Embriogênese zigótica e somática em Araucaria angustifolia (Bertol.) Kuntze: parâmetros celulares e bioquímicos associados

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2013.A Araucaria angustifolia é uma conífera da família Araucariaceae, com ocorrência na floresta ombrófila mista, tipologia do bioma Mata Atlântica do Brasil que atualmente, encontra-se ameaçada de extinção, Esta condição reforça a necessidade de aplicação de medidas para a conservação desta espécie. Para que isto ocorra de forma eficaz é necessário o emprego conjunto de manejos convencionais para conservação dos remanescentes florestais e ferramentas biotecnológicas. Sendo assim, o presente trabalho propõe avanços na área de fisiologia, bioquímica e morfogenética que podem ser aplicados em técnicas de conservação de sementes e a propagação in vitro via embriogênese somática desta espécie. Anaálises de western blot em sementes de araucária detectaram a presença de dehidrinas nos extratos termoestáveis e termosensíves de eixos e cotiolédones de embriões zigóticos dessa espécie, e um possível mecanismos de defosforilação dessas proteínas. Além disso, imunolocalizações in situ por microscopia de luz (ML) e microscopia eletrônica de transmissão (MET) mostraram que estas proteínas estão presentes em todos os tecidos dos eixo embrionário e cotilédones, e a nível subcelular elas foram associadas aos corpos proteicos, microcorpos e a cromatina no núcleo. Os padrões desenvolvimento de embriões somáticos desta espécie foram acompanhados por ML, microscopia confocal (MC), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e MET. Os resultados mostraram que culturas embrionárias de A. angustifólia proliferam através de massas pró-embrionároas (MPE) em três estágios de desenvolvimento, I, II e III, e que somente o estágio III é capaz de dar origem aos embriões somáticos (ES) iniciais. ES iniciais foram caracterizados pela presença de massa embrionária (ME) composta pelas células embriogênicas (CE), a qual é ligada a região do suspensor. O suspensor foi composto inicialmente pelas células do embrionárias do tubo (CT), seguidas pelas células de suspensor (SC), sendo que estes dois tipos celulares se diferem pelo diferente grau de vacualização e desorganizaçãoo celular. Além disso, por análise de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi possível verificar que o desenvolvimento inicia dos embriões somáticos de A. angustifolia foram relacionados com uma redução do ABA endógeno e da poliamina putrescina na etapa de proliferação das MPE, seguido de aumento de ABA endógeno e das poliaminas spermidina e espermina, durante a embriogênese inicial. Abstract : Araucaria angustifolia is an endangered conifer of the South of Brazil. This condition reinforces the need to implement measures for the conservation of this species. For this to happen effectively requires the combined use of conventional managements for conservation of forest remnants and biotechnological tools. Therefore, this work proposes advances in physiology, biochemistry and morphogenetic that can be applied in seed conservation techniques and in vitro propagation via somatic embryogenesis of this species. Western blot analysis of Brazilian pine seeds detected the presence of dehydrins in the total proteins and heat-stable extracts from axis and cotyledons from zygotic embryos, and a possible mechanisms for dephosphorylation of these proteins. Furthermore, immunolocalization in situ of dehydrins by light microscopy (LM) and transmission electron microscopy (TEM) showed the presence of these proteins in all tissues of the embryonic axis and cotyledons. At the subcellular level they were associated with protein bodies, microbodies and chromatin in the nucleus. The standards development of somatic embryos of this species were followed by LM, confocal microscopy (CM), scanning electron microscopy (SEM) and TEM. The results showed that embryogenci cultures of A. angustifolia proliferate by proembryogenic masses (PEM) in three developmental stages I, II and III and, only the PEM III are able to give rise to early somatic embryos (ES). Early ES were characterized by the presence of embryonal mass (EM) composed of embryogenic cells (EC), which is connected to the region of the suspensor. The suspensor was composed by embryonal tube cells (CT) followed by suspensor-like cells (SC), and these two cell types differ by degree of vacuolation and dismantling cell. Furthermore, by analysis of high performance liquid chromatography (HPLC) was verified that the development of early somatic embryos of A. angustifolia were associated with a decrease in endogenous contentes of ABA and polyamine putrescine in the proliferation step of MPE, followed by an increase of endogenous contentes of ABA and polyamines spermine and spermidina during the early embryogenesis

Anais.

bitstream/item/99044/1/Doc.-253-XII-Evinci-completo.pdfEditores técnicos: Marcílio José Thomazini, Elenice Fritzsons, Patrícia Raquel Silva, Guilherme Schnell e Schuhli, Denise Jeton Cardoso, Luziane Franciscon. EVINCI. Resumos

Estudos sobre aplicação do pó da casca de pinhão para remoção de violeta genciana em solução aquosa

TCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Curso de Química.Devido a crescente problemática de contaminação ambiental por efluentes da indústria têxtil contendo altos níveis de concentração de corantes, encontrar meios eficazes e sustentáveis de tratamentos para esses resíduos se torna cada vez mais necessário. A adsorção é um método muito empregado na remoção de substâncias e adsorventes naturais são estudados com o objetivo de verificar as suas capacidades de adsorção e, assim, encontrar alternativas versáteis e de baixo custo para a remoção de corantes em resíduos aquosos. O pinhão, semente da Araucaria angustifólia, é muito popular na região sul do Brasil no período do inverno, principalmente no estado de Santa Catarina. Seu consumo gera as cascas como resíduos, que são descartados. Referências na literatura apontam que o emprego da casca do pinhão como adsorvente se mostra eficaz na remoção de corantes de efluentes. Este trabalho tem como objetivo verificar a aplicabilidade desse biossorvente, em forma de pó, na remoção do corante violeta genciana de soluções aquosas. O estudo do efeito do pH na adsorção revelou que pH entre 3 e 7 são as melhores faixas para remoção do corante. Estudos cinéticos evidenciaram que o processo de adsorção acontece por meio do modelo de pseudo-segunda ordem. Os dados obtidos pelas isotermas de adsorção foram tratados pelos modelos de Langmuir e Freundlich, determinando-se a capacidade máxima de adsorção em 11,20 mg g-1. O estudo completo de adsorção revelou que o pó da casca do pinhão tem eficácia na tratativa de remoção do corante violeta genciana de soluções aquosas

A relação do desenvolvimento de embriões somáticos iniciais de Araucaria angustifolia (Bert.) O. Kuntze com os conteúdos endógenos de carboidratos

TCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Curso de Agronomia.A Araucaria angustifolia é uma espécie nativa do Sul do Brasil que hoje se encontra na lista das espécies ameaçadas de extinção devido à degradação de grande parte do ecossistema no qual ela ocorre. Biotecnologias baseadas na cultura de tecidos se configuram em ferramentas úteis para a conservação e melhoramento de germoplasma desta espécie. Em coníferas, a rota regenerativa baseada na embriogênese somática é importante para a consecução deste objetivo. Os polissacarídeos parecem ter importantes funções durante as fases de desenvolvimento do embrião, por exemplo, a quantidade de açúcares ou o sentido do seu fluxo podem determinar um processo ou o momento em que ele ocorre, como a conversão de embriões somáticos em plântulas. O presente trabalho teve por objetivo determinar as concentrações de açúcares durante a transição de massas pró-embrionárias a embriões somáticos iniciais de A. angustifolia e assim analisar a relação do desenvolvimento de embriões somáticos iniciais com os conteúdos endógenos de carboidratos. Dessa forma, submeteu-se a cultura embrionária 91002 às seguintes etapas da rota de desenvolvimento da espécie: 1) Indução em meio de cultura ½LP isento de fitoreguladores; 2) Multiplicação em meio BM isento de fitoreguladores alternando entre meio sólido ou líquido; 3) Pré-tratamento com 30 μM de FLD por 4 semanas; 4) Pré-maturação com: a-meio DKM suplementado com 9 % de maltose; b-DKM suplementado com 9% de maltose e 7% de polietilenoglicol 3350 (PEG); c-DKM suplementado com 9% de lactose e d-DKM suplementado com 9% de lactose e 7% de PEG por 4 semanas e 5) Maturação com: a-meio DKM suplementado com ??????????????? ?????????? ABA e b-DKM suplementado com 60 ?????????? de ABA e 1.5 g.L-1 de carvão ativado por 4 semanas. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 8 repetições para cada tratamento das etapas da rota, composta por uma placa de Petri inoculada com 4 colônias de 300mg de massa fresca de MPE cada. As culturas foram mantidas em estufa incubadora BOD ajustada para uma temperatura de 25±2ºC e no escuro. Ocorreram avaliações morfológicas com dupla coloração com carmim acético a 1% e azul de Evans a 0.05%, análise em microscopia de luz através da histoquímica com PAS + CBB e determinação de carboidratos por cromatografia líquida de alta performance (HPLC). Os dados foram submetidos ao teste de análise de variância (teste F), que quando significativo seguiu para o teste SNK a 5% de probabilidade. As culturas embrionárias produziram abundantes MPE I, II e III e aquelas prétratadas com FLD produziram proporcionalmente mais MPE III, com maior quantidade de células de suspensor, grãos de amido e maiores teores de frutose, glicose e sacarose. As MPE tratadas na pré-maturação com meio de cultura suplementado com PEG tiveram a transição para embriões somáticos iniciais acelerada, sendo o tratamento com maltose e PEG o que gerou melhores resultados morfológicos e os tratamentos com maltose maior quantidade de grãos de amido. Ainda na pré-maturação, os tratamentos com lactose apresentaram conteúdo de maltose bastante elevado diferindo estatisticamente dos tratamentos suplementados com maltose. Os tratamentos de maturação com 30 μM de ABA e 60 μM de ABA mais 1.5 g.L-1 não diferiram entre si, e ambos possibilitaram a formação de embriões iniciais.Araucaria angustifolia is a native species from Southern Brazil, which is now in the list of endangered species due to the degradation of most of the ecosystem in which it occurs. Biotechnologies based on tissue culture configure themselves into useful tools for germplasm conservation and breeding of this species. In conifers, the somatic embryogenesis-based regenerative route is important to achieving this goal. Polysaccharides seem to have important functions during the stages of embryo development, for example, the amount of sugars or its flow direction may determine a process or the moment at which it occurs, such as the conversion of somatic embryos into plantlets. This study aimed to determine the concentrations of sugars during the transition from proembryogenic masses (PEM) to early somatic embryos in A. angustifolia and thus analyze the relation of the development of early somatic embryos with endogenous carbohydrate contents. In this way, the 91002 embryonic culture was submitted to the following stages of the development route of the species: 1) Induction in culture medium ½ LP without plant growth regulators; 2) Multiplication in BM medium without growth regulators, alternating between solid or liquid medium; 3) Pretreatment with 30 μM FLD for 4 weeks; 4) Prematuration with: a ??? DKM medium supplemented with 9% maltose; b ??? DKM medium supplemented with 9% maltose and 7% polyethylene glycol 3350 (PEG); c ??? DKM medium supplemented with 9% lactose; and d ??? DKM medium supplemented with 9% lactose and 7% PEG for 4 weeks; and 5) Maturation with: a ??? DKM medium supplemented with 30 μM ABA; and b ??? DKM medium supplemented with 60 μM ABA and 1.5 g.L-1 activated charcoal for 4 weeks. The experimental design was completely randomized with 8 repetitions for each treatment of the route stages, consisting of a Petri dish inoculated with 4 colonies of 300 mg fresh weight of PEM per colony. The cultures were kept in BOD incubator adjusted to a temperature of 25±2 °C in the dark. Morphological evaluations were performed using double staining with 1% acetic carmine and 0.05% Evans blue, analysis by light microscopy and histochemical tests and determination of carbohydrates by highperformance liquid chromatography (HPLC). Data were subjected to analysis of variance (F-test), and, when significant, submitted to the SNK test at 5% of probability. The embryonic cultures produced abundant PEM I, II and III and those treated with FLD produced proportionally more PEM III, with higher amounts of suspensor cells, starch grains, and higher levels of fructose, glucose and sucrose. PEM treated in prematuration stage with culture medium supplemented with PEG showed a faster transition to early somatic embryos, with the treatment with maltose + PEG showing better morphological results and the treatments with maltose showing higher amounts of starch grains. Treatments of prematuration with lactose showed a fairly high content of maltose, being statistically different from the treatments supplemented with maltose. Maturation treatments with 30 μM ABA and 60 μM ABA + 1.5 g.L-1 activated charcoal were not significantly different and both of them provided the formation of early embryos. We observed the same patterns of starch content of the previous stages, a decrease in the maltose content of PEM treated with lactose at prematuration stage and a slight increase in sucrose concentration

Mapeamento das tendências na produção de cerveja artesanal brasileira

A cerveja é uma bebida proveniente da fermentação alcoólica de grãos maltados, lúpulo e água. Possui história milenar e amplamente difundida no mundo. Com isso, diversos países possuem suas tradições, costumes e maneiras de produzir essa popular bebida. Este trabalho tem como objetivo mapear as tendências de produção tipicamente brasileiras e caracterizar o atual mercado de cerveja artesanal. Será exposto um pouco da história da cerveja no Brasil, o que ajuda a entender importância da bebida na nossa cultura. Com isso, será discutido o conceito de Escola de Cerveja e também quais a cultura e as tendências de produção das regiões que possuem tal título, quais são as Escolas Germânica, Britânica, Belga e Americana. Ainda um estudo sobre o mercado de cerveja no Brasil e no mundo. Será introduzido também as tendências de produção de cerveja no Brasil e um breve resumo sobre a Catharina Sour, o primeiro e único estilo oficial brasileiro de cerveja. Mais adiante, será abordado o processo produtivo em si. Alguns detalhes de cada etapa, desde a mosturação dos grãos até a bebida pronta para o consumo, trazendo detalhes e comparações de como cada etapa é realizada na produção industrial e na produção caseira. Ao final serão mostrados alguns insumos que hoje já são adicionados a cerveja, seus efeitos e sua aceitação de mercado

Utilização do fruto de moringa oleifera lam no processo de biossorção de chumbo (ii) de águas contaminadas

