BARBOSA, L. D.

BARROS, C. H. S. C.

CORDEIRO, M. F.

FERREIRA, V. C. D.

LOPES JÚNIOR, E. S.

LOPES, M. L. L. de A.

NASCIMENTO, T. V. C.

NOGUEIRA, D. M.

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

Uso de diferentes protocolos de superovulação na produção in vivo de embriões ovinos da raça Dorper explorados no Semiárido do Nordeste do Brasil.

Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da associação PVP-pFSH em diferentes pesos moleculares (10.000 e 40.000) sobre percentual de animais em estro, taxa de ovulação, taxa de recuperação embrionária, em ovelhas Dorper, quando exploradas no semiárido do Nordeste do Brasil

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  V Jornada de Iniciação Científica da UNIVASF V JIC/UNIVASF    20 e 21 de outubro de 2010 – Juazeiro – BA  Anais da V JIC/UNIVASF  1 V JIC USO DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO NA PRODUÇÃO IN VIVO DE EMBRIÕES OVINOS DA RAÇA DORPER EXPLORADOS NO SEMIÁRIDO DO NORDESTE DO BRASIL  Celso Henrique Souza Costa Barros1, Vinícia Carvalho Dourado Ferreira1, Luciana Dantas Barbosa1, Thiago Vinicius Costa Nascimento2, Daniel Maia Nogueira5, Maria Luciana Lira de Andrade-Lopes3, Mabel Freitas Cordeiro4, Edilson Soares Lopes Júnior4  1  Acadêmico (a) de Medicina Veterinária – Campus de Ciências Agrárias - UNIVASF, Rodovia BR 407, Km 12 Lote 543 - Projeto de Irrigação Nilo Coelho - S/N C1 2  Mestrando – Curso de Pós-Graduação em Ciência Animal – Campus de Ciências Agrárias - UNIVASF 3 Professora Assistente I - Colegiado de Medicina - UNIVASF, Campus Petrolina, Av. José de Sá Maniçoba, S/N, Centro, Petrolina-PE, CEP 56304-917 4 Professor(a) Adjunto(a) - Colegiado de Medicina Veterinária - Campus de Ciências Agrárias - UNIVASF  5 Pesquisador da Embrapa Semiárido- CPATSA  Introdução O FSH é caracterizado por uma meia-vida curta (Akbar et al., 1974), portanto, deve ser administrado pela injeção de doses múltiplas duas vezes ao dia por um período de 2-4 dias a fim de manter os níveis adequados na circulação sanguínea, para maximizar o recrutamento folicular. Sucessivas injeções superovulatórias podem resultar em estresse para os animais, o que se constitui num processo trabalhoso, portanto, economicamente desvantajoso. Recentes tentativas foram feitas para simplificar os protocolos de superovulação, reduzindo o número de doses de pFSH. Em vacas (Takedomi et al., 1993), tem sido mostrado que a superovulação pode ser induzida por uma única injeção de FSH dissolvida em polivinilpirrolidona (PVP). PVP é um polímero orgânico sintético com diferentes pesos moleculares (10.000, 40.000 ou 3,60,000). É utilizado para o processamento das chamadas drogas "de longa ação", devido às suas propriedades de se ligar e estabilizar muitas moléculas, prolongando assim a sua taxa de depuração in vivo. Assim, este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da associação PVP-pFSH em diferentes pesos moleculares (10.000 e 40.000) sobre percentual de animais em estro, taxa de ovulação, taxa de recuperação embrionária, em ovelhas Dorper, quando exploradas no semiárido do Nordeste do Brasil.   Materiais e Métodos O experimento foi realizado na Cabanha Qualitá, localizada em Juazeiro, Bahia. O município está localizado a 9°24’50” de latitude Sul e 40º30’10” de longitude Oeste, com precipitação média anual de 399 mm, distribuída entre os meses de novembro a maio. Foram utilizadas, como doadoras de embriões, 6 fêmeas ovinas da raça Dorper, as quais foram distribuídas ao acaso, segundo a idade, peso, escore corporal, condição e histórico reprodutivo. Ainda, utilizou-se um carneiro Dorper, como reprodutor, de fertilidade comprovada. Os animais foram submetidos a um regime semi-intensivo de produção. As doadoras de embriões foram distribuídas ao acaso em três grupos. No Grupo 1 (n = 2; T1), formado por fêmeas submetidas a um tratamento de sincronização do estro de 12 dias de impregnação progesterônica. Para tanto, no dia zero, foram inseridos dispositivos intravaginais impregnados com 60 mg de acetato de medroxiprogesterona (Progespon, PFIZER, Brasil). Além disso, as fêmeas deste grupo receberão, intramuscularmente e a partir de 48 horas antes da retirada da esponja, 400 UI de NIH-FSH-P1, fracionadas em seis doses decrescentes de NIH-FSH-P1 (Pluset, Pfizer, Brasil), a cada 12 horas (100/100, 50/50 e 50/50 mg) e 75ug de cloprostenol (Ciosin, Intervet Schering, Brasil). No Grupo 2 (n = 2; T2), as ovelhas foram submetidas ao mesmo protocolo empregado no