Analyse des propriétés d'un variant d'épissage de la cycline B et caractérisation d'un de ses partenaires

Abstract

La cycline B est un des régulateurs clef du cycle cellulaire, associée à Cdc2 elle formele MPF (Maturation Promoting Factor). Ce complexe contrôle la transition entre phases G2 etM du cycle cellulaire. Au laboratoire, un variant d'épissage de la cycline B d'oursin a étédécouvert. Il lui manque la partie C-terminale, dans laquelle certains résidus sont trèsconservés.Au cours de ce travail, le même variant a été cloné chez l'étoile de mer. Sespartenaires ont été recherchés par criblage de banque en double hybride chez la levure ainsiqu'en chromatographie d'affinité. Cette dernière technique a permis d'isoler une protéine de15kDa (P15) qui s'associe à la cycline B même en l'absence de Cdc2. Une particularité decette protéine est d'exister sous trois formes alléliques. La P15 est localisée au niveau dufuseau de division. Des exprériences de micro-injections ont montré qu'elle joue un rôle dansla sortie de méiose, vraisemblablement en liaison avec la dégradation de la cycline B.Parallèlement, le rôle des résidus manquant chez le variant d'épissage a été étudié parla mutagénèse du C-terminal de Clb2 de levure. Ces résidus sont importants pour lalocalisation de la cycline mais aussi pour son association correcte avec Cdc2