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Radiometric detection of metabolic activity of Paracoccidioides brasiliensis and its susceptibility to amphotericin B and diethylstilbestrol Detecção radiométrica da atividade metabólica do Paracoccidioides brasiliensis e da sua sensibilidade à Anfotericina B e ao Dietilestilbestrol

By Edwaldo E. Camargo, Maria K. Sato, Gilda M. B. Del Negro and Carlos da Silva Lacaz

Abstract

Paracoccidioidomycosis (South American blastomycosis) is a systemic disease, strikingly more frequent in males, caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis. A radiometric assay system has been applied to study the metabolic activity and the effect of drugs on this fungus "in vitro". The Y form of the yeast, grown in liquid Sabouraud medium was inoculated into sterile reaction vials containing the 6B aerobic medium along with 2.0 &#956;Ci of 14C-substrates. Control vials, prepared in the same way, contained autoclaved fungi. To study the effects of amphotericin B (AB) (0.1 and 10 &#956;g/ml) and diethylstilbestrol (DSB) (1.0, 5.0 and 10 &#956;g/ml) extra controls with live fungi and no drug were used. All vials were incubated at 35°C and metabolism measured daily with a Bactec instrument. 14CO2 production by P. brasiliensis was slow and could be followed for as long as 50 days. AB at 10mg/ml and DSB at 5 &#956;g/ml inhibited the metabolism and had a cidal effect on this fungus. The results with DSB might explain the low incidence of the disease in females. This technique shows promise for studying metabolic pathways, investi gating more convenient 14C-substrates to expedite radiometric detection and for monitoring the effects of other drugs and factors on the metabolism of P. brasiliensis "in vitro".<br>A paracoccidiodomicose (blastomicose sul-americana) é uma doença sistêmica muito mais freqüente no sexo masculino, causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis. Um sistema radiométrico foi utilizado para estudar a atividade metabólica e o efeito deftrogas sobre este fungo "in vitro". A forma Y do fungo, cultivada em Sabouraud líquido, foi inoculada em frascos estéreis contendo o meio aeróbio 6B, juntamente com 2,0 uCi de substâncias marcadas com carbono-14. Frascos-controle, preparados da mesma forma, foram inoculados com fungos autoclavados. Para estudar os efeitos da anfotericina B (AB) (0,1 e 10 &#956;g/ml) e do dietilestilbestrol (DEB) (1, 5 e 10 &#956;g/ml), controles adicionais foram preparados, contendo fungos viáveis mas não a droga. Todos os frascos foram incubados a 35°C e o metabolismo medido diariamente com uma máquina Bactec. A produção de 14CO2 pelo P. brasiliensis foi lenta e pôde ser acompanhada por 50 dias. Concentrações de 10 &#956;g/ml de AB e 5 &#956;g/ml de DEB inibiram o metabolismo e tiveram efeito fungicida. Os resultados com DEB poderiam explicar a baixa incidência da doença em mulheres. Esta técnica é promissora para estudar as vias metabólicas, investigar substâncias marcadas mais adequadas para tornar mais rápida a detecção radiométrica do fungo e para acompanhar os efeitos de outras drogas e fatores sobre o metabolismo do P. brasiliensis "in vitro"

Topics: Paracoccidioides brasiliensis, Radiometric assay, 14C-Substrates, Amphotericin B, Diethylstilbestrol, LCC:Medicine (General), LCC:R5-920, LCC:Medicine, LCC:R, DOAJ:Medicine (General), DOAJ:Health Sciences
Publisher: Instituto de Medicina Tropical
Year: 1987
DOI identifier: 10.1590/S0036-46651987000500005
OAI identifier: oai:doaj.org/article:b104e73659b04bf7b585355a7ac3d306
Journal:
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