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Avaliação, in vitro, da sensibilidade de Giardia lamblia ao metronidazol
Mestrado em ToxicologiaG. lamblia, agente causal da giardiose, é considerado o parasita protozoário
patogénico mais frequente no intestino do Homem, associado a situações de
grande morbilidade em todo o mundo e a causa mais comum de diarreia em
humanos. De todos os compostos disponíveis, o metronidazol continua a ser
considerado o fármaco de eleição no tratamento desta parasitose. Contudo, o
número crescente de casos de resistência registados tem vindo a justificar a
necessidade de desenvolver metodologias que permitam avaliar a
sensibilidade de G. lamblia aos fármacos disponíveis. Espera-se com este
estudo contribuir para o desenvolvimento e implementação de metodologias
expeditas que permitam avaliar, in vitro, a susceptibilidade deste parasita aos
fármacos habitualmente prescritos. Pretende-se obter uma metodologia de
simples execução, em microescala e portanto menos dispendiosa, que permita
alcançar resultados mais rápidos e mais fiáveis. Neste sentido, este trabalho
teve como objectivo determinar a sensibilidade de G. lamblia ao metronidazol
recorrendo às metodologias de inibição de aderência (ADE), diacetato de
fluoresceína (FDA), iodeto de propídio (PI) e um derivado tetrazolium (XTT).
Foram obtidos valores de IC50 de 2,99μM, 9,87μM e 8,93μM para a
metodologia ADE, FDA e XTT, respectivamente. A metodologia PI não foi
considerada uma vez que apresentou resultados incongruentes. Os resultados
permitiram observar que as metodologias FDA e XTT apresentaram valores de
IC50 mais próximos. Na metodologia ADE, registaram-se valores cerca de três
vezes inferiores. A selecção da melhor metodologia deve ter em conta o
mecanismo de actuação do fármaco em estudo bem como a disponibilidade de
equipamento necessário à execução das diferentes metodologias.
ABSTRACT: G. lamblia, giardiasis cause, is the most frequent pathogenic protozoan found
in human, associated with great morbility in the whole world and most common
cause for diarrhea. Metronidazole is the most often drug used in giardiasis
treatment. However, the increasing number of metronidazole resistance cases
justifies the need to develop G. lamblia viability assessment methodologies to
other available drugs. It is hoped that this study contributes to the development
and implementation of resourceful methodologies of in vitro susceptibility
assessment of this parasite to commonly prescribed drugs. The aim is to obtain
a simple methodology for microscale implementation, therefore less expensive,
and to achieve faster and more reliable results. This study wanted to determine
G. lamblia sensitivity to metronidazole using inhibition of adherence method
(ADE), fluorogenic dyes fluorescein diacetate (FDA) and propidium iodide (PI)
and a tetrazolium derivate (XTT) reduction. Sensibility results estimated IC50
values of 2,99μM, 9,87μM and 8,93μM for ADE, FDA and XTT, respectively. PI
was not considered due to inconsistent results. FDA and XTT IC50 values were
similar. Values obtained with ADE were three times lower. The best
methodology selection must take into account the drug mechanism of action
and the equipment availability to different methodologies implementation
Characterisation of microbial attack on archaeological bone
As part of an EU funded project to investigate the factors influencing bone preservation in the archaeological record, more than 250 bones from 41 archaeological sites in five countries spanning four climatic regions were studied for diagenetic alteration. Sites were selected to cover a range of environmental conditions and archaeological contexts. Microscopic and physical (mercury intrusion porosimetry) analyses of these bones revealed that the majority (68%) had suffered microbial attack. Furthermore, significant differences were found between animal and human bone in both the state of preservation and the type of microbial attack present. These differences in preservation might result from differences in early taphonomy of the bones. © 2003 Elsevier Science Ltd. All rights reserved