Deteção molecular de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis em duas lontras (Lutra lutra, Linnaeus, 1758)

Coelho, A.C.

Figueira, Luis

Martins, Manuel

Matos, A.C.

Matos, M.

Pinto, M.L.

Álvares, S.

Figueira, Luís

Martins, M.V.

Repositório do Instituto Politécnico de Castelo Branco

IntroduçãoAs lontras (Lutra lutra, Linnaeus,1758) são mamíferos selvagens pertencentes à família Mustelidae. O estatuto de conservaçãoa nível global é considerado de “quase ameaçado”, embora em Portugal mantenha o estatuto de “pouco preocupante”.Contudo, no nosso país é uma espécie sujeita a proteção legal.DETEÇÃO MOLECULAR DE MYCOBACTERIUM AVIUM SUBSP. PARATUBERCULOSISEM DUAS LONTRAS (LUTRA LUTRA, LINNAEUS, 1758)Ana Cristina Matos 1*, Ana CláudiaCoelho,3 Sofia Álvares 3, Luís Figueira 1, Manuel Martins1, Maria de Lurdes Pinto 3, Manuela Matos21School of Agriculture, Polytechnic Institute of Castelo Branco, Portugal2IBB-Institute for Biotechnology and Bioengineering, Centre of Genomic and Biotechnology, University of Trás-os-Montes and Alto-Douro, Department of Genetics and Biotechnology3CECAV- Center for Animal Science and Veterinary, University of Trás-os-Montes and Alto-Douro, Department of Veterinary Sciences,Portugal*(acmatos@ipcb.pt)Material e MétodosColheram-se amostras de 2 animaisResultadosOs dois animais estudados apresentaram bactérias álcool-ácido resistentes compatíveis com Map (Fig.5). A técnica de PCRdetectou Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) nas duas lontras. Na fêmea, Map foi detectado no fígado, baço egânglio mesentérico. No macho detectou-se no rim, no gânglio mesentérico e retrofaríngeo (Fig.6). A cultura microbiológica foipositiva nos dois animais (Fig. 7).encontrados mortos por atropelamento (Fig.1),no concelho de Idanha-a-Nova, distrito deCastelo Branco (Fig.2), durante o ano de 2010.Uma lontra era fêmea e a outra era macho. Emambas, a idade estimada foi de 2 anos. Asamostras colhidas foram fígado, pulmão, baço,intestino, rim, gânglio mesentérico,retrofaríngeo, mediastínico, amígdalas e fezes(Fig.3). As amostras foram submetidas à técnicade PCR e à cultura em meios específicos .Figura 1- Lontras analisadasLutra lutraLutra lutraFigura 2- Concelho de Idanha-a-NovaREFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS:Beard P.M., Daniels M.J., Henderson D., Pirie A., Rudge K., Buxton D., Rhind S., Greig A., Hutchings M.R., McKendrick I., Stevenson K., Sharp J.M. (2001): Paratuberculosis infection of non-ruminant wildlife in Scotland. Journal of Clinical Microbiology, 39, 1517–1521.Beard P.M., Henderson D., Daniels M.J., Pirie A., Buxton D., Greig A., HutchingsM.R., McKendrick I., Rhind S., Stevenson K., Sharp J.M. (1999): Evidence of paratu¬berculosis in fox (Vulpes vulpes) and stoat (Mustela erminea). Veterinary Record, 145, 612–613.Greig A., Stevenson K., Henderson D., Perez V., Hughes V., Pavlik I., Hines M.E., McKendrick I., Sharp J.M. (1999): Epidemiological study of paratuberculosis in wild rabbits in Scotland. Journal of Clinical Microbiology, 37, 1746–1751.Kopecna, M., Trcka, I., Lamka, J.,Moravkova, M., Koubek, P., M. Heroldova, M. Mrlik, V., Kralova, A., I. Pavlik, I. (2008). The wildlife hosts of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in the Czech Republic during the years 2002–2007. Veterinarni Medicina, 53, 420–426. Nacy, C., Buckley, M. (2007). Mycobacterium avium paratuberculosis: Infrequent Human Pathogen or Public Health Threat? A Report From The American Academy Of Microbiology.Sivakumar, P., Tripathi, B.N., Singh, N., 2005. Detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in intestinal and lymph node tissues of water buffaloes (Bubalis bubalis) by PCR and bacterial culture. Veterinary Microbiology. 108, 263-270.Considerações FinaisEstes resultados preliminares confirmam as lontras como reservatório de Map no nosso país. Do nosso conhecimento, esta é aprimeira vez que se fez a detecção de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis em lontras em Portugal.Figura 7- Colónias em meioLowenstein com micobactina J eMidlebrook® 7H11Figura 4- Esfregaços com BAAR compatíveis com Mycobacterium spp. Figura 9 - Produtos de amplificação obtidos na PCR IS900. (M.M. - marcador molecular; Amostras; C+: controlo positivo; C-: controlo negativo). M.MM.MC+ C-M.MM.M

Figueira, L.

