Natural compounds in the control of diabetes associated dyslipidemia : effects in the liver and small intestine

Tese de doutoramento em Ciências (área de especialização em Biologia)Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a metabolic disorder characterized by elevated blood glucose levels (hyperglycaemia) as a result of defects in both insulin secretion and/or action. T2DM represents a major cardiovascular risk since, in addition to hyperglycaemia, diabetic patients frequently present an abnormal plasma lipid profile (diabetic dyslipidemia). Since the disease is gaining epidemic proportions, novel or complementary therapeutic interventions that open new paths for addressing hyperglycaemia and dyslipidemia may offer promising results to the approaches presently available. The present thesis aimed to study the effects of two species of the genus Salvia (S. officinalis and S. fruticosa) in preventing diabetes and its associated complications. In addition, this work also intended to identify potential antidiabetic and lipid-lowering natural compounds from these medicinal plants, and to characterize their mechanisms of action in target organs relevant for diabetes progression (the liver and the small intestine). In order to study the antidiabetic potential of Salvia officinalis water extract (prepared as a tea), a pilot trial was performed in healthy human volunteers, selected from an age group considered at risk to develop diabetes (chapter 2). This tea consumption ameliorated the lipid profile and increased the antioxidant defences of the volunteers, without causing hypoglycaemia and/or hepatotoxicity. These data indicate that S. officinalis tea may offer compounds with beneficial properties on the prevention of cardiovascular diseases (CVDs), the major cause of morbidity and mortality in diabetic patients. In a subsequent study, using dietary carbohydrate manipulation, the effects of the aqueous extracts of Salvia fruticosa (SFT) and rosmarinic acid (RA), the major phenolic compound of S. officinalis and S. fruticosa extracts, in several pathways of the lipid metabolism were evaluated (chapter 3). While the low carbohydrate (Lc) diet showed to reduce plasma cholesterol levels, SFT treatment during the four days of the reintroduction of the normal (referred as the high carbohydrate, [Hc]) diet showed to increase HDL cholesterol levels. Both SFT and RA treatments showed a potential to regulate the expression of transcription factors that modulate several lipogenic and cholesterolgenic enzymes. In addition, RA drinking may be useful in modulating the hepatic fatty acid oxidation and preventing the carbohydrate-induced raise of intestinal cholesterol uptake. Chapter 4 is dedicated to the study of the effects of luteolin-7-glucoside (L7G), a dietary flavonoid also present in S. officinalis extract, on lipid metabolism in healthy rats. The results indicated that, like RA (chapter 3), L7G stimulated the expression of genes involved in fatty acid oxidation. In addition, L7G showed to downregulate the expression of the rate-limiting enzyme of the cholesterol biosynthetic pathway and to potentially repress the sterol regulatory element-binding protein-1 (SREBP-1) activity. Finally, a study was designed to evaluate the effects of glucose and RA in butyrate (NaBu)-differentiated HT-29 and spontaneously differentiated Caco-2 cells, frequently deemed good in vitro models of the intestinal epithelium (chapter 5). The results showed that the cellular growth and differentiation status of both cell lines were differently affected by glucose. A subcellular fractionation procedure revealed an increase of the sodium-glucose cotransporter 1 (SGLT1) protein at the apical membrane (BBM) and a raise on the facilitated glucose transporter 2 (GLUT2) in the remaining intracellular membrane fraction (including the basolateral membrane, [BLM]) of NaBudifferentiated HT-29 cells. RA did not affect SGLT1 expression in NaBu-differentiated HT-29 cells. This evidence disagrees with the previous in vivo observations, where RA showed to repress BBM SGLT1 expression in response to dietary carbohydrates. Despite disclosing the same intracellular location in Caco-2 cells, the expression and/or location of both SGLT1 and GLUT2 were not affected by glucose or insulin. Also in HT-29 cells, insulin did not modify SGLT1 expression suggesting that, the hormone, may not contribute to the translocation of the transporter from intracellular storage sites to the apical membrane. This work allowed us to conclude