Red-cell aplasia due to persistent human parvovirus B19 infection three years after umbilical cord blood transplantation-a case study

　造血幹細胞移植後に生じる貧血は，骨髄の造血能低下やウイルス感染症等の様々な背景が原因となることがあり，診断が困難であることが多い．ヒトパルボウイルス B19（human parvovirus B19：PVB19）は伝染性紅斑の原因ウイルスであり，遺伝性球状赤血球症等の赤血球寿命が短縮している溶血性貧血患者では，急性赤芽球癆を呈することが知られている．PVB19は移植患者を含む免疫不全状態の患者で慢性貧血を引き起こすことがあり，腎移植患者などでの報告例は多く存在するが，臍帯血移植後における PVB19感染による後天性赤芽球癆の症例の報告はほとんどない．今回我々は，臍帯血移植が成功したのち３年を経て発症した PVB19が４か月以上持続感染している症例を経験したので報告する．　Onset of anemia after hematopoietic stem cell transplantation can be caused by various background factors such as reduced hematopoiesis of the bone marrow and viral infection. Therefore, diagnosis is often difficult. Human parvovirus B19 (PVB19) due to acquired pure red-cell aplasia is the causative virus of erythema infectiosum, and it is well known that patients with hemolytic anemia with a short erythrocyte life span such as in the case of hereditary spherocytosis present with acute red-cell aplasia. PVB19 can cause chronic anemia in immunocompromised patients, including transplantation patients, and while there are many reported cases in kidney transplant patients, etc., there are few reported cases of cord blood transplantation. Here, we report a case of onset of PVB19 that occurred three years after successful umbilical cord blood transplantation and caused persistent infection for over a period of four months

リツキシマブ併用ベンダムスチン療法が奏効した腸管monomorphic PTLD

　移植後リンパ増殖性疾患（PTLD）は，造血幹細胞移植後に免疫抑制剤を使用した結果として，Ｔ細胞機能が低下して生じる異常なリンパ球，または形質細胞の増殖で，移植領域において最も致死的で注意を要する合併症の一つである．PTLD は４つのカテゴリーに分類され，その中のmonomorphic PTLD は、悪性リンパ腫の形態を呈する．Monomorphic PTLD の治療には，免疫抑制剤減量，リツキシマブ（Ｒ）単独療法やR-CHOP 療法があるが，予後は不良である．今回，難治性PTLD に対してリツキシマブ併用ベンダムスチン療法が奏効し寛解をえることができた症例を経験したので報告する．症例は50歳代男性で、骨髄異形成症候群に対して臍帯血移植を施行し，GVHD 予防にタクロリムスを使用した．移植後，消化管GVHD を発症し，プレドニゾロンで治療中，monomorphic PTLD（びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫）を発症した．免疫抑制剤中止後，リツキシマブ（Ｒ）単独療法，R-CHOP like 療法を施行したが効果不良であった．リツキシマブ併用ベンダムスチン療法に変更し４コース施行後，消化管内視鏡検査で病変は消失し，CT 検査で完全奏効を確認した．治療終了し約１年経過しているが，現在も症状増悪なく経過できており，難治性monomorphic PTLD に対してリツキシマブ併用ベンダムスチン療法が有効であった．Post-transplantation lymphoproliferative disorder (PTLD) occurs as a result of the use of immunosuppressants following hematopoietic stem cell transplantation, which causes the emergence of abnormal lymphocytes owing to the decline in T-cell function and the proliferation of plasma cells. It is thus one of the most fatal complications and the biggest concern for transplantation cases. PTLD is classified into 4 categories, and monomorphic PTLD takes the form of a malignant lymphoma. Immunosuppressant dose reduction, rituximab (R) monotherapy, and R-CHOP therapy are used to treat monomorphic PTLD, but the prognosis is poor for these forms of treatment. This report describes the experience of a patient with refractory PTLD who went into remission after responding to combination therapy with rituximab and bendamustine. A 50-year-old man underwent cord blood transplantation because of a myelodysplastic syndrome. Tacrolimus was used for GVHD prevention. After transplantation, symptoms of GVHD of the gastrointestinal tract developed, and during treatment using prednisolone, symptoms of monomorphic PTLD (diffuse large B-cell lymphoma) emerged. Once immunosuppressant use was discontinued, the patient underwent R monotherapy and R-CHOPlike treatment, but the response was poor. The treatment was then changed to combination therapy with rituximab and bendamustine; after 4 courses of treatment, gastrointestinal endoscopy revealed that the pathological abnormality had disappeared, and a complete response was confirmed. One year has passed since the completion of treatment, and at present, the patient’s symptoms have not worsened, suggesting that combination therapy with rituximab and bendamustine is effective for treating monomorphic PTLD

