利用人工氧还酶体系催化L-苹果酸氧化脱羧反应

利用含人工氧还酶体系的粗酶液代替纯酶催化反应,以省去酶分离纯化过程.由苹果酸酶突变体ME-t（MEL310R/Q401C）和非天然辅酶烟酰胺5-氟胞嘧啶二核苷酸（NFCD＋）组成的人工氧还酶体系可以催化氧化L-苹果酸生成丙酮酸,并得到非天然辅酶的还原态（NFCDH）.利用含人工氧还酶体系的粗酶液催化反应,只得到单一产物丙酮酸,其选择性与纯酶催化的相同.来自粪肠球菌Enterococcus faecalis的NADH氧化酶（NOX）可再生NFCD＋.与含NAD＋,ME粗酶液和NOX粗酶液的偶联反应体系相比,含NFCD＋,ME-t粗酶液和NOX粗酶液的体系获得的丙酮酸产率高9%,而副产物乳酸明显减少.可见人工氧还酶体系使用更方便,且产物选择性更高,有望代替纯酶催化反应.这为降低生物催化剂的成本,扩大生物催化反应的应用提供了一种新的策略

利用人工氧还酶体系催化L-苹果酸氧化脱羧反应

利用含人工氧还酶体系的粗酶液代替纯酶催化反应,以省去酶分离纯化过程.由苹果酸酶突变体ME-t（MEL310R/Q401C）和非天然辅酶烟酰胺5-氟胞嘧啶二核苷酸（NFCD＋）组成的人工氧还酶体系可以催化氧化L-苹果酸生成丙酮酸,并得到非天然辅酶的还原态（NFCDH）.利用含人工氧还酶体系的粗酶液催化反应,只得到单一产物丙酮酸,其选择性与纯酶催化的相同.来自粪肠球菌Enterococcus faecalis的NADH氧化酶（NOX）可再生NFCD＋.与含NAD＋,ME粗酶液和NOX粗酶液的偶联反应体系相比,含NFCD＋,ME-t粗酶液和NOX粗酶液的体系获得的丙酮酸产率高9%,而副产物乳酸明显减少.可见人工氧还酶体系使用更方便,且产物选择性更高,有望代替纯酶催化反应.这为降低生物催化剂的成本,扩大生物催化反应的应用提供了一种新的策略