L'analyse de la faisabilité et la sécurité de l'approche chirurgicale trans-péricardique vers l'atrium droit à travers le diaphragme par la cavité abdominale : une étude cadavérique

Malgré des progrès significatifs dans le diagnostic précoce, on constate ces dernières années une nette tendance à l'augmentation du nombre de patients atteints de carcinome à cellules rénales (CCR) présentant une complication spécifique sous la forme d'un thrombus tumoral (TT) s'étendant le long de la lumière de la veine cave inférieure (VCI) au-dessus du niveau du diaphragme, jusqu'à l'atrium droit. Le seul traitement efficace du CCR avec TT reste la chirurgie. La chirurgie conventionnelle comprend la néphrectomie radicale avec thrombectomie, nécessitant des techniques de pontage cardio-pulmonaire et l'arrêt de la circulation sanguine, ce qui implique toujours des complications graves. Pour les éviter, diverses options d'accès chirurgical à la partie supradiaphragmatique de la VCI et à l'atrium droit ont été proposées exclusivement par le côté abdominal, en utilisant diverses options de diaphragmotomie et de péricardotomie avec isolement de la VCI dans la cavité péricardique. L'un des points les plus importants dans le traitement chirurgical du CCR avec TT supradiaphragmatique, est le contrôle de l'extrémité distale du TT. Cette étape dépend largement de l'accès choisi. Dans ce travail, afin d'optimiser les techniques chirurgicales pour les patients atteints de TT supradiaphragmatique, nous avons comparé la faisabilité et la sécurité des différents accès chirurgicaux transdiaphragmatiques. Nous avons également proposé un accès transdiaphragmatique transpéricardique combiné comprenant des diaphragmotomies en forme de T et circulaires, combinées à des péricardotomies longitudinales et circulaires. Nous avons utilisé quatre corps préservés avec la méthode Thiel pour réaliser les simulations chirurgicales. La néphrectomie radicale avec thrombectomie a été réalisée par deux experts de manière indépendante. Quatre approches chirurgicales de la VCI supradiaphragmatique ont été réalisées consécutivement. Nous avons utilisé des simulateurs de TT de différents diamètres et densités pour étudier la palpation de l'apex du TT et son déplacement. La faisabilité et la sécurité de chaque accès et de chaque procédure chirurgicale ont été évaluées à l'aide du test du Chi carré, avec correction des comparaisons multiples (Bonferroni). Notre travail a confirmé la faisabilité et la sécurité des approches transdiaphragmatiques. Les accès transpéricardiques sont préférables dans les cas où les TT sont plus élevés. Ils constituent une alternative adéquate à la chirurgie conventionnelle en cas de TT flottant supradiaphragmatique, jusqu’à l’atrium droit.Despite significant progress in early diagnosis, there has been a clear trend in recent years towards an increasing number of renal cell carcinoma (RCC) patients with a specific complication in the form of a tumor thrombus (TT) extending along the lumen of the inferior vena cava (IVC) above the level of the diaphragm into the right atrium. The only effective treatment for RCC with TT remains surgery. Conventional surgery includes radical nephrectomy with thrombectomy, requiring cardiopulmonary bypass techniques and cessation of blood flow, which always involves serious complications. To avoid them, various options for surgical access to the supradiaphragmatic part of the IVC and the right atrium have been proposed exclusively from the abdominal side, using various options of diaphragmotomy and pericardotomy with isolation of the IVC in the pericardial cavity. One of the most important issues in the surgical treatment of RCC with supradiaphragmatic TT is the control of the distal end of the TT. This step depends largely on the access chosen. In this work, to optimize surgical techniques for patients with supradiaphragmatic TT, we compared the feasibility and safety of different transdiaphragmatic surgical accesses. We also proposed a combined transdiaphragmatic transpericardial access including T-shaped and circular diaphragmotomies combined with longitudinal and circular pericardotomies. We used four bodies preserved with the Thiel method to perform the surgical simulations. Radical nephrectomy with thrombectomy was performed by two experts independently. Four supradiaphragmatic ICV surgical approaches were performed consecutively. We used TT simulators of different diameters and densities to study palpation of the TT apex and its displacement. The feasibility and safety of each access and surgical procedure were evaluated using the Chi-square test with correction for multiple comparisons (Bonferroni). Our work confirmed the feasibility and safety of transdiaphragmatic approaches. Transpericardial accesses are preferable in cases with higher TT. They are an adequate alternative to conventional surgery in cases of supradiaphragmatic floating TT, up to the right atrium

