Optimisation de méthodes chromogéniques pour l'évaluation d'enzymes pancréatiques en milieu pharmaceutique

L'insuffisance pancréatique se définit comme un déficit de production d'enzymes pancréatiques par le pancréas. Ceci entraîne une mauvaise digestion des aliments et des vitamines liposolubles, mais peut rarement entraîner la mort. Plusieurs affections du pancréas peuvent entraîner un tel déficit, mais il est généralement engendré par la pancréatite chronique et la mucoviscidose. L'insuffisance elle-même peut être contrée en donnant aux malades un produit pharmaceutique composé d'extraits pancréatiques. Généralement issu de pancréas porcin, cet extrait pancréatique doit être apte à résister à l'environnement gastrique pour pouvoir se répandre promptement dans le duodénum en gardant des hauts taux d'activité enzymatique.\ud Plusieurs méthodes de dosage existent pour permettre d'évaluer l'activité enzymatique des enzymes pancréatiques comme agents actifs, dont celles recommandées par la Pharmacopée américaine. Vu les désavantages reliés à l'utilisation de ces méthodes (longues et laborieuses), ce projet a été mené pour déterminer si des méthodes alternatives pourraient être équivalentes tout en éliminant ces désavantages. Suite à des recherches préliminaires, des méthodes chromogéniques en fluorescence ont été sélectionnées pour évaluer leur potentiel d'utilisation pour le dosage de l'activité de la pancrélipase vu leurs avantages comme la rapidité et la sensibilité. L'objectif de ce projet a donc été de développer et d'optimiser des méthodes chromogéniques en fluorescence pour l'évaluation des enzymes pancréatiques en formulation pharmaceutique.\ud Les paramètres réactionnels furent étudiés, optimisés et harmonisés. Le type et la concentration du tampon, le pH, la température et les cofacteurs enzymatiques ont été déterminés, car ce sont des paramètres pouvant fortement influencer l'activité enzymatique de la lipase, de l'amylase et des protéases. Les paramètres cinétiques ont également été déterminés et les valeurs trouvées ont été respectivement 2,63, 11,56 et 15,46 µg/mL pour les Km et de 666,67, 138,89 et de 135,14 RFU/min pour les Vmax de la lipase, de l'alpha-amylase et des protéases. Les plages de concentration des enzymes ainsi que le temps de réaction permettant une évaluation précise ont été déterminés: 0,01 à 1 mU et 10 min de réaction cinétique de la lipase, 0,04 mU à 6 mU et 20 min de cinétique pour l'alpha-amylase et de 4 à 24 mU et 40 min de cinétique pour les protéases. Les enzymes pancréatiques des deux principes actifs « Pancreactic Enzymes Concentrate », PEC A et B, ont été dosées en présence et en absence des excipients de leur formulation respective. La précision et l'exactitude des méthodes chromogéniques ont été évaluées et comparées aux valeurs trouvées par les méthodes USP de la Pharmacopée américaine. Elles ont été trouvées équivalentes pour les deux méthodes et aucune interférence significative n'a été trouvée entre l'enzyme et les divers excipients (désintégrants, lubrifiants, liants, enrobant, etc.). En conclusion, ces méthodes chromogéniques en fluorescence peuvent être considérées adéquates pour l'évaluation de la pancréatine et de la pancrélipase. Leurs avantages pour les analyses de formulations pharmaceutiques justifient l'intérêt à les prendre en considération comme méthodes rapides de dosages enzymatiques. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : Méthode chromogénique fluorescente, Méthode USP, Lipase, Alpha-amylase, Protéases, Pancrelipase

La médecine défensive : fondement, principes, responsabilité médicale et solutions

Résumé: Le phénomène de la médecine défensive existe depuis des décennies aux États-Unis où il a atteint des proportions inquiétantes. La médecine défensive se produit lorsque les médecins prescrivent des tests, procédures ou évitent les patients à risque levé ou certaines procédures à haut risque, principalement pour réduire leur exposition à une responsabilité civile médicale. Cet essai aborde le fondement et principes de la médecine défensive par une définition exhaustive de ses causes et ses conséquences. Nous analysons en détail la responsabilité civile potentielle pour une pratique défensive de la médecine et la notion de faute médicale par les manquements aux obligations de soigner, de renseigner et d'obtenir le consentement libre et éclairé. Finalement, nous examinons le fonctionnement des protocoles de pratique et autres solutions possibles pour prévenir la médecine défensive. ||Abstract:The phenomenon of defensive medicine exists since many decades in United States and has reached alarming proportions. Defensive medicine occurs when physicians order tests, procedures, or avoid high-risk patients or procedures, primarily to reduce their exposure to malpractice liability. This essay examines the basis and principles of defensive medicine through the study of its causes and its consequences. The potentiel medical liability irising from the defensive practice of medicine, the notion of medical fault for the violation of the duty of care and for failing to obtain a free and lighted consent are analysed in detail. Finally, we examine practice parameters and other possible solutions intented to prevent defensive medicine

Représentation et mythification de l'enfance dans la littérature jeunesse.

