Cambios morfológicos de odontoblastos y fibroblastos en pulpas sanas y pulpas con diagnóstico de pulpitis reversible en dientes de humanos jóvenes

77 p.La pulpa dental es un tejido conectivo laxo, con células especializadas en diferentes funciones que cumplen dentro del complejo pulpodentinario, destacando los odontoblastos y fibroblastos. Estos reaccionan frente a una injuria con cambios morfológicos e histopatológicos. No se han descrito cambios cuantitativos en un estado de salud y enfermedad.Se determinan las diferencias cuantitativas de odontoblastos y fibroblastos en pulpas sanas y con pulpitis reversible en dientes de humanos jóvenes mediante el método de estereología, analizando los parámetros de densidad de número, de volumen y de superficie.En base a lo estudiado, se concluye que existe un aumento en el número, volumen y superficie de odontoblastos y fibroblastos en pulpas de dientes diagnosticadas con pulpitis reversible en comparación a las células de piezas dentarias sanas

Synthesis and cytotoxic activity of geranylmethoxyhydroquinone derivatives

Indexación: Web of Science; ScieloEl geranilo-2 ,4-sintético nuevo methoxyhydroquinone 1 y el conocido geranilo-4 ,5 methoxyhydroquinone- 2 se prepararon por sustitución electrófila aromática (EAS) reacciones entre geraniol y 1,3,5-trimethoxyphenol utilizando BF 3 · Et 2 O como un catalizador. Además, los nuevos derivados geranylmethoxyhydroquinones (3-6) se obtuvieron mediante transformaciones químicas de 1 y 2. Los compuestos se han evaluado por sus actividades citotóxicas contra PC-3 línea celular humana de cáncer de próstata, MCF 7-y humano MDA-MB-231 las células de cáncer de mama líneas y dengue hemorrágico cutánea fibroblastos humanos. IC 50 valores para los compuestos 1 y 5 varió en el nivel mu M 80.http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-97072012000300005&lng=es&nrm=is

Atividade β-galactosidase associada com a senescência em fibroblastos do estroma ovariano in vitro

