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應用蛋公雞肝細胞於戴奧辛之生物檢測

By 楊子諒

Abstract

[[abstract]]環境荷爾蒙是一種體外的化學物質,當進入體內時會讓人體的內分泌系統誤認為荷爾蒙,與人體細胞中正常荷爾蒙受體結合,而干擾人體內分泌系統,造成對人體或各種發育的障礙。近年來,發現戴奧辛具有「環境荷爾蒙」的作用,嚴重影響環境生態與人類的健康而引起全世界的高度關切。 本研究利用蛋種雞場之淘汰蛋雛公雞建立雛雞肝細胞初代培養系統,藉由分析細胞色素1A (cytochrome P450 1A,CYP 1A)基因的表現量,來作為戴奧辛類化合物的含量指標。細胞培養先以含血清的Leibovitz-15 medium (10% FBS)培養一天,再以不含血清的培養液培養兩天,同時以不同濃度戴奧辛(10-5、10-4、10-3、10-2、10-1、100、101、102 nM)刺激兩天後,萃取細胞之RNA,利用反轉錄聚合酶連鎖反應(RT-PCR) 分析CYP 1A基因的表現量,以了解細胞對戴奧辛類化合物的反應。 由in vitro試驗結果顯示,肝細胞經10-5 ~102 nM之2,3,7,8-TCDD刺激後可誘導CYP 1A基因的表現,且產生有劑量效應(Dose-dependent response)。 本研究雖然無法提供戴奧辛類化合物的毒性當量或濃度,但由實驗結果可辨別出戴奧辛類化合物有無污染的定性反應,因此可作為傳統化學分析前期的快速檢測。未來戴奧辛類化合物的檢測可以生物快速篩選方式先行篩選,檢測出有戴奧辛類化合物存在之樣品,再進一步的以傳統化學分析來確認,如此可有效、快速的解決在短時間內需處理的污染事件,以保障消費者大眾的權益

Topics: 戴奧辛, 肝細胞初代培養, 細胞色素基因1A, 生物檢測法
Year: 2009
OAI identifier: oai:http://ir.lib.pccu.edu.tw/:987654321/1816
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