Epidemilogia molecular de anplasma marginal em bovinos criados na microrregião de Porto Velho do estado de Rondônia.

Anaplasma marginale é uma rickettsia intraeritrocitária, responsável pela anaplasmose bovina, transmitida principalmente pelo carrapato dos bovinos, Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Apresenta seis genes que codificam as principais proteínas principais (msps). A proteína de membrana MSP5 presente no genoma em copias simples é codificada pelo gene msp5 que está representado no genoma em cópia símples, altamente conservado entre diferentes cepas de A. marginale e suas seqüências têm sido utilizadas para a detecção de portadores do referido parasita pela técnica de PCR. Objetivos: Caracterizar a situação epidemiológica de A.marginale na microrregião de Porto Velho, estado de Rondônia Metodologia: Foram coletadas 309 amostras de sangue obtidas nos sete municípios que compõe a microrregião de Porto Velho, correspondentes a 117.979 da população bovina. A extração do DNA foi através da utilização do kit GFX. A Reação em Cadeia da Polimerase -PCR foi feita utilizando-se os primers msp5 F e msp5 R que amplificam um fragmento de aproximadamente 458pb como seqüência diagnóstica para A .marginale. Visualizaram-se os amplicons de A. marginale obtidos por PCR por eletroforese em gel de agarose á 1 % com o auxílio de marcador peso molecular de 100 pb. Resultado: Utilizando a técnica da PCR, foi observado que 98,7% das amostras analisadas advindas da microrregião de Porto Velho mostraram-se positivas. Conclusão: Os resultados demonstram que os animais vêm tendo contato sistemático com esta rickettsia na área estudada, devido à alta prevalência de A. marginale demonstrada nesta microrregião. Isto comprova à circulação do agente patogênico e a presença de vetores no ambiente, classificando esta zona como área de estabilidade enzoótica, ou seja, apresenta riscos mínimos de surtos exceto pela introdução de animais de áreas livres ou de zonas enzooticamente instáveis

Fragile X Syndrome. Clinical, Electroencephalographic And Neuroimaging Characteristics.

We studied 11 patients (9 males) with cytogenetic diagnosis of fragile X syndrome (FXS) with the purpose of investigating the neural circuitry involved in this condition. The ages ranged from 8 to 19. All the individuals presented large ears, elongated faces and autistic features. Ten patients had severe mental retardation. Attention disorder was found in 10 individuals. Electroencephalographic recordings were abnormal in 6 of 10 patients examined, showing focal epileptiform discharges predominantly in frontal and parietal areas. All patients underwent magnetic resonance imaging studies which were abnormal in 8 of them. The most important abnormalities were reduction of the cerebellar vermis and enlargement of the IV ventricle. Single photon emission computerized tomography (SPECT) was performed in 7 patients and was abnormal in all of them, the most frequent finding being a hypoperfusion of the inferior of the frontal lobes. Based on the clinical picture, neuropsychological findings and functional and structural imaging studies we suggest that FXS presents with a dysfunction involving a large area of the central nervous system: cerebellum-basal frontal regions-parietal lobes. The literature points to a disturbance involving the same neural circuitry in patients with autism.5618-2

Anaplasma marginale infection in cattle from southwestern Amazonia.

study provides the first epidemiological data regarding infection by Anaplasma marginale in cattle reared in south-western Brazilian Amazonia. One simple procedure was adapted for the extraction of DNA from blood clots collected in seven microregions of Rondônia State and two mesoregions of Acre State. PCR method was used to asses the frequency of A. marginale infections in 4 to12-month-old cattle. The cattle infection was investigated by polymerase chain reaction (PCR) using the specific primer ?msp5? for A. marginale. The DNA amplifications revealed that the mean frequency of A. marginale infection was 98.6% (1,627/1,650) in samples from Rondonia, and 92.87% (208/225) in samples from Acre. The high frequency of A. marginale infections in 4 to 12- month-old cattle indicate a situation of enzootic stability in the studied areas and are comparable to those detected by immunodiagnosis in different endemic regions in Brazil. The DNA extraction of clotted blood method described here can be used for epidemiological studies on anaplasmosis and other bovine hemoparasites

Extração de DNA a partir de coágulos sanguíneos bovinos.

Foi otimizada uma metodologia de extração de DNA genômico a partir de coágulo sanguíneo. Amostras de sangue com e sem anticoagulante EDTA para a obtenção dos coágulos sanguíneos foram coletadas em bovinos nos estados de Rondônia e Acre para pesquisa de Anaplasma marginale. Para a extração de DNA a partir do coágulo sanguíneo testaram-se dois tipos de tecido de nylon: no tratamento 1, o tecido utilizado apresentava diâmetro dos poros de 200 µm e no tratamento 2, tecido com poros de diâmetro de 1.200 µm. As amostras de sangue com anticoagulante representaram o tratamento 3, sendo este considerado como tratamento controle. Após a quebra mecânica, os coágulos sofreram centrifugação a 7.000 RPM por 15 minutos passando através das malhas dos tecidos utilizados nos tratamentos 1 e 2. A extração de DNA das amostras a partir do coágulo centrifugado e do sangue total se deu através da utilização de kit comercial para extração de DNA genômico. A quantificação do DNA obtido foi realizada através de espectrofotometria a 260 e 280 m, sendo sua integridade verificada através de eletroforese em gel de agarose. As amostras de DNA obtidas a partir dos diferentes protocolos foram utilizadas como molde para amplificação, por PCR, do gen msp5 de A. marginale. A quantidade de DNA obtida pelos tratamentos 1 e 2 foi semelhante a do sangue total (33,39 ± 1,17; 31,76 ± 0,663; 32,35 ± 0,676, respectivamente). A pureza do DNA nas amostras obtidas a partir dos tratamentos 1 e 2 foram semelhantes a do sangue total (A260/280 = 1,61 ± 0,068; 1,58 ± 0,035; 1,63 ± 0,028, respectivamente). A utilização de tecidos de organza ou tipo filó se mostrou como uma metodologia apta a ser incorporada como método de rotina para extração de DNA a partir de coágulo sanguíneo bovino por ser uma metodologia simples, rápida, barata e reproduzível para a obtenção de quantidades consideráveis de DNA de boa qualidade para utilização em estudos de epidemiologia molecular em patologias bovinas.bitstream/item/24667/1/bpd43-dnabovinos.pd