Introducción: Un campo de investigación creciente de la biología es la senescencia celular, mecanismo que ha sido asociado -bajo determinadas circunstancias- con la transformación maligna.Teniendo en cuenta la elevada incidencia de cáncer ovárico y su génesis preferencial a partir del epitelio superficial del ovario, así como la posibilidad de ocurrencia de una transición epiteliomesenquimática, se evaluó, tanto el crecimiento in vitro de los fibroblastos del estroma cortical, como la actividad a pH 6 de la β-galactosidasa, enzima cuya expresión ha sido clásicamente considerada como marcador de senescencia replicativa. Metodología: 48 muestras de fibroblastos de la corteza ovárica provenientes de donantes sin antecedentes de cáncer fueron cultivadas en forma seriada hasta el final de su vida replicativa. Mediante el método quimioluminiscente, en cada pase fue cuantificada la actividad β-galactosidasa a pH 6. Como control se utilizaron cultivos de células del epitelio superficial ovàrico de las mismas donantes. La actividad enzimática fue también evaluada en fibroblastos previamente inducidos a senescencia con peróxido de hidrógeno. Resultados: Las lecturas de actividad enzimática, analizadas en conjunto con la capacidad replicativa, indican que los cultivos de fibroblastos alcanzaron el estado senescente hacia los pases 4-5, lo que también ocurrió con las células epiteliales. Los fibroblastos inducidos a senescencia mostraron valores variables de actividad enzimática. Conclusiones: La semejanza entre los fibroblastos y las células epiteliales en cuanto al inicio de la senescencia podría estar relacionado con la transición epitelio-mesenquimática que ha sido descrita como factor de riesgo de cáncer derivado del epitelio superficial ovàrico. Valores bajos de actividad β-galactosidasa podrían sugerir que, en algunos casos, ocurrió inactivación de las vías de respuesta al estrés oxidativo.Introduction: A growing biological research field is the cellular senescence, a mechanism that has been associated, under certain circumstances, with malignant transformation. Given the high incidence of ovarian cancer and its main origin from the ovarian surface epithelium, as well as the possibility that an epithelial-mesenchymal transition occurs, we evaluated both the in vitro growth of stromal fibroblasts from the ovarian cortex and their β-galactosidase activity at pH 6, enzyme whose expression is considered as a marker of replicative senescence. Methods: 48 samples of ovarian cortical fibroblasts from donors without a history of cancer were serially cultured until the end of their replicative life. β-galactosidase activity at pH 6 was quantified in each passage by the chemiluminiscent method. As control, we used ovarian epithelial cell cultures from the same donors. The enzyme activity was also evaluated in fibroblasts previously induced to senescence by exposure to hydrogen peroxide. Results: The analysis of the enzyme activity and the replicative capacity taken together showed that the fibroblast cultures reached the senescent state at passages 4-5, as what happened with the control epithelial cells. Fibroblasts induced to senescence showed high variability in the values of enzymatic activity. Conclusions: The similarity between both types of cells in reaching the senescent state deserves to be taken into account in relation to the epithelialmesenchymal transition that has been proposed to explain their behavior in the genesis of cancer arising from ovarian surface epithelium. Low β-galactosidase activity values at pH 6 would suggest possible inactivation of the response pathways to oxidative stress.Introdução: um campo de pesquisa crescente da biologia é a senescência celular, mecanismo que tem sido associado, sob determinadas circunstancias, com a transformação maligna. Tendo em conta a elevada incidência de câncer ovariano e sua gênese preferencial a partir do epitélio superficial do ovário, assim como a possibilidade de ocorrência de uma transição epitélio-mesenquimática, se avaliou, tanto o crescimento in vitro dos fibroblastos do estroma cortical, como a atividade a pH 6 da β-galactosidase, enzima cuja expressão tem sido classicamente considerada como marcador de senescência replicativa. Metodologia: 48 amostras de fibroblastos do córtex ovariano provenientes de doadores sem antecedentes de câncer foram cultivadas em forma seriada até o final de sua vida replicativa. Mediante o método quimioluminescente, em cada passe foi quantificada a atividade β-galactosidase a pH 6. Como controle utilizou-se cultivos de células do epitélio superficial ovariano das mesmas doadoras. A atividade enzimática foi também avaliada em fibroblastos previamente induzidos a senescência com peróxido de hidrogeno. Resultados: as leituras da atividade enzimática, analisada em conjunto com a capacidade replicativa, indicam que os cultivos de fibroblastos alcançaram o estado senescente para os passes 4-5, o que também ocorreu com as células epiteliais. Os fibroblastos induzidos a senescência mostraram valores variáveis de atividade enzimática. Conclusões: as semelhanças entre os fibroblastos e as células epiteliais em quanto ao inicio da senescência poderia estar relacionado com a transição epitélio-mesenquimática que tem sido descrita como fator de risco de câncer derivado do epitélio superficial ovariano. Valores baixos de atividade β-galactosidase poderiam sugerir que, em alguns casos, ocorreu inativação das vias de resposta ao estresse oxidativo