that the studied Salvia species and their natural compounds may be useful in preventing and controlling diabetes and associated complications, namely dyslipidemia.A diabetes de mellitus tipo 2 (T2DM) é uma doença metabólica caracterizada por elevados níveis de glucose no sangue (hiperglicemia), como consequência de falhas na secreção e/ou ação da insulina. A T2DM representa um fator de risco para o desenvolvimento de doenças cardiovasculares (DCVs) uma vez que, além da hiperglicemia, os diabéticos apresentam frequentemente níveis anormais de lípidos no sangue (dislipidemia diabética). Com a doença a atingir proporções epidémicas, surge a necessidade de encontrar terapias inovadoras ou complementares às metodologias tradicionalmente usadas no controlo da hiperglicemia e dislipidemia. A presente tese teve como objetivo estudar os efeitos de duas espécies do género de Salvia (S. officinalis e S. fruticosa) na prevenção da diabetes e suas complicações. Este trabalho pretendeu ainda identificar compostos naturais destas plantas medicinais com potencial antidiabético e de redução lipídica e caracterizar os seus mecanismos de ação no fígado e no intestino delgado, importantes alvos na progressão da diabetes. Com o intuito de estudar o potencial antidiabético do extrato aquoso de S. officinalis (preparado como chá), realizou-se um estudo piloto em voluntárias saudáveis que, de acordo com a idade, constituíam um grupo de risco para o desenvolvimento da diabetes (capítulo 2). O consumo deste chá melhorou o perfil lipídico e aumentou as defesas antioxidantes das voluntárias, sem no entanto provocar hipoglicemia e/ou hepatotoxicidade. Estas evidências indicam que o chá de S. officinalis pode conter compostos benéficos para a prevenção das DCVs, a principal causa de morbilidade e mortalidade em diabéticos. Num estudo posterior, recorreu-se à manipulação da dieta para avaliar os efeitos dos extratos aquosos de Salvia fruticosa (SFT) e do ácido rosmarínico (RA), o principal composto fenólico dos extratos de S. officinalis e S. fruticosa, em alguns processos do metabolismo lipídico (capítulo 3). A dieta pobre em hidratos de carbono (Lc) diminuiu os níveis plasmáticos de colesterol enquanto o SFT, administrado aquando da reintrodução da dieta normal (referida como rica em hidratos de carbono, [Hc]), aumentou os níveis de HDL no plasma. Ambos os tratamentos (SFT e RA) demonstraram efeitos na regulação de fatores de transcrição envolvidos na expressão de enzimas que controlam a síntese lipídica. Adicionalmente, o RA demonstrou ser eficaz na indução de genes envolvidos na oxidação hepática de ácidos gordos e na prevenção de uma excessiva absorção intestinal de colesterol, como resposta à manipulação da dieta. O capítulo 4 é dedicado ao estudo dos efeitos da luteolina-7-glucosideo (L7G), um flavonoide também presente no extrato de S. officinalis, no metabolismo lipídico em ratos saudáveis. Os resultados obtidos demonstraram que, tal como o RA (capítulo 3), a L7G induz a expressão de genes envolvidos na oxidação de ácidos gordos. Além disso, a L7G diminuiu a expressão da enzima reguladora da síntese endógena de colesterol e sugeriu uma potencial inibição da atividade do SREBP-1 (um fator de transcrição regulador da lipogénese). Por fim, realizou-se um estudo para avaliar os efeitos da glucose e do RA em células HT-29, diferenciadas com butirato (NaBu) e Caco-2, diferenciadas espontaneamente em cultura. Estas linhas celulares são frequentemente consideradas bons modelos in vitro do epitélio intestinal (capítulo 5). Verificou-se que o crescimento e o estado de diferenciação de ambas as linhas celulares foram distintamente afetados pela glucose. O isolamento de frações celulares revelou um aumento da expressão proteica do transportador da glucose SGLT1 na membrana apical (BBM) e um enriquecimento do transportador da glucose GLUT2 na fração das restantes membranas intracelulares (incluindo a membrana basolateral, [BLM]) em células HT-29 diferenciadas com NaBu. A expressão do SGLT1 nesta linha celular não foi afetada pelo RA. Esta observação opõe-se aos resultados previamente obtidos in vivo, que demonstraram a eficácia do RA para prevenir o aumento dos níveis de SGLT1 na BBM, em consequência da manipulação dos hidratos de carbono na dieta. Os transportadores (SGLT1 e GLUT2) demonstraram possuir a mesma localização intracelular em Caco-2 contudo, a expressão e a localização de ambas as proteínas não foram afetadas pela glucose nem pela insulina. Do mesmo modo, os níveis proteicos e a localização intracelular do SGLT1 em HT-29 não foram afetados pela insulina podendo isto indicar que, esta hormona, não intervém no processo de transporte do SGLT1 intracelular para a membrana apical. Este trabalho permitiu concluir que as espécies de Salvia e os seus compostos naturais presentemente estudados, podem ser eficazes na prevenção e no controlo da diabetes e suas complicações, nomeadamente a dislipidemia

