Lipidomic Analysis Using Ultrahigh-Performance Supercritical Fluid Chromatography-Mass Spectrometry

Abstract

Vysokoúčinná superkritická fluidní chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií s elektrosprejovou ionizací (UPHSFC/ESI-MS) je technika vhodná pro nepolární i polární látky, což je v lipidomické analýze velkou výhodou. Lipidy v krevní plasmě byly separovány do lipidových tříd pomoci kolony Acquity BEH UPC2 (100 mm × 3 mm, 1,7 µm) a gradientové eluce se složením mobilní fáze CO2 a směsi methanol – voda (99:1 v/v) obsahující 30 mM octan amonný. Během 6 minutové analýzy došlo k rozdělení lipidů do 9 tříd. Následná kvantifikace by měla sloužit ke srovnání lipidů v plazmě zdravých a nemocných jedinců.Ultrahigh-Performance Supercritical Fluid Chromatography with electrospray ionization mass spectrometry (UPHSFC/ESI-MS) is suitable for non-polar and polar substances, which is a great advantage in lipidomic analysis. Lipids in plasma were separated into lipid classes using an Acquity BEH UPC2 column (100 mm x 3 mm, 1,7 μm) and a gradient elution of the mobile phase of CO2 and methanol-water mixture (99:1 v/v) containing 30 mM ammonium acetate. During the 6 minute analysis lipids were divided into 9 lipid classes. Subsequent quantification should serve to compare lipids in the plasma of healthy and diseased individuals