Orientador: Prof.ª Dr.ª Angélica Marquetotti Salcedo VieiraCoorientador: Prof.ª Dr.ª Rosângela BergamascoDissertação (mestrado em Engenharia Química)--Universidade Estadual de Maringá, Centro de Tecnologia, Dep. de Engenharia Química, 2016RESUMO: O chumbo é um metal pesado considerado altamente tóxico, responsável por causar uma série de danos à saúde, além de ser extremamente nocivo para a flora e a fauna. Diante deste fato, diversas técnicas vêm sendo estudadas para a remoção deste metal de águas contaminadas, dentre elas destaca-se a adsorção. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial de biossorção de chumbo (II) de águas contaminadas por casca de semente, sementes e vagens de Moringa oleifera Lam (moringa), em sua forma natural e após aplicação de tratamento químico ácido e básico, totalizando assim 9 biossorventes. Primeiramente foram realizados os estudos de caracterização das partes dos frutos de moringa a fim de avaliar o efeito promovido pelo tratamento químico aplicado, bem como para propiciar melhor entendimento do mecanismo de ação envolvido nos processos de biossorção dos íons de chumbo. As análises de caracterização mostraram que a moringa pode ser um biossorvente em potencial e que a aplicação do tratamento químico básico pode promover modificações na estrutura do material que favorecem a biossorção do metal analisado. Após a etapa de caracterização, o processo de biossorção foi estudado a partir de águas artificialmente contaminadas por chumbo. No estudo de biossorção foi avaliada a influência dos parâmetros tempo de contato, pH, temperatura, dose de biossorvente e velocidade de agitação na adsorção. A modelagem cinética dos dados foi analisada quanto aos modelos de pseudo- primeira e segunda ordem, e as isotermas quanto ao melhor ajuste pelos modelos de adsorção de Langmuir e de Freundlich. Estudos termodinâmicos foram empregados para melhor compreender o processo de biossorção. A partir dos parâmetros estudados, pôde-se obter como condições ótimas para todos os biossorventes analisados, 30 minutos requerido para a ocorrência do equilíbrio, pH 5-6, temperatura de 25°C, 0,5 gramas de dosagem do biossorvente e 100 rpm de velocidade de agitação. O modelo cinético de pseudo-segunda ordem foi o que melhor se ajustou aos dados experimentais. O modelo de isoterma que apresentou melhor ajuste aos dados experimentais para as cascas de sementes e sementes, foi o modelo proposto por Freundlich e para as vagens, o modelo de Langmuir. A análise dos dados termodinâmicos obtidos mostrou que o processo de adsorção é favorável e de natureza exotérmica. Por meio dos resultados encontrados foi possível concluir que as partes avaliadas de moringa são eficientes na biossorção de chumbo (II)ABSTRACT: Lead is a heavy metals considered highly toxic, responsible for causing a number of health problems as well as being extremely harmful to flora and fauna. Given this fact, several techniques have been studied for removal this metal from contaminated water, among which stands out the adsorption process. In this sense, the objective of this study was to evaluate the potential of lead (II) removal from contaminated water using hulls of seeds, seeds and pods of Moringa oleifera Lam (moringa) as biosorbents, in its natural form, and after application of chemical treatment (acidic and basic), thus totaling 9 biosorbents. First the characterization studies of the parts of fruits of Moringa were conducted to evaluate the effect promoted by the applied chemical treatment and also to provide a better understanding of action mechanism involved in biosorption processes of lead ions. The characterization analyzes showed that the jug can be a potential biosorbent and the application of basic chemical treatment may promote changes in the structure of the material which promote the biosorption of the metal analyzed. After the step of characterization the biosorption process was studied from artificially water contaminated by lead. In biosorption study evaluated the influence of some parameters such as contact time, pH, temperature, biosorbent dose and stirring speed in the adsorption. Kinetic modeling of the data was analyzed as to the models of pseudo first order and pseudo second order, and the isotherms as the best fit by adsorption models of Langmuir and Freundlich. Thermodynamic studies were used to better understand the biosorption process. From the studied parameters, it was possible to obtain optimum conditions for all analyzed biosorbents, 30 minutes required for the occurrence of equilibrium, pH range between 5-6, 25 ° C, 0.5 grams of biosorvent dosage and 100 rpm for agitation speed. The kinetic model of pseudo-second order was the best fit to the experimental data. The isotherm model that showed the best fit to the experimental data for the hulls of seeds and seed, was the model proposed by Freundlich and for pods, the Langmuir model. The analysis of the thermodynamic data obtained showed that the adsorption process is favorable and of exothermic nature. Through the results has been possible to conclude that the parties assessed of moringa are efficient in biosorption of lead (II) from contamined water102 f. : figs., tabs. (algumas color.)