Practical insights on enzyme stabilization

Enzymes are efficient catalysts designed by nature to work in physiological environments of living systems. The best operational conditions to access and convert substrates at the industrial level are different from nature and normally extreme. Strategies to isolate enzymes from extremophiles can redefine new operational conditions, however not always solving all industrial requirements. The stability of enzymes is therefore a key issue on the implementation of the catalysts in industrial processes which require the use of extreme environments that can undergo enzyme instability. Strategies for enzyme stabilization have been exhaustively reviewed, however they lack a practical approach. This review intends to compile and describe the most used approaches for enzyme stabilization highlighting case studies in a practical point of view.The authors would like to thank Portuguese Science and Technology Foundation (FCT) under the scope of the strategic funding of UID/BIO/04469/2013 unit and COMPETE 2020 (POCI-01-0145-FEDER-006684) and BioTecNorte operation (NORTE-01-0145-FEDER-000004) funded by European Regional Development Fund under the scope of Norte2020 – Programa Operacional Regional do Norte. They would like also to thank the Program for Changjiang Scholars and Innovative Research Team in University (IRT1135). This study was also supported by Chinese Government Scholarship under China Scholarship Council (No. 201606790036) and Chinese Foundation Key projects of governmental cooperation in International Scientific and Technological Innovation (No. 2016 YFE0115700).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Illustrated Guide of the South-West Coast Mediterranean Temporary Ponds

Os Charcos Temporários Mediterrânicos são dos habitats mais extraordinários da região Mediterrânica. Este guia pretende contribuir para a disseminação do conhecimento sobre estes habitats frágeis e as espécies neles presentes, ajudando deste modo à sua conservação a longo prazo. O guia está dividido em três capítulos principais (introdução, flora e fauna) e pretende divulgar as espécies mais características e emblemáticas deste habitat. Algumas das espécies que aqui ocorrem, nomeadamente de plantas, anfíbios e crustáceos de água doce, são espécies raras, de distribuição muito reduzida, endémicas ou com estatuto de proteção

Histórias em Intercompreensão: a voz dos autores

Este relatório foi elaborado no âmbito do lote 7 (Inserção Curricular da Intercompreensão) do projeto MIRIADI. Trata-se de um lote cujo objetivo é desenvolver processos de integração curricular da Intercompreensão (IC) à distância em grupos plurilingues, a partir de trabalhos experimentais levados a cabo no terreno e realizados numa lógica de investigação-ação, tendo em vista compreender as “condições de exequibilidade” desta abordagem didática nos curricula de aprendizagem de línguas e de formação. Procura-se, em particular, identificar empiricamente permeabilidades e resistências dos contextos e dos atores educativos face à IC como conceito prático com relevância profissional, bem como vantagens e limites do ponto de vista da aprendizagem linguística que possam justificar o seu valor educativo. A Intercompreensão tem vindo, nas últimas décadas, a percorrer um percurso de destaque em Didática de Línguas (sobretudo Estrangeiras) na Europa e fora dela, em particular no âmbito das atuais abordagens plurais, ocupando um lugar de visibilidade nos discursos e práticas de investigação e formação desta disciplina e contribuindo para a tonalidade da sua voz mais propriamente politico-ideológica (Alarcão, Andrade, Araújo e Sá, Melo-Pfeifer & Santos, 2009). Contudo, a presença do conceito nos espaços concretos de educação em línguas (tais como escolas, liceus, universidades e outras instituições) é extremamente débil, limitando-se a algumas experiências pontuais, sob o impulso (e mesmo a condução), na maior parte dos casos, dos investigadores e tendo como finalidade principal a produção de conhecimento didático (Degache & Tavares, 2011). Assim, pouco se sabe ainda do que pode ser