La cancérologie du furet (Mustela putorius furo)

La cancérologie du furet est en pleine évolution. De nombreux types tumoraux sont rapportés. Ils touchent tous les systèmes de l organisme ; endocrinien, hémolymphatique, cutané, digestif, reproducteur, musculosquelettique, cardiovasculaire, nerveux, urinaire ou encore respiratoire. Les trois tumeurs les plus rencontrées sont ; les insulinomes, les tumeurs des surrénales et les lymphomes. Les examens complémentaires se sont eux aussi développés. Hémogramme, biochimie radiographie et échographie peuvent désormais être complétées par cytologie, immunohistochimie, endoscopie, scanner, I.R.M. ou encore scintigraphie. Les traitements que sont la chirurgie, la chimiothérapie ou la radiothérapie, peuvent être associer. Ils permettent une guérison ou, à défaut, une solution palliative

Embolie de liquide amniotique : évaluation de son incidence, de ses facteurs de risque, de son diagnostic positif et de sa prise en charge médicale. Étude rétrospective et multicentrique sur 20 cas entre 2003 et 2009, au sein de 12 maternités de l'AP-HP

Amniotic fluid embolism: evaluation of its incidence, of its risk factors, its positive diagnosis and its medical care. Multicenter retrospective study on 20 cases between 2003 and 2009 in 12 maternity hospitals of the AP-HP. In 2010, the amniotic fluid embolism (AFE) is the second leading cause of maternal mortality in France (12%) after postpartum hemorrhage. Risk factors are poorly understood, the clinical picture is variable and there is no pathognomonic paraclinical examination validated. The midwife is in most cases, alone with the patient at the time of its occurrence and plays a major role in the implementation of the initial resuscitation. That's why we conducted a retrospective multicenter study in 12 maternity wards of the AP-HP from 1 January 2003 and May 31, 2009. Twenty cases of suspected ELA were collected. Our study aimed to determine the incidence of AFE, identify potential risk factors, clinical presentation and management done. We found an incidence of AFE to 1/8 648 deliveries. Maternal mortality and neurological morbidity were respectively 25% and 20%, fetal morbidity was 37.5% with a delay of extraction of 19.5 ± 15 minutes. Potential risk factors were: abnormal placenta insertion (p<0.001), abruption placenta (p<0.001), induction of labor (p<0.005), therapeutic abortion (p<0.001), caesarean section (p=0.03), ethnicity in sub-Saharan Africa (p<0.001) and male fetus (p=0.01). The main clinical signs were a shock cardiovascular (75%), respiratory distress (60%), DIC (70%) and neurological disorders (55%). The initial management by non-specific team can be improved. Indeed, the duration of no flow (the time without chest compression in the first period of cardiac arrest) was longer in patients who died (6±3.5 versus 2±1.4 minutes) while midwives were already there. Moreover, the arrival of the special team was longer among women who died (7.5±4.8 versus 3.2±4.8 minutes). Moreover, only 50% of patients were referred for diagnostic tests when they could help confirm a suspicion. On the other hand, only 18% of pregnancies had a specific protocol on the AFE and 45% were organizing special training on the vital urgency. The improvement of maternal-fetal prognosis is therefore based on the training of professionals, establishing a written protocol, the transmission of information within the team and control of these shares over the long term. The creation of a French or european national registry would be a tool to assess the epidemiology of this disease in France and try to understand its pathophysiology.Embolie de liquide amniotique : évaluation de son incidence, de ses facteurs de risque, de son diagnostic positif et de sa prise en charge médicale. Étude rétrospective et multicentrique sur 20 cas entre 2003 et 2009, au sein de 12 maternités de l'AP-HP En 2010, l'Embolie de Liquide Amniotique (ELA) représente la deuxième cause de mortalité maternelle en France (12%) après les hémorragies du post-partum. Les facteurs de risque sont mal connus, le tableau clinique est variable et il n'existe pas d'examen paraclinique pathognomonique validé. La sage-femme est, dans la majorité des cas, seule avec la patiente au moment de sa survenue et joue un rôle majeur dans la mise en oeuvre de la réanimation initiale. C'est la raison pour laquelle nous avons réalisé une étude rétrospective, multicentrique au sein de 12 maternités de l'AP-HP entre le 1er janvier 2003 et le 31 mai 2009. Vingt cas de suspicion d'ELA ont été colligés. Notre étude avait pour objectifs de déterminer l'incidence de l'embolie amniotique, d'identifier les éventuels facteurs de risque, le tableau clinique, et la prise en charge effectuée. Nous avons retrouvé une incidence d'ELA à 1/ 8 648 accouchements. La mortalité et la morbidité neurologique maternelle étaient respectivement de 25% et de 20%, la morbidité foetale était elle de 37,5% avec un délai d'extraction de 19,5±15 minutes. Les éventuels facteurs de risque étaient : les anomalies d'insertion placentaire (p<0,001), l'hématome rétro-placentaire (p<0,001), le déclenchement du travail (p<0,005), les IMG (p<0,001), la césarienne (p=0,03), l'origine ethnique d'Afrique sub-saharienne (p<0,001) et le sexe foetal masculin (p=0,01). Les principaux signes cliniques décrivaient un choc cardio-vasculaire (75%), une détresse respiratoire (60%), une CIVD (70%) et des troubles neurologiques (55%). La prise en charge initiale par l'équipe non spécifique peut être améliorée. En effet, la durée du no flow (durée du débit cardiaque nul avant la RCP) était plus longue chez les patientes décédées (6±3,5 versus 2±1,4 minutes) alors que les sages-femmes étaient déjà présentes. De plus, l'arrivée de l'équipe spécifique était plus longue chez les femmes décédées (7,5±4,8 versus 3,2±4,8 minutes). Par ailleurs, seules 50% des patientes ont eu des examens à visée diagnostique alors qu'ils pourraient contribuer à confirmer une suspicion. D'autre part, seules 18% des maternités possédaient un protocole spécifique sur l'ELA et 45% organisaient des formations spécifiques sur l'urgence vitale. L'amélioration du pronostic materno-foetal repose donc sur la formation des professionnels, l'établissement d'un protocole écrit, la transmission de l'information au sein de l'équipe et le contrôle de ces actions sur le long terme. La création d'un registre national français ou européen serait un outil permettant d'évaluer l'épidémiologie de cette pathologie en France et de tenter de comprendre sa physiopathologie

