이고 반복적인 행동 양상을 특징으로 한다. 자폐증 환자의 뇌는 대두증, 흥분성 신호와 억제성 신호 간의 불균형, 시냅스 형성 이상 등과 같은 특징을 보인다. 이러한 특징 중에서, 뇌 내 신호 불균형은 최근에 자폐성 행동의 주요 원인으로 대두되고 있다. 흥분성 신호전달을 증가시키는 기전은 아직 명확하지 않지만, 이러한 뇌 내의 흥분성/억제성 불균형은 흥분성 신경세포와 억제성 신경세포의 분화 이상으로 인해 야기될 수 있으며, 본 연구에서는 선천성 발프로산 노출을 통해 유도한 자폐증 동물 모델을 사용하여 과도한 흥분성 신경 분화 기전을 연구하였다. 선천성 발프로산 노출은 사람과 설치류에서 골격계 형성의 이상, 신경관 결손과 더불어 자폐증 증상와 깊게 관련된 여러 행동학적 이상을 야기하며, 이를 통해 자폐증의 동물 모델로 널리 사용되고 있다. 임신 9.5일 발프로산 노출은 높은 생식독성을 보였으나, 임신 12일에 발프로산에 노출된 흰쥐는 과도한 생식독성이 유발되지 않은 상태에서, 대조군에 비해 사회성 및 처음 접하는 흰쥐에 대한 호기심이 크게 감소하며, 전기자극으로 유도한 간질에 보다 민감함을 나타내는 등 사람의 자폐증과 유사한 증상을 나타내었다. 사회적 행동 양상 변화와 더불어, 발프로산 노출은 흥분성 신경세포 분화를 증가시켰으며, 이를 표지자인 PSD-95 등을 이용한 면역화학적 염색과 Western blot을 통해 관찰하였다. 흰쥐 일차 배양 신경줄기세포에 발프로산을 in vitro 처치하였을 경우에도 유사한 결과를 관찰하였다. 흥분성 신경세포 분화에 관여하는 것으로 알려진 전사인자인 Pax6, Ngn2 및 NeuroD1의 발현이 임신 중 발프로산에 노출된 흰쥐 배아 뇌조직과 in vitro 경로를 통해 발프로산에 노출된 신경줄기세포에서 모두 증가되었다. 흰쥐 일차 배양 신경줄기세포에서 siRNA를 이용하여 Pax6의 발현을 억제하였을 때, 발프로산에 의한 Ngn2, NeuroD1의 발현 증가 및 과도한 흥분성 신경세포 분화가 일어나지 않았다. 이를 통해 발프로산에 의한 흥분성 신경세포 분화 증가에 있어서 Pax6가 중요한 역할을 수행함을 확인하였다. 텔로머라아제 역전사효소의 발현 또한 발프로산 노출에 의해 증가하는데, 텔로머라아제 역전사효소의 일반적인 역할은 세포 분열 시 짧아지는 텔로미어의 길이를 늘리는 것이다. 하지만 최근에, 염색질 개조 단백질의 일종인 Brg1과 직접 결합하여 전사인자로서 역할을 수행함이 새롭게 밝혀졌다. 이에 기반하여, 텔로머라아제 역전사효소가 전사인자로서 Pax6의 발현을 직접적으로 증가시키는지에 대해 연구하였다. 텔로머라아제 역전사효소는 Pax6 유전자에 직접 결합하여 Pax6 mRNA 및 단백질의 발현을 증가시키고 흥분성 신경세포로의 분화를 증가시킨다. 흰쥐 일차 배양 신경줄기세포에서 siRNA를 이용하여 텔로머라아제 역전사효소의 발현을 억제하였을 때, 발프로산에 의한 Pax6, Ngn2, NeuroD1의 발현 증가와 과도한 흥분성 신경세포 분화가 감소함을 관찰하였다. 녹색 형광 단백이 붙은 사람 유래 텔로머라아제 역전사효소 플라스미드를 이용해 텔로머라아제 역전사효소 단백질의 발현을 증가시킨 결과, Pax6, Ngn2, NeuroD1 발현 증가를 통해 흥분성 신경세포로의 분화가 증가함을 관찰하였다. 이러한 결과를 종합했을 때, 발프로산으로 유도한 자폐증 동물 모델에서 흥분성 신경세포로의 분화가 증가되어 있으며, 과발현된 텔로머라아제 역전사효소는 Pax6, Ngn2, NeuroD1 전사인자들의 순차적인 발현 증가를 일으켜 흥분성 신경세포 과생성을 유도함을 알 수 있다. 이는 자폐증 환자에서 나타나는 흥분성 관련 사회적 이상 행동의 분자생물학적 이해를 돕는데 크게 기여할 것으로 사료된다.Docto