P2 purinoceptors signaling in fibroblasts of rat subcutaneous tissue

Mestrado em Biologia Molecular e CelularO tecido conjuntivo parece estar envolvido na génese de diversas condições patológicas. O aumento da rigidez do tecido conjuntivo, resultante da fibrose, pode constituir um factor importante no mecanismo patogénico da dor crónica resistente a fármacos (Langevin & Sherman, 2007). Por outro lado, os nucleótidos extracelulares parecem estar envolvidos na fisiopatologia da dor crónica (Burnstock, 2001). Assim, este estudo teve como objectivo averiguar o efeito dos nucleótidos de adenina e uridina na proliferação e síntese de colagénio tipo I de fibroblastos do tecido subcutâneo de rato em cultura. Os resultados obtidos mostram que a incubação com UTP (0.3-100 M, n=5) induz um aumento da proliferação e da produção de colagénio tipo I, o qual é dependente da concentração. Contrariamente, o agonista selectivo dos receptores P2Y2, o MRS 2768 (10 μM, n=3), não teve qualquer efeito no que se refere à proliferação, mas diminuiu significativamente (P<0.05) a síntese de colagénio tipo I. Uma vez que o aumento da produção de colagénio induzida pelo UTP (100 μM) foi proporcional ao aumento do número de células (proliferação celular),podemos especular que este aumento se deve ao aumento do número de células per si do que a uma maior actividade sintética de cada célula. Assim, ao normalizar os valores do colagénio tipo I em relação aos valores obtidos do MTT para os mesmos momentos/dias, deixamos de observar diferenças estatisticamente significativas entre o controlo e as células expostas ao UTP. Uma vez que os receptores P2Y2 não parecem estar envolvidos nesta resposta do UTP (100 μM), esta poderá estar a ser mediada pela activação dos receptores P2Y4 e/ou P2Y6. Considerando que o RB-2 (10 μM, n=5), um antagonista não selectivo que actua preferencialmente no subtipo de receptores P2Y4, não foi capaz de modificar a resposta induzida pelo UTP (100 μM), os receptores P2Y4 parecem também não estar envolvidos. Por outro lado, o MRS 2578 (100 nM), um antagonista selectivo dos receptores P2Y6, atenuou de forma significativa o aumento induzido pelo UTP (100 μM). A corroborar os nossos resultados, uma análise imunocitoquímica mostrou uma imunorreactividade positiva contra os receptores P2Y2 e P2Y6, mostrando um padrão de marcação citoplasmático/membranar, o qual é típico para este tipo de receptores, ao contrário do padrão nuclear exibido pelo anticorpo contra os receptores P2Y4. Relativamente ao envolvimento dos receptores sensíveis ao ADP, os resultados obtidos mostraram que o ADPβS (10-100 μM, n=3-6), um análogo estável do ADP, não parece induzir efeitos significativamente diferentes (P>0.05) na proliferação celular. Contudo, a sua incubação continuada aumentou a produção de colagénio tipo I de forma dependente da concentração (P<0.05). De modo a identificar os receptores purinérgicos envolvidos neste efeito, testamos o ADPβS (100 μM) na presença do MRS 2179 (0.3 μM), do AR-C 66096 (0.1 μM), e do MRS 2211 (10 μM), os quais antagonizam selectivamente os receptores P2Y1, P2Y12 e P2Y13, respectivamente. O efeito facilitatório induzido pelo ADPβS (100 μM) foi atenuado de forma significativa na presença do antagonista dos receptores P2Y1, o MRS 2179 (0.3 μM, n=3), sem ser afectado pelo antagonista dos receptores P2Y12, o AR- C 66096 (0.1 μM, n=3). Pelo contrário, o MRS 2211 (10 μM, n=2) potenciou o aumento da produção de colagénio induzida pelo ADPβS (100 μM), indicando assim que a síntese de colagénio tipo I induzida pelo receptor P2Y1 pode estar a ser parcialmente influenciada por uma activação síncrona do receptor inibitório P2Y13. Por último, uma análise por imunocitoquímica mostrou que estas células apresentam imunorreactividade positiva para os receptores P2Y1 e P2Y13, exibindo um padrão citoplasmático/membranar, contrariamente ao padrão nuclear dos receptores ostentado pelo anticorpo contra os receptores P2Y12. Concluindo, a remodelação da fáscia superficial induzida pelos fibroblastos parece ser regulada por um balanço entre a activação dos receptores P2Y2 e P2Y6, assim como dos receptores P2Y13 e P2Y1. Clarificar as vias que conduzem ao processo de fibrose pode representar uma oportunidade para esclarecer o seu envolvimento na patogénese da dor crónica musculo-esquelética, bem como ser útil no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas.Connective tissue may be involved in the pathogenesis of a wide variety of disease conditions. Increased connective tissue stiffness due to fibrosis may be an important link to the pathogenic mechanism leading to drug-resistant chronic pain (Langevin & Sherman, 2007). In addition, extracellular nucleotides seem to be involved in the pathophysiology of chronic pain (Burnstock, 2001). Therefore, we aimed at investigating the effect of adenine and uridine nucleotides on the proliferation and synthesis of type I collagen by rat fibroblasts from subcutaneous connective tissue. The results showed that continuous incubation of UTP (0.3-100 M, n=5) concentration-dependently increased fibroblasts proliferation, as also increased the synthesis of type I collagen above the control levels. Conversely, the selective P2Y2 agonist, MRS 2768 (10 μM, n=3), was devoid of effect in what concerns proliferation, but significantly (P<0.05) decreased type I collagen synthesis. Since the increase in type I collagen synthesis induced by UTP (100 μM) was proportional to the increase in the amount of cells in the culture (fibroblasts proliferation), we speculated that such an increase could be related to the increase in the cell number rather than a higher synthetic activity. Thus, we performed a more detailed data analysis, in which we normalized type I collagen production taking into consideration the MTT values obtained at the same time points, and we observed no longer significant differences between control and UTP-exposed cells. Discounting the contribution of MRS 2768-sensitive P2Y2 receptors, UTP (100 μM)-induced increase in cells proliferation could be due to P2Y4 and/or P2Y6 receptor activation. Since RB-2 (10 μM, n=5), a non-selective antagonist that acts preferentially on the P2Y4 subtype, did not modify the effect of UTP (100 μM), P2Y4 does not seem to be involved. In turn, MRS 2578 (100 nM), which is a selective P2Y6 antagonist, significantly attenuated UTP (100 μM)-induced increase. To corroborate our results, an immunocytochemistry analysis showed a positive immunoreactivity against the P2Y2 and P2Y6 receptors exhibiting a cytoplasmic/membrane labeling pattern, which is typical for those receptors in many different cells, conversely to the nuclear labeling pattern exhibited by the antibody against the P2Y4. To investigate the involvement of ADP-sensitive P2 receptors on cell proliferation and extracellular matrix production, fibroblast cultures were continuously incubated with the stable ADP analogue, ADPβS (10-100 μM). Results obtained with ADPβS (10-100 μM, n=3-6) showed no significant (P>0.05) differences in fibroblast cells proliferation. However, a continuous incubation with ADPβS (10-100 μM, n=2-5) concentration-dependently increased type I collagen production by fibroblasts (P<0.05). In order to identify which purinoceptor(s) that could be mediating this effect, we tested ADPβS (100 μM) in the presence of MRS 2179 (0.3 μM), AR-C 66096 (0.1 μM), and MRS 2211 (10 μM), which antagonize selectively ADP-sensitive P2Y1, P2Y12 and P2Y13 receptors, respectively. The facilitatory effect of ADPβS (100 μM) was significantly attenuated in the presence of the P2Y1 antagonist, MRS 2179 (0.3 μM, n=3), without being affected by the P2Y12 antagonist, AR- C 66096 (0.1 μM, n=3). In contrast, MRS 2211 (10 μM, n=2) potentiated the effect of ADPβS (100 μM) on type I collagen synthesis, thus indicating that the P2Y1-receptor-induction of type I collagen synthesis may be partially counteracted by synchronous activation of the inhibitory P2Y13 receptor. Finally, an immunocytochemistry analysis showed that these cells exhibit immunoreactivity to P2Y1 and P2Y13 receptors with a cytoplasmic/membrane staining pattern, conversely to the nuclear pattern of P2Y12. Concluding, a delicate balance between the activation of P2Y2 and P2Y6, as well as P2Y13 and P2Y1 purinoceptors, might regulate fibroblast’s induced superficial fascia remodeling. Targeting the pathways leading to fibrosis may represent an opportunity to clarify its involvement in the pathogenesis of musculoskeletal chronic pain and it may be useful for designing novel therapeutic strategies to overcome this disease