Contribution à l'étude des cardiopathies des carnivores domestiques à l'E.N.V.T. : création d'une base de données

On détient peu d'informations d'ordre épidémiologique sur les cardiopathies des carnivores domestiques en France et en Europe. Afin de réaliser une large étude épidémiologique prospective, une base de données Access, nommée ENVT CARDIO destinée à recenser les cas de cardiologie vus en consultation à l'Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse, a été crée. Ce travail comprend 3 parties. Dans le premier chapitre, des informations sur les prévalences, les prédispositions de races, de sexe ou d'âge, recueillies majoritairement par les Anglo-saxons, sont répertoriées. Elles servent de point de départ à la création et à l'utilisation de ENVT CARDIO. On y trouve également des données plus générales sur les maladies cardiaques du chien et du chat. La deuxième partie explique la création de la base de données, ses possibilités d'extension ou de modification et ses principes d'utilisation. ENVT CARDIO comprend un formulaire de saisie des données contenant 35 champs (Nom du propriétaire. Numéro de dossier. Espèce, Race, Sexe, Age...) et une série de requêtes préformées (regroupements de données selon des critères bien précis : répartition par espèce, âge, sexe, race, affections cardiaques...). La base de données recueille pour l'instant les cas de cardiologie vus à l'ENVT en 98-99. Mais, elle peut être élargie à volonté (nouvelles saisies, création d'autres requêtes ou formulaires, changements sur le formulaire de saisie). Dans un troisième chapitre, à titre d'application et d'exemple, ces premières données ont fait l'objet d'une analyse comparée avec celles de l'année 97-98 et les cas de médecine générale de 98-99. Cette ébauche analytique a permis de faire apparaître les limites (nombre de cas nécessaires supérieur à 1000, saisie standardisée au maximum, suivi strict) et les possibilités futures de ENVT CARDIO (mise à jour automatique, consultation rapide, création de nouvelles requêtes à volonté, modifications des formulaires ...)

