PT109改善链脲佐菌素诱导的散发性阿尔茨海默病小鼠认知功能障碍的作用及机制

目的观察PT109能否改善侧脑室注射链脲佐菌素（icv-STZ）诱导的散发性AD小鼠模型的认知功能障碍并对其机制进行初步探讨。方法32只7周龄雄性C57BL/6小鼠分为正常组（7只）、模型组（7只）、PT109低剂量组（9只）、PT109高剂量组（9只）。将STZ于第1和3天注射入小鼠侧脑室建立散发性阿尔茨海默病小鼠模型；（3mg/kg，每个注射位点5μL）造模后，分别腹腔注射PT109（30、100 mg·kg-1·d-1），2周后通过Morris水迷宫和避暗实验评价小鼠学习记忆能力；随后通过免疫荧光、免疫组化、免疫印迹、高尔基染色等方法检测小胶质细胞、神经元、树突棘、磷酸化Tau蛋白等AD相关指标。结果行为学实验结果显示：PT109可改善icv-STZ小鼠的学习记忆障碍；免疫荧光及组化结果显示：与模型组相比，PT109减少海马区域Iba1阳性细胞数量（低剂量：P <0.001， 高剂量：P <0.001），高剂量PT109增加海马和皮层区域MAP2和Tuj1阳性细胞总数量（P <0.05， P <0.01），差异具有统计学意义。高尔基染色结果显示：与模型组相比，PT109增加树突棘密度（低剂量：P <0.001， 高剂量：P <0.001），差异具有统计学意义。免疫印迹实验结果表明：与模型组相比，PT109降低NLRP3（高剂量：P <0.05）、磷酸化Tau蛋白的表达水平（低剂量：P <0.05， 高剂量：P <0.01），高剂量PT109提高PSD95（P <0.05）、磷酸化GSK3β（P <0.05）的表达水平，差异具有统计学差异。结论PT109可改善icv-STZ诱导的小鼠学习记忆障碍，可能与调节GSK3β/Tau相关通路有关

丙烯醛体内外诱导神经元铁死亡的初步研究

目的探究丙烯醛是否能够诱发体内外发生铁死亡现象。方法体外：给予小鼠海马神经元细胞系HT22细胞丙烯醛进行造模，采用铁死亡抑制剂铁抑素-1（Fer-1）与去铁胺（DFO）进行保护。MTT法检测细胞存活率；自由基探针二氢乙啶（DHE）与亚铁探针FerroOrange检测细胞内自由基与亚铁离子含量；透射电镜观察正常与模型组的线粒体超微形态与结构；Western blot法检测铁死亡相关蛋白表达的情况。体内：雄性C57BL/6小鼠，7~8周龄每日给予3 mg/kg的丙烯醛分别进行造模1、2、4周，并对海马区域进行Western blot法检测铁死亡相关蛋白表达的情况。结果丙烯醛显著降低HT22细胞的存活率，并诱导线粒体皱缩和嵴数目减少。同时丙烯醛可显著增加细胞内自由基与亚铁离子。此外，在细胞水平丙烯醛促进环氧化酶2（COX-2）、铁蛋白重链1（FTH1）表达上升，谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）表达减少；在动物水平丙烯醛促进COX-2表达上升，GPX4、FTH1表达减少。结论丙烯醛可在体内外诱导神经元发生铁死亡现象，提示铁死亡抑制剂可以用来缓解与丙烯醛有关的中枢神经系统疾病，如阿尔兹海默病

铜对低钾诱导大鼠小脑颗粒神经元凋亡的保护作用

【目的】探讨铜体外抗低钾诱导大鼠小脑颗粒神经元（CGNs）凋亡作用及其机制。【方法】体外培养乳鼠的CGNs并用去极化诱导凋亡模型；噻唑兰（MTT）法检测细胞存活率；相差显微镜及Hoechst 33258染色分别观察细胞及其核形态学变化；流式细胞仪（FCM）检测亚二倍体峰。【结果】1~40 μmol/L的铜可抗低钾所致的大鼠CGNs凋亡，明显提高CGNs的存活率。铜（20 μmol/L）显著减少低钾所致的大鼠CGNs胞体皱缩、细胞核固缩和亚二倍体峰等凋亡特征。铜的神经保护作用可以持续72 h以上。磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinane，PI3-K）抑制剂LY294002可阻断铜的保护作用。【结论】首次发现，一定浓度范围的铜对低钾所致的大鼠CGNs凋亡有保护作用，PI3-K/ Akt信号传导通路可能参与其保护作用