Short term storage of Wistar rat epididymal spermatozoa at cold temperature

本研究ではWistar 系ラットの精巣上体尾部由来精子を用いた冷蔵保存について検討した。ラット精巣上体尾部精子を、各種保存液（R18S3、マルベリーIII、それぞれを混合した1：1 稀釈液、2：1 稀釈液）中で4℃にて冷蔵保存した。加温後のそれらの運動性は、運動性指数およびSQA-V よりにて評価した。運動性指数では1：1、2：1 稀釈液で14 日間運動性を保持した。SQA-V ではSMI（精子自動性指数）値を用いて評価し、1：1、2：1 稀釈液で７ 日間自動運動性を確認した。精子頭部における膜損傷の有無をLIVE/DEAD Sperm Viability Kit を用いて評価し、2：1 稀釈液において7 日目の正常膜保持精子率は40％であった。受精能の確認では、常法により過剰排卵処置を施した幼若雌ラットの卵子を透明帯除去後、冷蔵保存精子と共に受精させた。この結果、7 日間保存した精子にて1：1 稀釈液では、20％（17/86）、2：1 稀釈液では30％（36/122）の精子侵入率であった。これらの結果から、Wistar 系ラットの精子冷蔵保存は、低率ではあるが受精能を保持し、冷蔵保存が可能であることが示された

<Original Papers>Study on fertilization and embryo culture in without albumin HTF medium from using L-Carnitine.

[要約] 本研究では、ICR系統マウスを用いた体外受精ならびに、初期胚の体外培養について検討した。体外受精では、常法により過剰排卵処置を施した成熟雌マウスより卵を回収し、前培養を行うことにより、受精能を獲得させた精子と共に培養し、受精させた。精子前培養培地および受精培地からウシ血清アルブミンを除き、L-カルニチンを添加した修正HTF培地を用いた。その結果、L-カルニチン添加濃度0mMでは48％（162/337）、1mM では12％（35/294）、2mM では0％（0/311）、5mM では0％（0/292）、10mM では0％（0/270）の受精率が得られた。続いて胚培養を行った結果、L-カルニチン添加濃度0mM では78％（127/162）、1mM では57％（20/35）であり、2mM、5mM、10mM では胚の発生には至らなかった。次に、高分子物質のPVA を0.1％添加した培地でも同様の実験を行い、L-カルニチン添加濃度0mM では25％（96/390）、0.1mM では25％（91/362）、0.5mM では30％（77/256）、1mMでは34％（117/347）の受精率が得られた。続いて胚培養を行った結果、L- カルニチン添加濃度0mMでは80％（76/95）、0.1mM では81％（74/91）、0.5mM では95％（70/74）、1mM では73％（85/117）が胚盤胞期胚へ発生した。これらの結果から、L- カルニチン高濃度における受精阻害を呈することが明らかとなった。また、L-カルニチンに高分子物質であるPVA を添加することで、ウシ血清アルブミンの代替物質になる可能性が示唆された。 [Abstract] The present study examined in vitro fertilization that used the ICR mouse and the in vitro culture of the early embryo. Newly ovulated eggs from mature mouse injected PMSG and hCG were inseminated in vitro with spermatozoa recovered from the cauda epididymidis of mature males. Preculture medium of sperm and fertilization medium added the L-carnitine without bovine serum albmin. Percentage of fertilization were 48％（162/337）at L-carnitine 0mM and 12％（35/294） at L-carnitine 1mM. Following the percentage of blastocyst were 78％（127/162） and 57％（20/35）. Next, the same experiment was performed using the medium that added 0. 1% PVA of polymeric mass. Results of the fertilization rate were 24％（95/390） at L-carnitine 0mM and 25％（91/362） at L-carnitine 0.1mM and 30％（77/256）at L-carnitine 0.5mM and 34％（117/347） at L-carnitine 1mM. Following the rate of developed to blastocysts stage were 73-95％. When the high density L-carnitine from these results, it was shown not to retard of fertilization. Moreover, L-carnitine was indicated the possibility for a substitute of bovine serum albumin by adding PVA