efetivamente o contributo da IC para o projeto educativo das instituições, e muito menos do modo como o conceito pode ser integrado em práticas curriculares continuadas e sistemáticas de educação em línguas, sabendo-se que estas mesmas práticas são reguladas por múltiplas instâncias, internas e externas, objetivas e subjetivas, que atuam a vários níveis (macro, meso, micro) e que não podem deixar de ser consideradas. O lote 7 de Miriadi propõe abordar estas questões, relativas à integração curricular da IC, a partir de uma outra lógica epistemológica, uma lógica que não busca propostas desenhadas a partir dos resultados da investigação e orientadas para a transferência do conhecimento, ou seja, que não reflete uma perspetiva aplicacionista do saber didático. Ao invés, o trabalho realizado por este lote entende o currículo como uma construção dinâmica que se (re)define e se (re)negocia em função dos contextos específicos em que ocorre, atribuindo-lhe por conseguinte uma natureza contingente, situada, intersubjetiva e local. Nesta perspetiva sócio-construtivista, em que o currículo é uma co-construção que ocorre entre sujeitos precisos nas suas ações educativas quotidianas, a integração curricular da IC produz-se no âmbito destas ações, ou, dito de outra forma, através de práticas situadas nas especificidades e possibilidades que oferecem os contextos concretos, em particular os sujeitos que deles fazem parte. Esta perspetiva de trabalho do lote 7 parece-nos ser a mais coerente com o posicionamento teórico relativamente à IC enquanto conceito didático do projeto MIRIADI. Com efeito, está amplamente estudado que a IC tem vindo a ser tratada segundo diferentes pontos de vista, de acordo com as escolas epistemológicas e as proveniências e ancoragens disciplinares dos seus autores (para uma revisão recente, ver Araújo e Sá, 2013; Olliver, 2013). No âmbito do percurso específico de investigação/formação/intervenção do grupo e-Gala (www.e-gala.eu), no seio do qual emergiu MIRIADI, em particular das suas mais disseminadas realizações – as plataformas Galanet (www.galanet.eu) e Galapro (www-galapro.eu/sessions) -, a IC é abordada numa perspetiva socio-construtivista do saber e da relação comunicativa. Dito de outra forma, MIRIADI define a IC como um processo e uma prática interacional que ocorre entre sujeitos, atores sociais que vivem em diferentes línguas e que se implicam coletivamente num quadro dialógico “où le grand enjeu devient la construction d’un territoire de parole partagé” (Araújo e Sá, Degache & Spita, 2010: 26). Esta aceção interacionista (e plurilingue e intercultural) é complementada pelo recurso a meios de comunicação tecnológicos. Definido o enquadramento conceptual e metodológico do lote7, importa agora explicitar como se desenvolveu o trabalho ao longo dos seus 36 meses de execução. O lote organizou-se em 3 grandes etapas, que envolveram toda a equipa: Etapa 1. Identificação e caracterização de contextos de ensino e formação linguística suscetíveis de poderem beneficiar de uma integração curricular da IC (plurilingue e à distância) (os resultados desta etapa encontram-se na Prestation 7.1. do projeto, referida na nota anterior). Etapa 2. Planificação e desenvolvimento de múltiplas e diversificadas iniciativas de divulgação da IC nesses mesmos contextos, destinadas à comunidade educativa na generalidade (públicos, professores/formadores, órgãos de gestão, funcionários, etc.), tendo em vista a sua familiarização com a IC enquanto conceito didático e prática de educação em línguas, de modo a criar condições (e aberturas) para a sua integração curricular; uma atenção especial foi dada à formação dos agentes educativos. Etapa 3. Planificação, experimentação e avaliação, numa lógica de investigação-ação e em rede (aproveitando-se as potencialidades das plataformas Galapro e Galanet), de propostas de integração curricular da IC; pretendia-se, em especial, com estas propostas, identificar contributos da IC para a qualidade dos projetos educativos dos contextos de integração caracterizados (na etapa 1), mas também constrangimentos, fragilidades, obstáculos e resistências, numa abordagem crítica do conceito que fosse sensível às propriedades dos espaços-alvo de educação em línguas. Neste sentido, foram recolhidos, analisados e discutidos, em função das suas características contextuais (definidas na etapa 1), dados empíricos de natureza diversa (produções dos alunos, transcrições de excertos de aulas, testemunhos espontâneos de alunos e professores, respostas a questionários, entre