Amélioration des résultats de la thérapie cellulaire hépatique : Développement d’une nouvelle méthode de préparation du foie receveur et développement d’une source cellulaire alternative aux hépatocytes

Hepatocyte transplantation has been proposed as an alternative to orthotopic liver transplantation to treat metabolic liver diseases. This approach requires preconditioning of the host liver to enhance engraftment of transplanted hepatocytes. Different methods are currently used in preclinical models: partial hepatectomy, portal ligature or embolization, and radiotherapy or chemotherapeutic drugs. However, these methods carry high risks of complications and are problematic for use in clinical practice. Here, we developed an innovative method called volumetric (distal, partial and random) portal embolization (EPV), which preserves total liver volume.METHODS: Embolization was performed in the portal trunk of C57BL6 adult mice with polyester microspheres, to ensure a bilateral and distal distribution. The repartition of microspheres was studied by angiographic and histological analysis. Liver regeneration was evaluated by Ki67 labeling. Optimal conditions for EPV were determined and the resulting regeneration was compared with that following partial hepatectomy (70%). Labeled adult hepatocytes were then transplanted and engraftment was compared between embolized (n=19) and non embolized mice (n=8). Engraftment was assessed in vivo and histologically by tracking labeled cells at day 5. RESULTS: The best volumetric embolization conditions, which resulted in the regeneration of 5% of total liver, were 8x106 10µm microspheres infused with a 29 G needle directly into the portal trunk at 3.3ml/s. In these conditions, transplanted hepatocytes engraftment was significantly higher than in control conditions (3 vs 0.65%). CONCLUSIONS: EPV is a new, minimally invasive and efficient technique to prepare the host liver for cell transplantation.La transplantation d’hépatocytes dans le foie est un procédé séduisant pour corriger la fonction hépatique et permettre peut-être d’éviter la transplantation d’organe. Actuellement, la greffe de cellules hépatiques a été envisagée pour corriger le déficit métabolique des patients ayant une maladie hépatique métabolique héréditaire, dont le foie est par ailleurs normal. Les résultats des essais cliniques d’allotransplantation ou d’autotransplantation d'hépatocytes génétiquement modifiés montrent une prise de greffe insuffisante et, dans la plupart des études, un effet thérapeutique transitoire. Ces résultats ont incité à développer des modèles animaux précliniques pour tester des procédés facilitant la prise de greffe. L’intégration des hépatocytes dans les travées hépatocytaires et leur prolifération permet de préparer le foie à greffer par stimulation de la régénération hépatique. Ces deux procédés sont aujourd'hui utilisés en routine dans ces modéles expérimentaux: l’hépatectomie partielle ou l’embolisation portale. Néanmoins, ces deux techniques de stimulation de la régénération hépatique sont difficilement applicables à la pratique clinique car la résection chirurgicale du foie comporte des risques majeurs et l’embolisation portale "classique", c’est-à-dire l’obstruction des grosses veines sectorielles du foie, est responsable d'une embolisation anatomique avec une atrophie ou une destruction partielle de la partie du foie embolisé. Par ces procédés, certes la régénération est stimulée à hauteur de 20% mais seulement sur une partie du volume hépatique (environ 50%) avec diminution du volume accessible à la greffe sans compter les risques liés à l'atrophie ou à la resection chirurgicale du reste du foie.Nous avons donc proposé une nouvelle approche de stimulation de la régénération hépatique chez la souris. Nous avons utilisé une embolisation portale volumétrique à l’aide de microbilles allant très loin dans tout le foie. Il s’agit donc de l’embolisation d'un pourcentage du volume global hépatique sans altération anatomique (lobe) du foie. Ainsi, les traumatismes nécessaires à la préparation du foie pour augmenter la prolifération seront mieux répartis dans la totalité du foie et devraient avoir moins de conséquences sur la fonction hépatique, contrairement à l’embolisation partielle dite anatomique. Un autre effet serait la préservation de l’accessibilité à tout le volume du foie des cellules à greffer et non plus à la partie non embolisée du foie ce qui devrait d’augmenter le nombre de cellules injectées donc transplantées par une même préparation.Nous devons encore évaluer les repercutions hépatiques à long terme (>J21) des conditions d'embolisation volumétrique à plus fort taux de régénération mais qui implique des lésions de nécrose hépatique. Avant de passer sur des modéles cliniques, une évaluation de l’embolisation volumétrique sur un animal plus gros (rat ou maquaque) avec déficit métabolique est nécéssaire. Par ailleurs, cette nouvelle préparation du foie doit être optimisée pour une application clinique à moyen terme avec des injections séquentielles de microsphères et l’utilisation de microsphères résorbables, ce qui permettrait d’obstruer plus de sinusoïdes sans accumulation du matériel dans les branches portales, et ainsi augmenter le signal de régénération.Si ces résultats se confirment, notamment chez l’animal, ce nouveau procédé permettrait d’améliorer la prise de greffe de façon significative dans l’ensemble du parenchyme hépatique et de pouvoir transplanter un plus grand nombre de cellules. L’intérêt de cette technique peu invasive la rend d’autant plus applicable chez l’homme car l’architecture du foie est préservée. De réels progrès dans la thérapie cellulaire hépatique devront permettre dans le futur de mieux traiter les patients atteints de maladies métaboliques héréditaires