Nous orienterons notre recherche sur la littérature jeunesse en tant qu'outil de représentation. Dans un premier temps, nous retracerons l'évolution de la notion d'enfance dans le discours social depuis l'Antiquite afin de mieux saisir la valeur de ce concept à la fin du vingtième siècle en évaluant le chemin parcouru et les orientations actuelles. Cette approche historique, dans la foulée des thèses de Philippe Aries, mais aussi de Lloyd de Mause et David Hunt, emprunte a la sociologie et parfois à la psychanalyse pour dégager les grandes étapes et le sens de l'évolution du concept d'enfance dans les sociétés occidentales. À la lumière de ces observations, nous reconstituerons les grands moments de l'histoire des représentations de l'enfance en littérature d'enfance et de jeunesse dans les pays occidentaux à partir d'un vaste corpus étudié dans une double perspective historique et psychosociologique afin de cerner les principaux mécanismes gouvernant ces représentations. C'est à partir de ces grands axes que nous tenterons de cerner les contours d'un nouveau mythe social de l'enfance à l'aube du vingt et unième siècle. Les représentations seront dégagées surtout à partir des enfants-héros, mais sans ignorer d'autres dimensions du texte littéraire. Le corpus de littérature jeunesse québécoise fera l'objet d'une attention particulière. Étant donné l'importance des productions sérielles et leur statut privilégie dans l'histoire des représentations c'est à partir d'un corpus d'oeuvres sérielles que nous étudierons l'évolution des représentations de l'enfance dans la littérature jeunesse québécoise. Cette étape nous mènera à une étude plus approfondie des représentations de l'enfance dans deux oeuvres contemporaines ou les forces constituantes d'un nouveau mythe social de l'enfance semblent exacerbées : Solitary Blue (Le héron bleu) de l'Américaine Cynthia Voight (1983) et le dernier des raisins du Québécois Raymond Plante (1986). Enfin, cette recherche en plusieurs volets sur la représentation de l'enfance dans la littérature jeunesse mènera à un projet de création sous forme de roman pour la jeunesse, fruit d'une réflexion sur la représentation de l'enfance. L'auteur de cette recherche étant chercheur et écrivain, la recherche théorique subira toujours ce double éclairage et s'en enrichira pour esquisser un modèle de la genèse des représentations différent de ceux déjà proposés et tenant mieux compte de l'importance des fantasmes de l'enfant réel dans le processus d'élaboration des projections chez l'auteur adulte. De même, nous croyons que l'analyse des représentations de l'enfance peut nourrir un projet d'écriture tout en poursuivant la réflexion amorcée, en l'interrogeant et en suggérant peut-être de nouvelles pistes de recherche

Conception et fabrication d’un tomographe optique et caractérisation d’un porte échantillon à répétabilité de positionnement submicronique

Ce mémoire de maîtrise présente le travail de conception du volet mécanique d’un équipement automatisée pour caractériser en trois dimensions la microstructure des interconnexions d’alliage étain-argent-cuivre, utilisé dans les procédés d’assemblage de puces électroniques par puce renversée. La technique de tomographie consiste à faire plusieurs cycles d’enlèvement de fine couche de matière par polissage et photographier cette surface ainsi obtenue, à l’aide d’un éclairage polarisé croisé. La lumière polarisée croisée permet la mise en évidence des différents domaines cristallographiques présent dans les interconnections. Le processus de développement de produit enseigné à l’Université de Sherbrooke a été employé pour définir les différents besoins, fonctions et critères de conception. Les concepts retenus sont présentés dans l’optique de bien comprendre la stratégie globale de l’équipement ainsi que le rôle spécifique de chaque sous-système. On peut diviser le tomographe en plusieurs sous- systèmes : Structure, manipulation, préparation de surface, nettoyage, caractérisation et contrôle. Une présentation générale des concepts retenus pour chaque sous-système est réalisée et une étude approfondie d’un système de positionnement isostatique, utilisé pour localiser le porte échantillon lorsqu’il est à la station de caractérisation, est présenté via un article scientifique. Tous les essais réalisés dans le cadre du travail de cette maîtrise démontrent la viabilité de l’équipement proposé pour réaliser une reconstruction tridimensionnelle d’interconnexions avec une précision meilleure que 1 micron dans toutes les directions. La qualité des images obtenues permet aussi de bien distinguer les différents domaines cristallographiques présents dans les alliages étain-argent-cuivre

Violences sexuelles en milieu universitaire au Québec : rapport de recherche de l’enquête ESSIMU