outros). Este Rapport é um produto da Etapa 3. Trata-se de um documento multimédia, que pretende dar acesso sistematizado e crítico aos discursos e vozes de sujeitos reais que experienciaram propostas didáticas concretas de IC elaboradas durante esta etapa do lote. Mais concretamente, este relatório oferece 6 narrativas de estudos de caso (3 em contexto de ensino secundário e outros 3 no ensino superior), realizados em vários países (Brasil, França, Itália Portugal e República da Maurícia), contendo uma descrição detalhada das situações educativas experimentadas e uma análise dos dados recolhidos, com apresentação dos recursos e materiais utilizados e testemunhos dos sujeitos concretos (professores e alunos). Incluem-se igualmente os instrumentos de recolha de dados e alguns exemplos dos mesmos. Cada narrativa obedece a uma mesma estrutura discursiva, de forma a mais facilmente poderem ser comparáveis, permitindo a extração de conclusões transversais aos vários estudos: introdução; descrição do contexto de intervenção; descrição da intervenção (objetivos, atividades, com acesso aos recursos utilizados, e avaliação); resultados obtidos; conclusões e implicações A secção final, “Témoignages”, apresenta-se sob a forma de um conjunto de vídeos e podcasts, identificados de acordo com a instituição parceira do projeto que os recolheu e organizados segundo três critérios: • as línguas dos locutores (espanhol, francês, italiano e português); • os contextos de formação onde decorreram as experiências de IC (ensino secundário e ensino universitário); • o tipo de intervenientes nas experiências de IC (alunos ou professores). Assume-se mais uma vez, neste Rapport, as dinâmicas de trabalho plurilingue da equipa Miriadi, cuja rentabilidade para a produção do conhecimento didático foi analisada e evidenciada no âmbito de projetos anteriores (ver Melo-Pfeifer, 2014) e se encontra ilustrada, numa outra linguagem, nos nossos postais (disponíveis no Facebook). Assim, com exceção desta introdução, que foi traduzida para francês (ver acima), o documento encontra-se nas línguas de trabalho dos membros da equipa que o redigiram.Ce rapport a été préparé par le lot 7 (Insertion Curriculaire de l’Intercompréhension) du projet MIRIADI. Il s'agit d'un lot dont l’objectif est de développer des processus d’intégration curriculaire de l’Intercompréhension (IC) à distance dans des groupes plurilingues, à partir de travaux expérimentaux menés sur le terrain et réalisés dans une logique de recherche-action, pour comprendre les "conditions de faisabilité" de cette approche didactique dans les programmes d'apprentissage et de formation. Il est question, en particulier, d'identifier empiriquement des perméabilités et des résistances des contextes (abordés à partir d’une approche holistique) et des acteurs éducatifs confrontés à l’IC en tant que concept pratique à visée professionnelle. L'intercompréhension a, au cours des dernières décennies, réalisé un parcours marquant dans l'enseignement des Langues (principalement Étrangères) en Europe et en dehors, en particulier dans le contexte des approches plurielles, occupant une place de grande visibilité dans les discours et dans les pratiques de recherche et de formation de cette discipline et lui apportant une nette tonalité idéologique qui contribue pour la définition de sa voix politique (Alarcão, Andrade, Araújo e Sá, Melo-Pfeifer & Santos, 2009). Cependant, la circulation du concept sur les terrains de l'éducation en langues (tels que les écoles, les collèges, les universités et autres institutions) est très faible, limitée à quelques expériences ponctuelles, sous l'impulsion (et même la conduite), dans la plupart cas, des chercheurs, le but principal étant la production du savoir didactique (Degache & Tavares, 2011). Ainsi, on en sait peu sur ce que peut effectivement être la contribution de l'IC pour le projet éducatif des établissements d'enseignement, et encore moins sur la manière dont elle peut être intégrée dans les pratiques curriculaires continues et systématiques en langues, sachant que ces mêmes pratiques sont réglementées par plusieurs instances, internes et externes, objectives et subjectives, qui agissent à différents niveaux (macro, méso, micro) et qui ne peuvent manquer d'être prises en considération. Le lot 7 de Miriadi propose d’aborder ces questions, liées à l'intégration curriculaire de l’IC, à partir d'une autre logique épistémologique : une logique qui ne cherche pas des propositions obtenues à partir des résultats de la