Epidemiologia molecular de Anaplasma marginale em bovinos criados nos Estados de Rondônia e Acre.

Nesse trabalho determinou-se a prevalência de A. marginale em rebanhos bovinos criados em oito microrregiões de Rondônia e quatro microrregiões do Acre através da utilização da técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizada para amplificação de um fragmento de 458 pb do gene msp5. Verificou-se uma taxa de prevalência de 98,6% nas amostras provenientes de Rondônia e de 92,87% nas amostras provenientes do Acre. As taxas de prevalência não diferiram significativamente entre as microrregiões analisadas caracterizando os estados de Rondônia e Acre como áreas de estabilidade enzoótica para A. marginale. Através da análise do alinhamento da região de menor variabilidade do gene msp1a, identificou-se a presença de cincos tipos de isolados dessa rickettsia pertencentes às populações de A. marginale provenientes dos estados de São Paulo, Rondônia e Acre.bitstream/CPAF-RO-2009-09/12335/1/bpd49_anaplasma-marginale.pd

Immunity to Lutzomyia intermedia Saliva Modulates the Inflammatory Environment Induced by Leishmania braziliensis

Transmission of Leishmania parasites occurs during blood feeding, when infected female sand flies inject humans with parasites and saliva. Chemokines and cytokines are secreted proteins that regulate the initial immune responses and have the potential of attracting and activating cells. Herein, we studied the expression of such molecules and the cellular recruitment induced by salivary proteins of the Lutzomyia intermedia sand fly. Of note, Lutzomyia intermedia is the main vector of Leishmania braziliensis, a parasite species that causes cutaneous leishmaniasis, a disease associated with the development of destructive skin lesions that can be fatal if left untreated. We observed that L. intermedia salivary proteins induce a potent cellular recruitment and modify the expression profile of chemokines and cytokines in mice. More importantly, in mice previously immunized with L. intermedia saliva, the alteration in the initial inflammatory response was even more pronounced, in terms of the number of cells recruited and in terms of gene expression pattern. These findings indicate that an existing immunity to L. intermedia sand fly induces an important modulation in the initial immune response that may, in turn, promote parasite multiplication, leading to the development of cutaneous leishmaniasis

SARS-CoV-2 antibody dynamics in blood donors and COVID-19 epidemiology in eight Brazilian state capitals: A serial cross-sectional study

BACKGROUND: The COVID-19 situation in Brazil is complex due to large differences in the shape and size of regional epidemics. Understanding these patterns is crucial to understand future outbreaks of SARS-CoV-2 or other respiratory pathogens in the country. METHODS: We tested 97,950 blood donation samples for IgG antibodies from March 2020 to March 2021 in 8 of Brazil's most populous cities. Residential postal codes were used to obtain representative samples. Weekly age- and sex-specific seroprevalence were estimated by correcting the crude seroprevalence by test sensitivity, specificity, and antibody waning. RESULTS: The inferred attack rate of SARS-CoV-2 in December 2020, before the Gamma variant of concern (VOC) was dominant, ranged from 19.3% (95% credible interval [CrI] 17.5-21.2%) in Curitiba to 75.0% (95% CrI 70.8-80.3%) in Manaus. Seroprevalence was consistently smaller in women and donors older than 55 years. The age-specific infection fatality rate (IFR) differed between cities and consistently increased with age. The infection hospitalisation rate increased significantly during the Gamma-dominated second wave in Manaus, suggesting increased morbidity of the Gamma VOC compared to previous variants circulating in Manaus. The higher disease penetrance associated with the health system's collapse increased the overall IFR by a minimum factor of 2.91 (95% CrI 2.43-3.53). CONCLUSIONS: These results highlight the utility of blood donor serosurveillance to track epidemic maturity and demonstrate demographic and spatial heterogeneity in SARS-CoV-2 spread. FUNDING: This work was supported by Itaú Unibanco 'Todos pela Saude' program; FAPESP (grants 18/14389-0, 2019/21585-0); Wellcome Trust and Royal Society Sir Henry Dale Fellowship 204311/Z/16/Z; the Gates Foundation (INV- 034540 and INV-034652); REDS-IV-P (grant HHSN268201100007I); the UK Medical Research Council (MR/S0195/1, MR/V038109/1); CAPES; CNPq (304714/2018-6); Fundação Faculdade de Medicina; Programa Inova Fiocruz-CE/Funcap - Edital 01/2020 Number: FIO-0167-00065.01.00/20 SPU N°06531047/2020; JBS - Fazer o bem faz bem