氨基酸的咔唑－9－乙基氯甲酸酯柱前衍生高效液相色谱分析

采用一种新型氯甲酸酯类荧光衍生试剂咔唑－9－乙基氯甲酸酯（CEOC）对氨基酸进行柱前衍生，并通过荧光检测的方法进行高效液相色谱（HPLC）分析；在Hypersil BDS C18柱上对19种氨基酸衍生物进行了分离，衍生物的激发和发射波长分别为λex=293nm,λem=365nm,当衍生化缓冲液pH为9．0，衍生试剂总量（摩尔数）为氨基酸总量的4倍时，衍生化产率最大，平均检出限可达22．8fmol

氨基酸的咔唑－9－乙基氯甲酸酯柱前衍生高效液相色谱分析

采用一种新型氯甲酸酯类荧光衍生试剂咔唑－9－乙基氯甲酸酯（CEOC）对氨基酸进行柱前衍生，并通过荧光检测的方法进行高效液相色谱（HPLC）分析；在Hypersil BDS C18柱上对19种氨基酸衍生物进行了分离，衍生物的激发和发射波长分别为λex=293nm,λem=365nm,当衍生化缓冲液pH为9．0，衍生试剂总量（摩尔数）为氨基酸总量的4倍时，衍生化产率最大，平均检出限可达22．8fmol

反相高效液相色谱中流动相线性梯度洗脱条件下溶质保留时间预测的新方法

在计算溶质的梯度保留时间时，根据流动相在色谱柱内的分布规律，对溶质在色谱柱内的迁移距离和流动相梯度进行校正，从而建立了一种预测溶质线性梯度洗脱条件下保留时间的新方法。该方法在不同的仪器系统中，对于弱保留和强保留溶质在不同线性梯度洗脱条件下保留时间的预测，都具有良好的准确度。以15种氨基酸和8种苯的同系物为例。该方法对于弱保留溶质保留时间的预测，相对平均误差分别为3．70％和4．90％，远小于文献方法得到的结果（23．61％和31．16％）；对于强保留溶质保留时间的预测，相对平均误差分别为0．21％和6．01％，略小于文献方法得到的结果（0．81％和6．69％）

反相高效液相色谱中流动相线性梯度洗脱条件下溶质保留时间预测的新方法

在计算溶质的梯度保留时间时，根据流动相在色谱柱内的分布规律，对溶质在色谱柱内的迁移距离和流动相梯度进行校正，从而建立了一种预测溶质线性梯度洗脱条件下保留时间的新方法。该方法在不同的仪器系统中，对于弱保留和强保留溶质在不同线性梯度洗脱条件下保留时间的预测，都具有良好的准确度。以15种氨基酸和8种苯的同系物为例。该方法对于弱保留溶质保留时间的预测，相对平均误差分别为3．70％和4．90％，远小于文献方法得到的结果（23．61％和31．16％）；对于强保留溶质保留时间的预测，相对平均误差分别为0．21％和6．01％，略小于文献方法得到的结果（0．81％和6．69％）

Immobilized enzyme reactorsin proteomics

Immobilized enzyme reactorsin proteomic

芯片自由流电泳的研究进展

芯片自由流电泳（μ-FFE）是一种连续微制备或预分离技术,已在细胞、细胞器、蛋白质等生物样品的分析中发挥了重要作用。本文系统综述了μ-FFE的研究进展,侧重于介绍各种自由流芯片的结构、分离模式和应用。此外,还对μ-FFE的发展方向进行了展望

基于二辛基化标记的蛋白质组n末端肽富集方法

蛋白质末端的研究不仅对于蛋白质的结构和功能注释十分必要,还能够为蛋白酶作用机理的揭示提供重要信息.针对传统蛋白质组N末端肽富集需要采用大量去除材料导致N末端肽回收率低,以及步骤繁琐、样品损失等问题,本文发展了一种基于二辛基化标记的蛋白质组N末端肽反向富集方法,可以在单次反相色谱分离中实现非N末端肽的去除.以酵母蛋白质酶解产物为样品对方法进行考察,结果表明,该方法具备较高的二辛基化标记效率（93%）,且非N末端肽经二辛基化标记后能够显著偏移至强保留区.将其应用于酵母蛋白质N末端组的分析,共鉴定到237条蛋白原始N末端肽和133 neo-N末端肽,较富集前分别提高了2.1和3.3倍.此外,将该方法结合多种酶切方式,使N末端肽和neo-N末端肽的鉴定数目进一步提高37%和60%,促进了蛋白质N末端组鉴定覆盖度的提高