Colonization, sporulation and phenotypic and molecular characterization of arbuscular mycorrhizal fungi kept in host culture

Abstract

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da aplicação do isoflavonóide formononetina na colonização e esporulação, e caracterizar fenotipicamente e genotipicamente por meio de PCR-DGGE 36 isolados de fungos micorrízicos arbusculares mantidos em vasos de cultivo na coleção do Laboratório de Microbiologia do Solo do Departamento de Ciência do Solo da Universidade Federal de Lavras, Minas Gerais, Brasil. O estudo foi conduzido em vasos de cultivo (500g) com Brachiaria decumbens em mistura desinfestada de solo e areia (2:1). O efeito da formononetina foi avaliado pela aplicação de 1mg por vaso de MycoformTM (produto comercial da PHC, Inc) ao solo por ocasião da repicagem das plantas e inoculação e aos dois meses de crescimento, em comparação a um tratamento sem a aplicação do produto. Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente casualizado com cinco repetições. A colonização das raízes e a densidade de esporos em amostras coletadas diretamente dos vasos foram avaliadas após cinco meses de crescimento. A caracterização fenotípica e molecular foi conduzida para os isolados que foram capazes de multiplicar. A analise molecular foi feita com base na discriminação específica da região V9 do 18S rDNA. A colonização e esporulação variou muito dentre e entre as espécies e os isolados puderam ser agrupados em aqueles que esporularam abundantemente, moderadamente e fracamente. Treze isolados demonstraram sucesso na multiplicação e 31% destes isolados responderam a aplicação de MycoformTM aumentando a taxa de colonização em até 27% e 54% tiveram sua esporulação aumentada em até 54%. A caracterização morfológica dos esporos está de acordo com as descrições originais das respectivas espécies. A avaliação molecular por PCR-DGGE também permitiu a diferenciação das espécies e não revelou qualquer diferença entre os isolados da mesma espécie corroborando com a identificação fenotípica