Échographie du péricarde, de l’endocarde, du poumon et des plèvres chez les bovins : corrélation entre les signes cliniques, les données paracliniques et les examens nécropsiques

Les affections de la cage thoracique des bovins constituent des entités aux signes cliniques parfois peu spécifiques et au pronostic souvent défavorable. Un diagnostic précoce et précis est de fait essentiel afin de limiter l’étendue des lésions et d’envisager une thérapeutique la plus adaptée possible. L’échographie est une technique d’imagerie non invasive répondant pleinement à cette problématique. Nous allons étudier ici sa capacité à détecter comme atteints des bovins admis aux hôpitaux des ruminants de l’ENVT suspects de péricardite et d’endocardite. Pour cela, nous allons travailler sur 46 cas pour l’étude des péricardites, et sur 35 cas pour l’étude des endocardites, tous reçus entre 2011 et 2016. Les échographies se réalisent sur animal debout avec une sonde convexe de 3,5 à 5 MHz. Dans le cadre de la détection des péricardites, les caractéristiques considérées sont la présence d’une effusion péricardique, avec plus ou moins de fibrine, ainsi que l’irrégularité et l’épaississement du péricarde et de l’épicarde. Pour la détection des endocardites, les signes échographiques recherchés sont la présence d’une déformation de l’endocarde valvulaire ou mural, l’épaississement des valvules et leur échogénicité. Associer examens clinique et échographique permet d’obtenir : Se = 0,92, Sp = 0,70, VPP = 0,92, VPN = 0,70 pour la péricardite ; Se = 0,96, Sp = 0,29, VPP = 0,66, VPN = 0,67 pour l’endocardite. Associer examens clinique, échographique et valeurs de biochimie plasmatique permet d’obtenir : Se = 0,89, Sp = 0,56, VPP = 0,80, VPN = 0,71 pour la péricardite ; Se = 0,86, Sp = 0,11, VPP = 0,60, VPN = 0,33 pour l’endocardite

Modifications post-traductionnelles de la VE-cadhérine (des mécanismes moléculaires aux applications cliniques)

