1 research outputs found
[[alternative]]Virus-host interaction in the insect cells latently infected with
[[abstract]]病毒潛伏感染是一個重要的醫農學問題,要研究病毒潛伏感染,首先要瞭
解病毒DNA在寄主基因體的物理狀態,例如病毒大小、結構,以及病毒DNA
是否插入寄主細胞的基因體中。本實驗首先利用斑點雜合法以Hz-1標準病
毒DNA合成探針,偵測各Hz-1病毒潛伏感染細胞株中病毒的含量,發現在潛
伏感染細胞株TNPC1 中約含有12%的病毒DNA,TNPC2細胞約有0.8%的病毒DN
,TNPC3細胞約有16.4%病毒DNA,SFP2、SFP4細胞則各有少於0.1%及0.4%的
病毒DNA存在,1983年Burand等人發現干擾粒子(Defective interfering
particles)可能為病毒建立與維繫潛伏感染時所必需。因此,第二部份的
驗利用Southern雜合方法來分析標準病毒DNA和干擾粒子DNA在潛伏感染細
胞中存在的比例,結果發現標準病毒DNA和干擾粒子DNA同時存在於潛伏感
染的細胞中。第三部份是研究Hz-1桿狀病毒DNA是否插入寄主基因體中。由
於病毒DNA很大,一般電泳方法無法分析,因此利用pulse field gel elec
trophoresis(PFGE)來解決這個問題。結果顯示病毒DNA以插入寄主染色體
中或以環狀DNA的方式存在於潛伏感染細胞中。第四部份是潛伏感染細胞對
Hz-1病毒干擾(viral interference)的試驗,結果發現TNPC1、TNPC2、TNP
C3、SFP2、SFP4等Hz-1病毒潛伏感染細胞株對Hz-1病毒均有同質干擾的情
形。其中SFP2、SFP4是以細胞自戕(apoptosis)的方式來表現,TNPC1、TNP
C2、TNPC3則否。第五部份是比較各Hz-1病毒潛伏感染細胞株潛伏特異性基
因hem-1的表現情形,這五種潛伏感染細胞株均會表現hem-1基因產生轉錄
子PAT-1,不過表現強度相差很大,依次是TNPC1強於TNPC3,TNPC3強於TNP
C2;SFP2、SFP4相差不多,TNPC1、TNPC2、TNPC3潛伏感染細胞株表現hem-
1基因的情形均遠強於SFP2、SFP4潛伏感染細胞株。最後一部份的實驗與病
毒自潛伏感染細胞中的復發(reactivation)有關。利用已建立好的Hz-1病
毒潛伏感染細胞株,試驗以飢餓(低血清)、TPA(一種病毒復發誘引劑),以
及低、高溫處理,檢看Hz-1病毒復發的情形。結果顯示,TNPC2的細胞株在
任何一種處理之下均有病毒復發的情形,其餘細胞株則否。