[[alternative]]Virus-host interaction in the insect cells latently infected with

[[abstract]]病毒潛伏感染是一個重要的醫農學問題，要研究病毒潛伏感染，首先要瞭 解病毒DNA在寄主基因體的物理狀態，例如病毒大小、結構，以及病毒DNA 是否插入寄主細胞的基因體中。本實驗首先利用斑點雜合法以Hz-1標準病 毒DNA合成探針，偵測各Hz-1病毒潛伏感染細胞株中病毒的含量，發現在潛 伏感染細胞株TNPC1 中約含有12%的病毒DNA，TNPC2細胞約有0.8%的病毒DN ，TNPC3細胞約有16.4%病毒DNA，SFP2、SFP4細胞則各有少於0.1%及0.4%的 病毒DNA存在，1983年Burand等人發現干擾粒子(Defective interfering particles)可能為病毒建立與維繫潛伏感染時所必需。因此，第二部份的 驗利用Southern雜合方法來分析標準病毒DNA和干擾粒子DNA在潛伏感染細 胞中存在的比例，結果發現標準病毒DNA和干擾粒子DNA同時存在於潛伏感 染的細胞中。第三部份是研究Hz-1桿狀病毒DNA是否插入寄主基因體中。由 於病毒DNA很大，一般電泳方法無法分析，因此利用pulse field gel elec trophoresis(PFGE)來解決這個問題。結果顯示病毒DNA以插入寄主染色體 中或以環狀DNA的方式存在於潛伏感染細胞中。第四部份是潛伏感染細胞對 Hz-1病毒干擾(viral interference)的試驗，結果發現TNPC1、TNPC2、TNP C3、SFP2、SFP4等Hz-1病毒潛伏感染細胞株對Hz-1病毒均有同質干擾的情 形。其中SFP2、SFP4是以細胞自戕(apoptosis)的方式來表現，TNPC1、TNP C2、TNPC3則否。第五部份是比較各Hz-1病毒潛伏感染細胞株潛伏特異性基 因hem-1的表現情形，這五種潛伏感染細胞株均會表現hem-1基因產生轉錄 子PAT-1，不過表現強度相差很大，依次是TNPC1強於TNPC3，TNPC3強於TNP C2；SFP2、SFP4相差不多，TNPC1、TNPC2、TNPC3潛伏感染細胞株表現hem- 1基因的情形均遠強於SFP2、SFP4潛伏感染細胞株。最後一部份的實驗與病 毒自潛伏感染細胞中的復發(reactivation)有關。利用已建立好的Hz-1病 毒潛伏感染細胞株，試驗以飢餓(低血清)、TPA(一種病毒復發誘引劑)，以 及低、高溫處理，檢看Hz-1病毒復發的情形。結果顯示，TNPC2的細胞株在 任何一種處理之下均有病毒復發的情形，其餘細胞株則否。