La fonction de barrière de l'endothélium vasculaire est affectée par des modifications de la cadhérine des cellules endothéliales (VE-cadhérine) telles que la phosphorylation sur tyrosine dans son domaine cytoplasmique et le clivage de son domaine extracellulaire (sVE). Ce travail s'est articulé en deux parties : 1- Etude de ces modifications dans le contexte de la polyarthrite rhumatoïde (PR), et les mécanismes sous-tendus. Ce travail a permis de montrer que la VE-cadhérine est une cible du TNFa, une cytokine essentielle dans la PR, qui induit de la libération de sVE de façon dépendante de l'activité kinase de Src, suggérant l'implication d'un mécanisme de phosphorylation sur tyrosine dans ce processus. De plus, la VE-cadhérine est aussi la cible des protéases de la matrice extracellulaire telles que MMP-2. L'application de ces données fondamentales à la clinique a permis de montrer que sVE était retrouvée dans le sang de patients PR (n=63) et que son taux était corrélé à l'activité de la maladie. Ainsi, le dosage de sVE est d'intérêt dans la prise en charge des patients. 2-Etude de la phosphorylation de la VE-cadhérine dans un contexte d'angiogenèse hormono-régulée au cours du cycle ovarien chez la souris. Les résultats ont montré que le site Y685 de la VE-cadhérine est phosphorylé dans l'ovaire et l'utérus de souris de façon régulée pendant le cycle, ce qui permet de proposer ce modèle physiologique pour étudier la phosphorylation de la VE-cadhérine in vivo. L'analyse de souris knock-in Y685F de la VE-cadhérine (VE-Y685F) a montré que l'absence du site confère une perméabilité accrue dans l'ovaire et l'utérus mais aussi dans les petits capillaires de la peau. De plus, dans deux modèles d'induction d'arthrite, les souris VE-Y685F ont présenté un taux de sVE plus élevé que les contrôles. Au total, sVE et la phosphorylation de la VE-cadhérine ont un vaste champ d'application dans le traitement de la PR ainsi que pour le développement de nouvelles thérapies pouvant s'étendre à d'autres pathologies vasculaires.The vascular endothelium barrier function is influenced by vascular endothelial cadherin (VE-cadherin) modifications such as its cytoplasmic tail tyrosine phosphorylation and its ecto-domain cleavage (sVE). The work reported herein was divided into two parts: 1- Study of VE-cadherin modifications and the mechanisms underlying these ones in the rheumatoid arthritis context. This work demonstrated that VE-cadherin is a target of TNFa, a highly important cytokine in rheumatoid arthritis (RA) pathogenesis. We found TNFa to induce sVE shedding in a Src kinase dependent manner, suggesting the involvement of phosphorylation mechanism in this process. In addition, this VE-cadherin cleavage requires matrix metalloproteinase activities such as that of MMP-2. Applying these fundamental data to clinical study showed that sVE was detected in sera of 63 RA patients and its titer was correlated with the disease activity. This finding suggests an obvious interest for assaying sVE in RA therapies. 2- Study of VE-cadherin tyrosine phosphorylation in a context of hormones-regulated angiogenesis during mouse estrous cycle. The results showed VE-cadherin phosphorylation at Y685 that was regulated along mouse estrous cycle allowing to proposing mouse estrous cycle as a physiological model for studying VE-cadherin phosphorylation in vivo. The analysis of VE-cadherin Y685F knock-in mice (VE-Y685F) showed that these mice exhibit a higher vascular permeability in uterus and ovaries and the skin small capillaries compared to wild-type animals. Moreover, VE-Y685F mice presented higher levels of soluble VE-cadherin compared to wild-type counterparts in two induced arthritis model. Altogether, sVE and VE-cadherin phosphorylation present an array of interests for RA therapies as well as developing new therapeutic tools in RA and other vascular diseases.SAVOIE-SCD - Bib.électronique (730659901) / SudocGRENOBLE1/INP-Bib.électronique (384210012) / SudocGRENOBLE2/3-Bib.électronique (384219901) / SudocSudocFranceF

Caractérisation de la région promotrice du gène codant pour le récepteur du peptide insulinotrope dépendant du glucose humain

Thèse numérisée par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal

Analyse des mécanismes cellulaires et moléculaires mis en oeuvre dans les vaisseaux sanguins par les composants des fibres élastiques