Grupo Anais da V JIC/UNIVASF 2 1, porém o tratamento superovulatório foi feito através da aplicação única de 400 UI de NIH-FSH-P1 (Pluset, Pfizer, Brasil), dissolvidas em uma solução de PVP com peso molecular 10.000 a 30% (w/v) (Sigma–Aldrich Brasil Ltda., São Paulo, Brasil), 24 h antes da remoção da esponja. No Grupo 3 (n = 2; T3), as fêmeas foram submetidas ao mesmo protocolo empregado nos Grupo 1 e 2, porém a superovulação foi obtida através da aplicação única de 400 UI de NIH-FSH-P1 (Pluset, Pfizer, Brasil), dissolvidas em uma solução de PVP com peso molecular 40.000 a 30% (w/v) (Sigma–Aldrich Brasil Ltda., São Paulo, Brasil), 24 h antes da remoção da esponja. A colheita de embriões foi realizada pelo método de laparotomia. Em seguida, o lavado foi submetido à procura dos embriões em um estéreomicroscópio (SMZ 645, Nikon, Japão), sendo os embriões encontrados, avaliados quanto ao estádio de desenvolvimento e qualidade seguindo os critérios morfológicos da Sociedade Internacional de Transferência de Embriões, como embriões de grau I (excelente ou bom), II (regular), III (pobre) e IV (morto ou degenerado).  Resultados e Discussão  Todas as doadoras entraram em estro, num intervalo entre a retirada da esponja e o início do estro para o grupo controle foi de 36 horas. Porém, D’Alessandro et al. (2001) obtiveram início de estro para o grupo controle de 27,9 ± 2,6 h, administrando 250 UI. No presente estudo, as ovelhas do grupo PVP 10 apresentaram início de estro de 32 horas e do grupo do PVP 40 apresentaram estro, 36 horas após a remoção da esponja. Já o grupo PVP 10 de D’Alessandro et al. (2001),  apresentaram como início do estro das ovelhas, 33,0 ± 5,1h e, para o grupo do PVP 40, o início do estro das ovelhas apresentaram um pouco tardio correspondendo a  40,2 ± 3,0 h em ovelhas Gentile di Puglia, não havendo diferenças significativas (P>0,05) entre tratamentos. Quanto ao percentual de fêmeas ovulando, no grupo controle e PVP 10 todas ovularam, 4 e 5 corpos lúteos, respectivamente, ao contrário do grupo PVP 40, que demonstrou 50% de ovulações e 1 corpo lúteo. No animal que não ovulou, pudemos observar que os ovários estavam completamente lisos e atípicos. Todas as doadoras não apresentaram superovulação e suas taxas de ovulação foram inferiores às relatadas por D’Alessandro et al. (2001) que, utilizando o PVP 40, encontraram taxas ovulação de 6,2 ± 1,2 e taxas de ovulação com o PVP 10 de 8,1 ± 1,7 e 8,9 ± 1,7 para o controle. Essa resposta ovariana indesejada no presente estudo pode ser atribuída às altas doses de FSH/ LH administrados. Isto tem sido observado mais freqüentemente em animais tratados com uma dose alta de gonadotrofinas, sugerindo que pode estar relacionado à estimulação excessiva do folículo e / ou a altos níveis circulantes de estrogênio durante a fase luteal inicial (Armstrong et al., 1982). Os 4 embriões coletados estavam nos estádios de mórula e com graus variando de I a III, similarmente ao encontrado por  D'Alessandro et al. (2001).  Conclusões Assim, podemos concluir que a alta dosagem de pFSH não permite verificar o verdadeiro efeito da associação pFSH-PVP 10 ou pFSH-PVP 40. Portanto, novos trabalhos com dosagens de pFSH em outras concentrações devem ser avaliadas.   Agradecimentos Agradeço ao Senhor Adilson Moura, proprietário da Cabanha Qualitá por todo o financiamento da pesquisa, a minha equipe do LAFIBRA pelo apoio na execução do trabalho, e a FAPESB, pela bolsa de iniciação científica que me foi concedida.  Referências AKBAR, A.M., NETT, T.M., NISWENDER, G.D. Metabolic clearance and secretion rates of gonadotropins at different stages of the estrous cycle in ewes. Endocrinology v.94, p.1318–1324,1974. ARMSTRONG, D.T; EVANS, G. Factors influencing success of embryo transfer in sheep and goats. Theriogenology, v. 19, p. 31-42, 1983. D’ALESSANDRO, A.G.; MARTEMUCCI, G.; COLONNA, M.A.; BORGHESE, A.; TERZANO, M.G.; BELLITTI, A. Superovulation in ewes by a single injection of pFSH dissolved in polyvinylpyrrolidone (PVP): effects of PVP molecular weight, concentration and schedule of treatment. Animal Reproduction Science, v.65, p.255–264, 2001. TAKEDOMI, T., AOYAGI, Y., KONISHI, M., KISHI, H., TAYA, K., WATANABE, G., SASAMOTO, S. Superovulation in Holstein heifers by a single injection of porcine FSH dissolved in polyvinylpirrolidone. Theriogenology v.39,p.327 ,1993. 

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/874723/1/Daniel.pdf

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