recherche et orientées vers le transfert de connaissance, c'est-à-dire qui ne reflète pas une perspective applicationniste du savoir didactique. Dans un autre sens, on comprend le curriculum comme une construction dynamique qui se fait entre des sujets dans leurs activités éducatives quotidiennes et qui se (re)définit et se (re)négocie selon les contextes, lui donnant un caractère contingent, situé, intersubjectif et local. Dans cette perspective socio-constructiviste, l'intégration curriculaire de l’IC se produit dans ces activités, à travers des pratiques situées dans les spécificités et les possibilités offertes par les contextes concrets, en particulier par les sujets qui les construisent. Cette approche de travail du lot 7 nous semble être la plus cohérente par rapport au positionnement théorique de l’IC en tant que concept didactique du projet MIRIADI. En effet, il est largement connu que l'IC est abordée selon différents points de vue, dépendants des écoles épistémologiques et des origines et ancrages disciplinaires de leurs auteurs (pour une révision, voir Araújo e Sá, 2013; Olliver, 2013 ). Dans le parcours spécifique du groupe de recherche / formation / intervention e-Gala (www.e-gala.eu), duquel a émergé MIRIADI, et en particulier de ses réalisations les plus répandues Galanet (www.galanet.eu) et Galapro (www-galapro.eu/sessions), l’IC est abordée dans une perspective socio-constructiviste du savoir et de la relation communicative, c'est-à-dire comme un processus et une pratique interactionnelle qui se produit entre individus, acteurs sociaux qui vivent dans différentes langues et qui s’ impliquent collectivement dans un cadre dialogique “où le grand enjeu devient la construction d’un territoire de parole partagé” (Araújo e Sá, Degache & Spita, 2010: 26). Ce sens interactionnel (et plurilingue et interculturel) est complété par l'utilisation de la communication technologique. L’encadrement conceptuel et méthodologique du lot 7 étant défini, nous présentons maintenant le plan de travail du lot au cours de ses 36 mois de mise en œuvre. Le lot a été organisé en trois grandes étapes, qui ont impliqué la participation de toute l'équipe: Étape 1. Identification et caractérisation des contextes d'enseignement et de formation linguistique susceptibles de bénéficier d'une intégration curriculaire de l'IC (plurilingue et à distance) (les résultats de cette étape se trouvent dans la Prestation 7.1. du projet, voir note antérieure). Étape 2. Planification et développement de multiples initiatives de diffusion de l’IC dans ces contextes, adressées à la communauté éducative en général (publics-cibles, enseignants / formateurs, organes de gestion, autres personnels, etc.), afin de se familiariser avec l'IC en tant que concept didactique et pratique d’éducation en langues, de manière à créer les conditions (et ouvertures) pour son intégration curriculaire; une attention particulière est accordée à la formation des agents éducatifs. Étape 3. Planification, expérimentation et évaluation, dans une logique de recherche-action et de mise en réseau, de propositions d'intégration curriculaire de l’IC; il visait, en particulier, avec ces propositions, identifier non seulement les contributions de l’IC à la qualité des projets éducatifs des contextes d'intégration caractérisés (dans l’étape 1), mais aussi les contraintes, les faiblesses, les obstacles et les résistances, dans une approche critique du concept qui soit sensible aux spécificités des espaces-cible de l'éducation en langues. En ce sens, des données empiriques de nature diverse (productions d’étudiants, témoignages d'étudiants et d'enseignants, réponses à des questionnaires, transcriptions d’extraits de cours, entre autres) ont été recueillies, analysées et discutées, en fonction de leurs caractéristiques contextuelles (définis à l'étape 1). Ce Rapport est un produit de l'étape 3. Il s’agit d’un document multimédia qui donne accès aux discours et voix des sujets réels qui ont expérimenté les propositions didactiques de l’IC développés au cours de cette dernière étape du lot. En particulier, ce rapport propose six récits d'études de cas (3 dans un contexte d’enseignement secondaire et 3 autres dans l'enseignement supérieur), menées dans divers pays (Brésil, France, Italie, Portugal et la République de Maurice), contenant une description détaillée des situations éducatives expérimentées et une analyse des données recueillies, avec la présentation des ressources et des matériaux utilisés et des témoignages de sujets (enseignants