糖基化蛋白质组分析新技术新方法研究

蛋白质的糖基化与细胞粘附、信号转导、免疫及肿瘤发生等诸多生命过程密切相关，对糖基化蛋白质组学的研究具有极其重要的意义。 本研究以N，N-亚甲基双丙烯酰胺（MBAAm）、甲基丙烯酸（MAA）和4-乙烯基苯硼酸（VPBA）为共聚单体，采用蒸馏沉淀聚合法制备了一种poly(MBAAm-co-MAA)@VPBA核壳结构硼亲和纳米颗粒，实现了糖基化肽段的选择性富集。该材料具有制备简便、糖肽富集效果好、重现性好等优点。 以VPBA为功能单体，MBAAm为亲水性交联剂，通过“一锅多步法”，制备了poly(MBAAm-co-VPBA)@VPBA核壳结构硼亲和纳米颗粒。该材料制备及使用过程简单、快速，且具有亲水性好、富集容量高、回收率高等特点。 将亲水作用色谱（HILIC）微柱和PNGase F固定化酶反应器（IMER）在线联用，并采用强阳离子交换（SCX）预柱作为溶剂置换接口，构建了新型HILIC-SCX-PNGase F IMER集成化N-糖肽预处理平台。同传统的离线方法相比，该平台具有灵敏度高、重现性好及分析通量高等特点。 基于二甲基化和PNGase F IMER固相18O串联同位素标记策略，发展了新型N-糖基化差异蛋白质组定量分析方法。该方法克服了传统自由溶液串联18O标记策略的局限，具有标记效率高、副反应少、准确性及重现性好等特点，有望为揭示肿瘤高低转移机理，筛选和发现潜在诊断标记物和药靶提供重要技术支撑

Preparation of epitope imprinted polyethersulfone particles through self-assembly for protein recognition

Preparation of epitope imprinted polyethersulfone particles through self-assembly for protein recognitio

一种有机无机杂化微球颗粒及其制备和应用

本发明属于聚合物材料和分析技术领域，涉及一种单分散有机无机杂化核壳结构的微球颗粒及其制备和应用。以无机硅胶颗粒为核，之后通过修饰上硅烷化试剂，然后通过硫醇-烯的点击化学技术在核表面包裹3-丙烯酰胺基苯硼酸与多烯类交联单体，形成表面光滑且带有硼酸功能基团的有机无机杂化的核壳结构纳/微米粒子。本发明在材料表面通过硫醇-烯方法引入苯硼酸功能基团，不仅克服了传统后修饰方法步骤繁琐、反应效率低的缺点，而且使得APBA能够更稳定聚合，提高表面硼酸的键合量以及材料的亲水性减少对蛋白的非特异性吸附。本发明的微球颗粒可用于分离或富集带有1,2-顺式二醇结构的糖蛋白，在蛋白质组学等领域有较好的实用价值和应用前景

聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性和芯片生物分析技术用于渤海地区鱼种鉴定

以渤海湾具有重要商业价值的9种海鱼（小黄鱼、花鲈、蓝点马鲛、鲐、钝吻黄盖鲽、棘头梅童鱼、许氏平鲉、高眼鲽和长蛇鲻）为研究对象,利用聚合酶链式反应（PCR）-限制性片段长度多态性（RFLP）和芯片生物分析技术对其进行鱼种鉴定。首先提取其基因组脱氧核糖核酸（DNA）,对其细胞色素b的特定片段（464bp）进行扩增,然后选择DdeⅠ、HaeⅢ和NlaⅢ3种限制性内切酶进行酶切,并利用芯片生物分析技术得到酶切产物的特异图谱和确切的片段大小,从而有效区分了9种海鱼。研究结果表明,PCR-RFLP和芯片生物分析技术在鱼种鉴定上具有精确、鉴别和快速三大优势,可为鱼类食品检测提供科学依据