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Pesquisa de anticorpos IgM anti-Toxoplasma gondii por meio de técnica imunoenzimática reversa Reverse IgM enzyme-linked immunosorbent assay (Reverse IgM-ELISA) for toxoplasmosis serodiagnosis

By José Roberto Mineo, Mário Endsfeldz Camargo, Antonio Walter Ferreira and Gastão Almeida

Abstract

Um teste imunoenzimático reverso foi padronizado utilizando-se como fase sólida, microplacas de polivinil sensibilizadas com anticorpos anti-IgM.7 Estas foram incubadas seqüencialmente com alíquotas de soros de pacientes com suspeita de toxoplasmose aguda, antígeno solúvel de Toxoplasma gondii, conjugado peroxidase F (ab')2 anti-toxoplasma e substrato enzimático. A atividade enzimática foi determinada por leitura espectrofotométrica, considerando-se como títulos dos soros a máxima diluição fornecendo valores de absorbância maiores que os obtidos com a menor diluição do soro padrão não-reativo. Em 69 amostras de soros de pacientes com toxoplasmose aguda, a média geométrica dos títulos no teste ELISA-Reverso IgM foi superior à de todos os outros testes para anticorpos IgM, não se observando resultados negativos falsos devidos a altos títulos de IgG específica. Não foi encontrada, também, reatividade cruzada em nenhuma das 104 amostras de soros de pacientes com outras patologias, inclusive em amostras contendo fator reumatóide IgM.<br>A Reverse IgM enzyme — linked immunosorbent assay (Reverse-IgM ELISA) was described in which polyvinyl microplates were sensitized with anti-immunoglobulin M (IgM) antibodies and then sequentially allowed to react with patient's serum, Toxoplasma gondii soluble antigen, peroxidase — labeled specific F(ab')2 fragment and substrat. Measurement of activity of the solid phase bound enzyme conjugate was done by spectrofotometric reading of the final developed color. In a group of 69 sera samples from individuals with recently acquired toxoplasmosis, Reverse-IgM ELISA was positive in every case, showing higher geometric mean titer than others conventional serological tests. Furthermore false-negative IgM samples presented positive Reverse-IgM ELISA results even without adsorption with Staphylococcus aureus protein A . In a group of 104 sera samples from individuals with others pathologies, no interference was observed, even in the false-positive IgM samples due to the presence of IgM rheumatoid factor

Topics: Toxoplasmose, Diagnóstico, Sorologia, Imunoenzimologia reversa, LCC:Medicine (General), LCC:R5-920, LCC:Medicine, LCC:R, DOAJ:Medicine (General), DOAJ:Health Sciences
Publisher: Instituto de Medicina Tropical
Year: 1986
DOI identifier: 10.1590/S0036-46651986000100002
OAI identifier: oai:doaj.org/article:02c6c855ea634b6483537960b37844cc
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