Ação do β-Cariofileno sobre a viabilidade e proliferação de Fibroblastos

Trabalho de Conclusão de Curso apresentado ao Instituto Latino-Americano de Ciências da Vida e da Natureza da Universidade Federal da Integração Latino-Americana, como requisito parcial à obtenção do título de Bacharel em Biotecnologia. Orientador: Prof. Dr. Arthur da Silveira PrudenteA pele é um órgão extremamente importante, com inúmeras funções biológicas e uma delas é nos proteger. Quando ocorre injúria neste tecido, a pele sofre vários processos biológicos, entre eles destaca-se o processo de inflamação, a proliferação e a reepitelização, no qual possuem como finalidade a cicatrização. Este trabalho de conclusão de curso, consiste em fazer uma breve pesquisa do potencial do agonista β-cariofileno, em ativar o receptor canabinóide 2 e assim melhorar o processo de cicatrização de feridas. A pesquisa será baseada em testes realizados in vitro em células fibroblásticas retiradas de pulmão de rato, de linhagem MRC-5. Durante os testes foi utilizado um método simples de MTT para avaliar a viabilidade e a proliferação das células MRC-5 quando em contato com diferentes tempos e concentrações do composto β-cariofileno. Observou-se que o agonista β-cariofileno possui a característica de reduzir o processo inflamatório, induzir a proliferação de fibroblasto, podendo melhorar o processo de reepitelizaçãoLa piel es un órgano extremadamente importante con numerosas funciones biológicas y una de ellas es protegernos. Cuando se produce una lesión en este tejido, la piel sufre varios procesos biológicos, entre ellos el proceso de inflamación, proliferación y reepitelización, en el cual su propósito de curar. Este trabajo de curso consiste en una breve investigación del potencial del agonista de β-cariofileno, activando el receptor 2 de cannabinoides y mejorando así el proceso de curación de heridas. La investigación se basará en pruebas in vitro en la cepa MRC-5 de células fibroblásticas de pulmón de ratón. Se usó un método MTT simple durante las pruebas para evaluar la viabilidad y la proliferación de las células MRC-5 cuando están en contacto con diferentes tiempos y concentraciones del compuesto de β-cariofileno. Se observó que el agonista de β-cariofileno tiene la característica de reducir el proceso inflamatorio, inducir la proliferación de fibroblastos y puede mejorar el proceso de reepitelizació

Análise do tratamento de sequelas de queimaduras em crianças.