자동차부품소싱에 있어서 정보네트워크 효과에 관한 시뮬레이션연구

1999-09수많은 부품업체가 물리적으로 네트워크화되어 있는 자동차산업에 있어서 소싱(sourcing)은 누구보다 저렴하고 보다 빠르고 정확하게 공급시스템을 구축하느냐가 경쟁력의 핵심원천이 되고 있다. 이를 위해 일찍이 자동차산업내에는 일본자동차업체들이 주도한 JIT시스템과 간반시스템 등이 세계적으로 확산 보급되어 왔다. 최근에는 이러한 자동차산업의 물리적연결행태를 첨단의 정보기술(information technology)을 이용하여 전자적으로 연결하는 수단이 확산되고 있다. 이른바 EDI, CALS/EC와 같은 정보네트워크화이다. 자동차산업내 이러한 전자적 연결은 산업내 네트워크 효율성을 통해 재고감축에 의한 비용감소효과뿐만 아니라 연결의 스피드제고에 의한 효과가 나타나고 있다. 미국의 경우 자동차 빅3를 중심으로 AIAG(Automotive Industry Action Group)가 자동차업계표준망인 ANX(Automotive Network Exchange)의 구축을 추진하고 있으며 200년 내에는 미국에서 자동차산업의 모든 거래가 ANX를 기본으로 이행할 것으로 예측되고 있다. 일본의 경우에는 통산성이 중심이 되어 자동차메이커와 공동으로 표준화된 정보인프라를 구축하기 위해 일본판 anx를 검토하고 있다. 또한 일본자동차공업협회(JAMA)는 1995년 이후 V-CALS를 추진하고 있다. 우리나라의 경우도 한국자동차공업협회(KAMA)에서 1998년 10월부터 CALS/EC를 추진하기 위해 컨소시움을 준비하고 있으며 자동차산업내 오토피아(AUTOPIA)를 통해 전자적 연결을 시도하고 있다

덕양산업 -100PPM을 추구하는 품질경영혁신-

만의 하나도 허용할 수 없습니다 지금 우리에게는 만의 하나라도 있어서는 안되는 일이 일어난겁니다. 시련이었다. 1994년, 덕양산업이 제공하는 자동차부품인 크리쉬패드가 현대자동차가 공급업체를 대상으로 선정하는 내장재 불량 톱-10에 든 것이었다. 검사과정이 육안검사, 필핑검사여서 판정이 주관적일 수밖에 없는 내장재이므로 판정결과가 애매하다고 항의했지만 판정은 판정이었다. 1990년 10월 공업진흥청 품질관리 1등급 업체지정, 1991년 7월 공업진흥청 품질관리 선도기업으로 지정되었던 자존심이 무너지는 위기였다. 덕양산업 본사 회의실, 윤주원 회장과 황춘택 사장이하 회사의 주요간부들이 모인 자리에서 대책논의가 진행되었다. 윤주원 회장은 잠시 생각에 빠진후 말문을 열었다

자동차부품업체의 부품개발 및 설계활동참가와 승인도방식도입 -자주적설계능력배양에 의한 승인도방식으로 발전가설에 관한 실증적 연구-

1997-1