et étudiants). Il comprend également des outils de collecte de données et quelques exemples de celles-ci. Chaque récit suit la même structure du discours, afin qu'ils puissent être plus facilement comparés, permettant l’obtention de conclusions transversales aux différentes études: introduction; description du contexte d'intervention; description de l'intervention (objectifs, activités, avec accès aux ressources utilisées, et évaluation); résultats obtenus; conclusions et implications La dernière section, "Témoignages", se présente sous la forme d'un ensemble de vidéos et de podcasts, identifiés conformément à l'institution partenaire du projet qui les a recueilli et organisés selon trois critères: • les langues des locuteurs (espagnol, français, italien et portugais); • les contextes de formation où ont eu lieu les expériences de l’lC (enseignement secondaire et universitaire); • le type d’intervenants dans les expériences d’IC (étudiants ou enseignants). Dans ce Rapport, nous assumons les dynamiques de travail plurilingue de l’équipe Miriadi, dont la rentabilité pour la production de la connaissance didactique a été analysée et démontrée dans le cadre de projets antérieurs (voir Melo-Pfeifer, 2014) et qui a été illustré, dans un autre langage, dans nos cartes-postales (disponibles sur Facebook). Ainsi, à l’exception de cette Introduction, qui a été traduite du portugais, ce document se trouve rédigé dans les langues de travail des membres de l’équipe qui l’ont élaboré

Portuguese Football Federation consensus statement 2020: nutrition and performance in football

Nutrition is an undeniable part of promoting health and performance among football (soccer) players. Nevertheless, nutritional strategies adopted in elite football can vary significantly depending on culture, habit and practical constraints and might not always be supported by scientific evidence. Therefore, a group of 28 Portuguese experts on sports nutrition, sports science and sports medicine sought to discuss current practices in the elite football landscape and review the existing evidence on nutritional strategies to be applied when supporting football players. Starting from understanding football's physical and physiological demands, five different moments were identified: preparing to play, match-day, recovery after matches, between matches and during injury or rehabilitation periods. When applicable, specificities of nutritional support to young athletes and female players were also addressed. The result is a set of practical recommendations that gathered consensus among involved experts, highlighting carbohydrates periodisation, hydration and conscious use of dietary supplements.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Quantitative-spatial assessment of soil contamination in S. Francisco de Assis due to mining activity of the Panasqueira mine (Portugal)

Through the years, mining and beneficiation processes produces large amounts of As-rich mine wastes laid up in huge tailings and open-air impoundments (Barroca Grande and Rio tailings) that are the main source of pollution in the surrounding area once they are exposed to the weathering conditions leading to the formation of AMD and consequently to the contamination of the surrounding environments, in particularly soils. In order to investigate the environmental contamination impact on S. Francisco de Assis (village located between the two major impoundments and tailings) agricultural soils, a geochemical survey was undertaken to assess toxic metals associations, related levels and their spatial distribution, and to identify the possible contamination sources. According to the calculated contamination factor, As and Zn have a very high contamination factor giving rise to 65.4 % of samples with a moderate to high pollution degree; 34.6 % have been classified as nil to very low pollution degree. The contamination factor spatial distribution put in evidence the fact that As, Cd, Cu, Pb, and Zn soils contents, downstream Barroca Grande tailing, are increased when compared with the local Bk soils. The mechanical dispersion, due to erosion, is the main contamination source. The chemical extraction demonstrates that the trace metals distribution and accumulation in S. Francisco de Assis soils is related to sulfides, but also to amorphous or poorly crystalline iron oxide phases. The partitioning study allowed understanding the local chemical elements mobility and precipitation processes, giving rise to the contamination dispersion model of the study area. The wind and hydrological factors are responsible for the chemical elements transport mechanisms, the water being the main transporter medium and soils as one of the possible retention media