Trabalho de Conclusão de Curso - Universidade Federal de Santa Catarina. Curso de Medicina. Departamento de Pediatria

Efeitos citotóxicos e genotóxicos das ligas de solda de prata em ortodontia: revisão sistemática

Foi realizada uma revisão sistemática dos efeitos citotóxicos e genotóxicos das ligas de solda de prata em Ortodontia. Para tanto, foi efetuada uma busca sistemática nas bases de dados PubMed, EMBASE, Web of Science e Biblioteca Cochrane. Foi pesquisado na literatura cinza os anais da Sociedade Brasileira de Pesquisa Odontológica (SBPqO) e os encontros anuais da American Association of Orthodontists (AAO). Os artigos encontrados foram submetidos a um critério de seleção e elegibilidade por dois pesquisadores de maneira cega e independente. Após a seleção dos estudos, uma busca manual foi realizada nas referências destes e foram extraídos os dados dos estudos através de fichas padronizadas. Foram encontrados no total 76 artigos. Destes, 64 foram excluídos, pois não preencheram os critérios de elegibilidade. Os 12 estudos remanescentes foram selecionados para o presente trabalho. Além disso, outros três artigos foram incluídos através da busca manual. Dois artigos encontrados na literatura cinza foram excluídos, pois eram repetidos. O nível de concordância entre os pesquisadores na seleção dos estudos foi considerado adequado (kappa=0,916) e para a elegibilidade dos estudos foi muito preciso (kappa=1). Após avaliação dos dados extraídos concluiu-se que ligas de solda de prata podem provocar efeitos citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos.A systematic review was performed on the cytotoxic and genotoxic effects of silver solder alloys in orthodontics. The search was conducted through medical databases, PubMed, EMBASE, Web of Science and Cochrane Library. The search of gray literature included the annals of the meetings of the Brazilian Society for Dental Research (SBPqO) and of the American Association of Orthodontists (AAO). The articles found were submitted to selection criteria and eligibility by two independent blind researchers. Afterwards, a manual search was conducted on articles’s references and study data were extracted by standardized forms. Sixty-four out of 76 articles were excluded because they did not reach the eligibility criteria. The remaining 12 articles and 3 other raised from manual search were included in this study. Two articles found on gray literature were repeated, though excluded. The level of agreement between researchers was adequate in the selection criteria (kappa = 0. 916) and very precise for the eligibility (kappa = 1). As a conclusion of the systematic review, the silver solder alloy may cause cytotoxic, mutagenic and genotoxic effects when applied on orthodontic treatment

Uso tópico del cobre y la plata en el tratamiento de heridas : revisión bibliográfica

El tratamiento de las heridas es considerado de gran interés en el sistema de salud, tanto por el alto número de pacientes afectados, como por la cantidad del presupuesto que se destina a ello. Las infecciones por microorganismos empeoran y retrasan la cicatrización, por lo que la aplicación de metales como el cobre y la plata que demuestran ser efectivos contra infecciones multirresistentes, se convierten en una gran alternativa al tratamiento tradicional. En esta revisión bibliográfica se recogen algunos de los últimos estudios que analizan los efectos del cobre y la plata en la curación de heridas. También se analizan sus principales ventajas e inconvenientes y se estudian distintos productos que los tienen en su composición. El cobre destaca por sus características angiogénicas que aceleran la cicatrización de la herida, su poder antimicrobiano y la baja prevalencia de complicaciones y reacciones adversas que produce. La plata es considerada como el antiséptico ideal, siendo efectiva contra toda clase de microorganismos infecciosos. Aunque presenta mayor número de reacciones adversas que el cobre y sus productos únicamente son rentables en tratamientos prolongados en el tiempo, es un elemento muy eficaz en la prevención y tratamiento de infecciones y su uso es muy recomendable.OtroGrado en Enfermerí

Desarrollo de cultivos de tejidos celulares en reptiles y/o anfibios para su uso en citogenética

Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxí