吡非尼酮药物缓释载体PTMAc-PEG-PTMAc水凝胶制备与体外实验

【目的】以PTMAc-PEG-PTMAc三嵌段（PPP）水凝胶为吡非尼酮（PFD）药物缓释载体，评价其药物缓释性能。观察PFD载药水凝胶对人眼Tenon′s囊成纤维细胞（HTF）增殖抑制作用。【方法】制备PPP水凝胶；研究其溶胀率及其影响因素；光学显微镜观察水凝胶（载药与空载）中人眼Tenon′s囊成纤维细胞（HTF）的形态学改变；直接接触法进行PPP载药水凝胶进行体外释药实验。通过测定浓度、计算累积药物释放量，绘制出两种水凝胶体外药物释放曲线。CCK-8法检测不同浓度不同时间点水凝胶材料对细胞活力的影响及载药水凝胶体外抑制HTF增殖。【结果】PPP水凝胶成胶稳定。扫描电镜显示水凝胶呈现三维立体网孔状结构。水凝胶具有溶胀特性。溶胀率随水凝胶材料浓度增加而减少。在体外释药试验显示在前4d有明显的药物突释，此后缓慢释药直至第14天达到平衡。增加载药浓度，减少凝胶体积将明显增加药物累积缓释量；显微镜观察PPP水凝胶有抑制HTF细胞黏附作用；PPP水凝胶与HTF相互作用24、48、72、96h观察细胞活力分别为85.7%、93.0%、82.0%、81.6%，水凝胶不同方位HTF细胞形态不尽相同；水凝胶对细胞有抑制细胞黏附作用。两组不同载药浓度（1mg/mL和2mg/mL）载药水凝胶在24、48、72、96h这4个时间点细胞增殖抑制率分别为25.8%、21.8%、55.4%、25.6%；44.6%、35.9%、55.5%、31.4%。而1mg/mLPFD溶液在24、48、72、96h这4个时间点细胞增殖抑制率分别为28.9%、29.7%，7.8%、7.7%。【结论】PPP水凝胶具备良好药物缓释性能，载吡非尼酮水凝胶能明显抑制HTF增殖且较含等量药物溶液长效

不同区域晶状体上皮细胞基因表达差异分析

【目的】比较不同区域猪晶状体上皮细胞的基因表达在转录组水平上的差异。【方法】解剖显微镜下分离晶状体前囊膜, 将附着于其上的上皮细胞分为中央( 直径为 10.56 mm) 和周边两部分。分别提取两个样本的总 RNAs 并经 PCR 扩增, 以 Cy3 和 Cy5 分别标记扩增的中央与周边部分的 cDNA, 与含 7548 个基因的表达谱芯片杂交, 经图像分析, 生物信息学处理获得基因表达在转录水平差异的相关信息。【结果】中央与周边区域的猪晶状体上皮细胞在转录组水平共鉴定出952个有效表达的基因点, 其中差异表达基因 261 个, 以中央区域为参照, 周边上皮细胞 mRNA 上调 137 个, 下调 124 个。差异表达基因主要涉及的功能有: 细胞周期与凋亡、细胞骨架蛋白及细胞外基质、转录、细胞信号分子等。【结论】中央与周边区域猪晶状体上皮细胞基因表达在转录组水平上差异明显。这类差异呈明显的功能聚类