Proteomic profiling of Burkholderia cenocepacia clonal isolates with different virulence potential retrieved from a cystic fibrosis patient during chronic lung infection

Respiratory infections with Burkholderia cepacia complex (Bcc) bacteria in cystic fibrosis (CF) are associated with a worse prognosis and increased risk of death. In this work, we assessed the virulence potential of three B. cenocepacia clonal isolates obtained from a CF patient between the onset of infection (isolate IST439) and before death with cepacia syndrome 3.5 years later (isolate IST4113 followed by IST4134), based on their ability to invade epithelial cells and compromise epithelial monolayer integrity. The two clonal isolates retrieved during late-stage disease were significantly more virulent than IST439. Proteomic profiling by 2-D DIGE of the last isolate recovered before the patient's death, IST4134, and clonal isolate IST439, was performed and compared with a prior analysis of IST4113 vs. IST439. The cytoplasmic and membrane-associated enriched fractions were examined and 52 proteins were found to be similarly altered in the two last isolates compared with IST439. These proteins are involved in metabolic functions, nucleotide synthesis, translation and protein folding, cell envelope biogenesis and iron homeostasis. Results are suggestive of the important role played by metabolic reprogramming in the virulence potential and persistence of B. cenocepacia, in particular regarding bacterial adaptation to microaerophilic conditions. Also, the content of the virulence determinant AidA was higher in the last 2 isolates. Significant levels of siderophores were found to be secreted by the three clonal isolates in an iron-depleted environment, but the two late isolates were more tolerant to low iron concentrations than IST439, consistent with the relative abundance of proteins involved in iron uptake.This work was supported by FEDER and FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologia (contract PEst-OE/EQB/LA0023/2011_ research line: Systems and Synthetic Biology; PhD grant to A.M. – SFRH/BD/37012/2007, and PD grants to S.S. – SFRH/BPD/75483/2010 and C.C. – SFRH/BPD/ 81220/2011. The funders had no role in study design, data collection and analysis, decision to publish, or preparation of the manuscript.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Genomic Expression Analysis Reveals Strategies of Burkholderia cenocepacia to Adapt to Cystic Fibrosis Patients' Airways and Antimicrobial Therapy

Pulmonary colonization of cystic fibrosis (CF) patients with Burkholderia cenocepacia or other bacteria of the Burkholderia cepacia complex (Bcc) is associated with worse prognosis and increased risk of death. During colonization, the bacteria may evolve under the stressing selection pressures exerted in the CF lung, in particular, those resulting from challenges of the host immune defenses, antimicrobial therapy, nutrient availability and oxygen limitation. Understanding the adaptive mechanisms that promote successful colonization and long-term survival of B. cenocepacia in the CF lung is essential for an improved therapeutic outcome of chronic infections. To get mechanistic insights into these adaptive strategies a transcriptomic analysis, based on DNA microarrays, was explored in this study. The genomic expression levels in two clonal variants isolated during long-term colonization of a CF patient who died from the cepacia syndrome were compared. One of the isolates examined, IST439, is the first B. cenocepacia isolate retrieved from the patient and the other isolate, IST4113, was obtained three years later and is more resistant to different classes of antimicrobials. Approximately 1000 genes were found to be differently expressed in the two clonal variants reflecting a marked reprogramming of genomic expression. The up-regulated genes in IST4113 include those involved in translation, iron uptake (in particular, in ornibactin biosynthesis), efflux of drugs and in adhesion to epithelial lung tissue and to mucin. Alterations related with adaptation to the nutritional environment of the CF lung and to an oxygen-limited environment are also suggested to be a key feature of transcriptional reprogramming occurring during long-term colonization, antibiotic therapy and the progression of the disease