草鱼呼肠孤病毒RNA聚合酶基因的表达与产物纯化

草鱼呼肠孤病毒是引起草鱼出血病的主要病原,隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属。序列分析表明,GCRV S2 片段长为3 877核苷酸,编码一个分子量为138kDa 的蛋白VP2,具有RNA聚合酶性质。为进一步了解该病毒 RNA聚合酶特性,本研究在对GCRV RNA聚合酶基因(GCRV-RdRp)保守区(约1.5kb)重组质粒pR/RRp高效表达的基础上,分别构建了编码GCRV RNA聚合酶保守区N端与C端部分基因的 pR/RRpN及pR/RRpC重组表达载体,并在原核细胞中获得成功表达。筛选的重组表达菌

两株水生呼肠孤病毒部分特性的比较

水生呼肠孤病毒为感染水生动物的一类病原体,隶属于呼肠孤病毒科新建水生呼肠孤病毒属。草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是引起中国南方淡水养殖草鱼暴发性出血病病原,鲅鱼呼肠孤病毒(Threadfin reovirus,TFV)是引起海水养殖鲅鱼病毒病病原。本研究将GCRV与新加坡TFV分离株进行了部分特性比较研究。结果表明,GCRV与TFV均能感染CIK细胞,但对其它鱼类细胞系的敏感性有所差异。此外,凝胶电泳与逆转录聚合酶链式扩增显示,GCRV与TFV核酸属不同的基因型。在多

两株水生呼肠孤病毒部分特性的比较

水生呼肠孤病毒为感染水生动物的一类病原体，隶属于呼肠孤病毒科新建水生呼肠孤病毒属。草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus，GCRV)是引起中国南方淡水养殖草鱼暴发性出血病病原，鲅鱼呼肠孤病毒(Threadfin reovirus，TFV)是引起海水养殖鲅鱼病毒病病原。本研究将GCRV与新加坡TFV分离株进行了部分特性比较研究。结果表明，GCRV与TFV均能感染CIK细胞，但对其它鱼类细胞系的敏感性有所差异。此外，凝胶电泳与逆转录聚合酶链式扩增显示，GCRV与TFV核酸属不同的基因型。在多肽特性上，证实了GCRV的5条主要结构多肽具有与。FTV及水生呼肠孤病毒相似的特性。Westem blot检测显示，草鱼呼肠孤病毒与TFV结构蛋白拥有部分相同的抗原决定簇

两株水生呼肠孤病毒部分特性的比较

水生呼肠孤病毒为感染水生动物的一类病原体，隶属于呼肠孤病毒科新建水生呼肠孤病毒属。草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus，GCRV)是引起中国南方淡水养殖草鱼暴发性出血病病原，鲅鱼呼肠孤病毒(Threadfin reovirus，TFV)是引起海水养殖鲅鱼病毒病病原。本研究将GCRV与新加坡TFV分离株进行了部分特性比较研究。结果表明，GCRV与TFV均能感染CIK细胞，但对其它鱼类细胞系的敏感性有所差异。此外，凝胶电泳与逆转录聚合酶链式扩增显示，GCRV与TFV核酸属不同的基因型。在多肽特性上，证实了GCRV的5条主要结构多肽具有与。FTV及水生呼肠孤病毒相似的特性。Westem blot检测显示，草鱼呼肠孤病毒与TFV结构蛋白拥有部分相同的抗原决定簇

草鱼呼肠孤病毒RNA聚合酶基因的表达与产物纯化

草鱼呼肠孤病毒是引起草鱼出血病的主要病原，隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属。序列分析表明，GCRVS2片段长为3877核苷酸，编码一个分子量为138kDa的蛋白VP2，具有RNA聚合酶性质。为进一步了解该病毒RNA聚合酶特性，本研究在对GCRV RNA聚合酶基因(GCRV—RdRp)保守区(约1．5kb)重组质粒pR／RRp高效表达的基础上，分别构建了编码GCRV RNA聚合酶保守区N端与C端部分基因的pR／RRpN及pR／RRpC重组表达载体，并在原核细胞中获得成功表达。筛选的重组表达菌株经IPTG诱导培养，得到分子量分别为98kDa、103kDa的目的表达融合蛋白。Western blot分析表明，该表达产物与兔抗GCRV—VP2血清呈阳性反应。通过ProBond柱亲和层析，纯化了融合有6个组氨酸的重组表达产物，并获得约90％纯的目的蛋白。上述结果为GCRV RNA聚合酶特性分析提供了依据