Repositório Científico do Instituto Politécnico de Castelo Branco

Introdução
As lontras (Lutra lutra, Linnaeus,1758) são mamíferos selvagens pertencentes à família Mustelidae. O estatuto de conservação
a nível global é considerado de “quase ameaçado”, embora em Portugal mantenha o estatuto de “pouco preocupante”.
Contudo, no nosso país é uma espécie sujeita a proteção legal.
DETEÇÃO MOLECULAR DE MYCOBACTERIUM AVIUM SUBSP. PARATUBERCULOSIS
EM DUAS LONTRAS (LUTRA LUTRA, LINNAEUS, 1758)
Ana Cristina Matos 1*, Ana CláudiaCoelho,3 Sofia Álvares 3, Luís Figueira 1, Manuel Martins1, Maria de Lurdes Pinto 3, Manuela Matos2
1School of Agriculture, Polytechnic Institute of Castelo Branco, Portugal
2IBB-Institute for Biotechnology and Bioengineering, Centre of Genomic and Biotechnology, University of Trás-os-Montes and Alto-Douro, Department of Genetics and Biotechnology
3CECAV- Center for Animal Science and Veterinary, University of Trás-os-Montes and Alto-Douro, Department of Veterinary Sciences,Portugal
*(acmatos@ipcb.pt)
Material e Métodos
Colheram-se amostras de 2 animais
Resultados
Os dois animais estudados apresentaram bactérias álcool-ácido resistentes compatíveis com Map (Fig.5). A técnica de PCR
detectou Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) nas duas lontras. Na fêmea, Map foi detectado no fígado, baço e
gânglio mesentérico. No macho detectou-se no rim, no gânglio mesentérico e retrofaríngeo (Fig.6). A cultura microbiológica foi
positiva nos dois animais (Fig. 7).
encontrados mortos por atropelamento (Fig.1),
no concelho de Idanha-a-Nova, distrito de
Castelo Branco (Fig.2), durante o ano de 2010.
Uma lontra era fêmea e a outra era macho. Em
ambas, a idade estimada foi de 2 anos. As
amostras colhidas foram fígado, pulmão, baço,
intestino, rim, gânglio mesentérico,
retrofaríngeo, mediastínico, amígdalas e fezes
(Fig.3). As amostras foram submetidas à técnica
de PCR e à cultura em meios específicos .
Figura 1- Lontras analisadas
Lutra lutra
Lutra lutra
Figura 2- Concelho de Idanha-a-Nova
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
Beard P.M., Daniels M.J., Henderson D., Pirie A., Rudge K., Buxton D., Rhind S., Greig A., Hutchings M.R., McKendrick I., Stevenson K., Sharp J.M. (2001): Paratuberculosis infection of non-ruminant wildlife in Scotland. Journal of Clinical Microbiology, 39, 1517–1521.
Beard P.M., Henderson D., Daniels M.J., Pirie A., Buxton D., Greig A., HutchingsM.R., McKendrick I., Rhind S., Stevenson K., Sharp J.M. (1999): Evidence of paratu¬berculosis in fox (Vulpes vulpes) and stoat (Mustela erminea). Veterinary Record, 145, 612–613.
Greig A., Stevenson K., Henderson D., Perez V., Hughes V., Pavlik I., Hines M.E., McKendrick I., Sharp J.M. (1999): Epidemiological study of paratuberculosis in wild rabbits in Scotland. Journal of Clinical Microbiology, 37, 1746–1751.
Kopecna, M., Trcka, I., Lamka, J.,Moravkova, M., Koubek, P., M. Heroldova, M. Mrlik, V., Kralova, A., I. Pavlik, I. (2008). The wildlife hosts of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in the Czech Republic during the years 2002–2007. Veterinarni Medicina, 53, 420–426. 
Nacy, C., Buckley, M. (2007). Mycobacterium avium paratuberculosis: Infrequent Human Pathogen or Public Health Threat? A Report From The American Academy Of Microbiology.
Sivakumar, P., Tripathi, B.N., Singh, N., 2005. Detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in intestinal and lymph node tissues of water buffaloes (Bubalis bubalis) by PCR and bacterial culture. Veterinary Microbiology. 108, 263-270.
Considerações Finais
Estes resultados preliminares confirmam as lontras como reservatório de Map no nosso país. Do nosso conhecimento, esta é a
primeira vez que se fez a detecção de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis em lontras em Portugal.
Figura 7- Colónias em meio
Lowenstein com micobactina J e
Midlebrook® 7H11
Figura 4- Esfregaços com BAAR compatíveis 
com Mycobacterium spp. 
Figura 9 - Produtos de amplificação obtidos na PCR IS900. (M.M. 
- marcador molecular; Amostras; C+: controlo positivo; C-: 
controlo negativo). 
M.M
M.MC+ C-
M.M
M.M


Portuguese

http://repositorio.ipcb.pt/bitstream/10400.11/3258/1/PosterIVJGB-Lontras.pdf

Deteção molecular de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis em duas lontras (Lutra lutra, Linnaeus, 1758)

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