AZEVEDO, H. C.

CARNEIRO, P. C. F.

CARVALHO, A. C. M. de

MARIA, A. N.

SANTOS, J. P.

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Redução da cinética espermática do sêmen de tambaqui após odescongelamentoRafael Venâncio de Araújo*, Alexandre Nizio Maria1, Jadson Pinheiro Santos2, Allan Charles Marques de Carvalho3, Hymerson Costa Azevedo1, Paulo César Falanghe Carneiro1* Pós-doutorando, Embrapa Tabuleiros Costeiros, Av. Beira Mar, 3250, 49025-040, Aracaju, SE; rafaelvaraujo@yahoo.com.br; 1Pesquisador Científico, Embrapa Tabuleiros Costeiros, Aracaju, SE; 2Mestrando em Biotecnologia, Universidade Federal de Sergipe; 3Mestrando em Zootecnia, Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão, SE.  Protocolos para a criopreservação do sêmen de peixes têm sido desenvolvidos em todo o mundo desde a década de 50. O processo de criopreservação pode ocasionar alguns danos às células espermáticas,  levando  a  queda  na  motilidade  e  na  velocidade  espermática  após  o descongelamento.  O  objetivo  do  presente  trabalho  foi  avaliar  a  queda  da  velocidade  e  da motilidade  espermática  do  sêmen  de  tambaqui  Colossoma  macropomum  após  o descongelamento. Foram utilizadas amostras seminais de 10 machos sexualmente maduros com peso médio de 7 kg. O sêmen foi coletado 10 h após indução hormonal com 2,0 mg de extrato bruto de hipófise kg-1 de  peso vivo.  Previamente à congelação,  as amostras foram avaliadas quanto à contaminação prévia e posteriormente verificaram-se as taxas de motilidade subjetiva de cada amostra em microscópio óptico após ativação com bicarbonato de sódio 125 mM. As amostras foram diluídas em solução de congelamento contendo glicose, metilglicol e gema de ovo na proporção 1:9 (sêmen:solução), sendo posteriormente envasadoas em palhetas de 0,5 mL, congeladas em vapor de nitrogênio líquido em botijão dry-shipper e transferidas para um botijão de nitrogênio líquido (-196°C). Para o descongelamento, as palhetas foram imersas em banho-maria a 60°C durante oito segundos. O programa  Sperm Class Analyser (SCA®) foi utilizado para avaliação da cinética espermática, sendo previamente programado para realizar avaliações a cada três segundos. Após ativação (4 µL de sêmen em 50 µL de solução de bicarbonato de sódio 125 mM) 3 µL da solução foi transferida para uma câmara Makler® previamente posicionada no charriot do  microscópio,  sendo todo  o  processo  desde  a  ativação  até  o  início  da  avaliação realizado em até 10 segundos. Foram avaliados a motilidade total (MT); motilidade progressiva (MP); velocidade curvilínea (VCL); velocidade linear progressiva (VSL) e velocidade média da trajetória (VAP) durante 40 segundos após a ativação. Os dados foram submetidos à análise de variância e, em caso de diferença significativa, foi aplicada a análise de regressão, ambos a 5% de significância,  pelo  software estatístico SISVAR. Observou-se queda na taxa de MT de 73% para  63%  durante  aos  primeiros  40  segundos  após  a  ativação  espermática,  apresentando comportamento quadrático (r²=0,96). Para a MP a queda na motilidade espermática em relação ao tempo após ativação foi mais acentuada de 53% para 6% apresentado comportamento linear (r²=0,98). Os valores médios da VCL, VSL e VAP reduziram linearmente de 106 µm s-1 para 53 µm s-1, 80 µm s-1 para 17 µm s-1 e 96 para 29 µm s-1 respectivamente (r²=0,99). Estes resultados são importantes para o processo de caracterização do sêmen criopreservado de tambaqui, pois a partir das equações de regressão podemos estimar a queda da velocidade espermática em função do tempo após a ativação e o momento em que os espermatozoides cessam seus movimentos, contribuindo assim para o sucesso do uso do sêmen congelado nos programas de reprodução artificial da espécie.Palavras-chave: cinética espermática, Colossoma macropomum, duração da motilidade, duração da velocidade, regressão.“Apoio: FAPITEC, CNPq e EMBRAPA”.  

Redução da cinética espermática do sêmen de tambaqui após o descongelamento.

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