Les fibres élastiques sont constituées d'élastine et de microfibrilles riches en fibrilline-1, dont les mutations génétiques respectives conduisent à des pathologies cardiovasculaires graves impliquant l'apparition de sténoses (syndrome de Williams-Beuren, WBS) ou d'anévrismes (syndrome de Marfan, MS) aortiques. Nous avons étudié et comparé les effets de l'élastine (kappa-élastine, kE et tropoélastine recombinante, rTE) et des microfibrilles (MF et le fragment PF14 de la fibrilline-1) sur la signalisation dans les cellules vasculaires. Sur les cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine (HUVEC), la kE, la rTE et les MF activent le complexe récepteur de l'élastine (ECR) et les intégrines, la production de messagers intracellulaires et, avec une efficacité variable, des canaux calciques de la membrane cellulaire et du réticulum endoplasmique, mobilisant à la fois le calcium intra- et extra-cellulaire. Les microfilaments d'actine ne sont impliqués que dans le cas de la signalisation liée à l'élastine. Toutes les protéines étudiées augmentent aussi la prolifération et l'adhésion des HUVEC, ainsi que la production ou la dégradation à travers l'activation de métalloprotéases matricielles (MMP)- de plusieurs composés de la matrice extracellulaire. La capacité de migration des HUVEC est augmentée par la kE, rTE et PF14 alors qu'elle est diminuée par les MF. Aussi, chez le rat, ces protéines induisent une synthèse de l'oxyde nitrique (NO) par les cellules endothéliales, résultant en une vasodilatation aortique. PF14 présente de plus un pouvoir vasocontractant en absence de l'endothélium indiquant qu'il stimule aussi particulièrement les cellules musculaires lisses vasculaires (CMLVs). Pour étudier ces interactions sur modèle cellulaire, un protocole de culture de CMLVs d'aorte de souris adultes, âgées, ou déficientes pour les gènes de l'élastine ou de la fibrilline-1, a été mis au point. Les protéines des fibres élastiques produisent dans ces cellules une montée du niveau de calcium intracellulaire dont les caractéristiques varient suivant la protéine, l'âge ou le génotype des animaux. Ces travaux confirment le rôle majeur de l'élastine et de la fibrilline-1 dans la régulation des fonctions des cellules vasculaires. Malgré quelques différences, les fragments d'élastine et de fibrilline-1 stimulent souvent de manière similaire les cellules vasculaires. Ceci suggère que les symptômes contradictoires observés dans les MS et WBS mettent aussi en cause des facteurs additionnels, probablement liés à d'autres signalisations, par exemple à la voie du TGF-b ou aux différences de mécanisme et de cinétique du dépôt de l'élastine et de la fibrilline-1 lors de l'assemblage des fibres élastiques.Elastic fibres are composed of elastin and fibrillin-1 rich microfibrils, whose genetic mutations result in severe cardiovascular pathologies characterized by aortic stenosis (Williams syndrome, WS) or aneurysm (Marfan Syndrom, MS), respectively. We studied and compared the effect of elastin (kappa-elastin, kE and recombinant tropoelastin, rTE) and microfibrils (MF and PF14, fibrillin-1 fragment) on vascular cell signaling. In human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), kE, rTE and MF activated the elastin complex receptors (ECR) and integrins, the production of intracellular messengers and, with varying efficiencies, membrane and endoplasmic reticulum calcium channels, mobilizing both intra- and extra-cellular calcium. Actin microfilaments were involved only in the case of elastin signaling. All these proteins enhanced the proliferation and adhesion of HUVECs, as well as synthesis or degradation through matrix metalloproteinanse (MMP) activation- of several extracellular matrix components. HUVEC migration was enhanced by kE, rTE and PF14 and diminished by MF. Also, in rats, these proteins induced nitric oxide (NO) synthesis by endothelial cells, resulting in aortic vasodilatation, although PF14 had an additional constrictor effect on endothelium-free aorta, indicating that PF14 also stimulates vascular smooth muscle cells (VSMCs). To study these interactions in a cellular model, we designed a new protocol to culture VSMCs from aorta of adult, aged, and elastin or fibrillin-1 knock-out mice. Elastic fibre proteins induced an increase in VSMC intracellular calcium level, which characteristics varied with the protein, age and genotype of mice. These findings confirm the major role of elastin and fibrillin-1 in the regulation of vascular cell functions. Despite some differences, elastin and fibrillin-1 often stimulated vascular cells similarly. This suggests that the onset of the contradictory features observed in MS and WS also involve additional factors, probably linked to other signaling pathways, for instance the TGF-b pathway or the differences in the mechanism and kinetic of elastin and fibrillin-1 depositions during elastic fiber assembly.SAVOIE-SCD - Bib.électronique (730659901) / SudocGRENOBLE1/INP-Bib.électronique (384210012) / SudocGRENOBLE2/3-Bib.électronique (384219901) / SudocSudocFranceF