Cette recherche, intitulée « Enquête Sexualité, Sécurité et Interactions en Milieu Universitaire(ESSIMU) : Ce qu’en disent étudiant.es, enseignant.es et employé.es », a permis d’établir un portrait des violences sexuelles se déroulant en contexte universitaire au Québec. Cette enquête d’envergure provinciale regroupe 12 chercheures provenant des 6 universités suivantes : Université du Québec à Montréal, Université de Montréal, Université Laval, Université de Sherbrooke, Université du Québec en Outaouais et Université du Québec à Chicoutimi. L’équipe interdisciplinaire et interuniversitaire compte également le Regroupement québécois des centres d’aide et de lutte contre les agressions à caractère sexuel et le Service aux collectivités de l’UQAM. Afin de documenter les situations de violence sexuelle vécues en milieu universitaire (VSMU), l’équipe ESSIMU a réalisé en 2016 une vaste étude auprès de 9 284 répondant.es dans 6 universités québécoises francophones. Le questionnaire, administré en ligne, a permis de rendre compte d’un large éventail de manifestations de violence sexuelle vécues par l’ensemble de la communauté universitaire (étudiant ou travaillant à l’université). La mesure de victimisation distinguait le harcèlement sexuel (comportements verbaux et non verbaux qui traduisent des attitudes insultantes, hostiles et dégradantes), les comportements sexuels non désirés (comportements verbaux et non verbaux à caractère sexuel, offensants, non désirés ou non réciproques, incluant la tentative de viol et l’agression sexuelle) et la coercition sexuelle (chantage en retour de récompenses)

Integrin/Fak/Src-mediated regulation of cell survival and anoikis in human intestinal epithelial crypt cells: selective engagement and roles of PI3-K isoform complexes

In human intestinal epithelial crypt (HIEC) cells, the PI3-K/Akt-1 pathway is crucial for the promotion of cell survival and suppression of anoikis. Class I PI3-K consists of a complex formed by a catalytic (C) and regulatory (R) subunit. Three R (p85α, β, and p55γ) and four C (p110α, β, γ and δ) isoforms are known. Herein, we analyzed the expression of PI3-K isoforms in HIEC cells and determined their roles in cell survival, as well as in the β1 integrin/Fak/Src-mediated suppression of anoikis. We report that: (1) the predominant PI3-K complexes expressed by HIEC cells are p110α/p85β and p110α/p55γ; (2) the inhibition and/or siRNA-mediated expression silencing of p110α, but not that of p110β, γ or δ, results in Akt-1 down-activation and consequent apoptosis; (3) the expression silencing of p85β or p55γ, but not that of p85α, likewise induces Akt-1 down-activation and apoptosis; however, the impact of a loss of p55γ on both Akt-1 activation and cell survival is significantly greater than that from the loss of p85β; and (4) both the p110α/p85β and p110α/p55γ complexes are engaged by β1 integrin/Fak/Src signaling; however, the engagement of p110α/p85β is primarily Src-dependent, whereas that of p110α/p55γ is primarily Fak-dependent (but Src-independent). Hence, HIEC cells selectively express PI3-K isoform complexes, translating into distinct roles in Akt-1 activation and cell survival, as well as in a selective engagement by Fak and/or Src within the context of β1 integrin/Fak/Src-mediated suppression of anoikis

Gene expression profiling in sinonasal adenocarcinoma

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Sinonasal adenocarcinomas are uncommon tumors which develop in the ethmoid sinus after exposure to wood dust. Although the etiology of these tumors is well defined, very little is known about their molecular basis and no diagnostic tool exists for their early detection in high-risk workers.</p> <p>Methods</p> <p>To identify genes involved in this disease, we performed gene expression profiling using cancer-dedicated microarrays, on nine matched samples of sinonasal adenocarcinomas and non-tumor sinusal tissue. Microarray results were validated by quantitative RT-PCR and immunohistochemistry on two additional sets of tumors.</p> <p>Results</p> <p>Among the genes with significant differential expression we selected <it>LGALS4, ACS5, CLU, SRI and CCT5 </it>for further exploration. The overexpression of <it>LGALS4, ACS5, SRI</it>, <it>CCT5 </it>and the downregulation of <it>CLU </it>were confirmed by quantitative RT-PCR. Immunohistochemistry was performed for LGALS4 (Galectin 4), ACS5 (Acyl-CoA synthetase) and CLU (Clusterin) proteins: LGALS4 was highly up-regulated, particularly in the most differentiated tumors, while CLU was lost in all tumors. The expression of ACS5, was more heterogeneous and no correlation was observed with the tumor type.</p> <p>Conclusion</p> <p>Within our microarray study in sinonasal adenocarcinoma we identified two proteins, LGALS4 and CLU, that were significantly differentially expressed in tumors compared to normal tissue. A further evaluation on a new set of tissues, including precancerous stages and low grade tumors, is necessary to evaluate the possibility of using them as diagnostic markers.</p

Search for dark matter produced in association with bottom or top quarks in √s = 13 TeV pp collisions with the ATLAS detector

A search for weakly interacting massive particle dark matter produced in association with bottom or top quarks is presented. Final states containing third-generation quarks and miss- ing transverse momentum are considered. The analysis uses 36.1 fb−1 of proton–proton collision data recorded by the ATLAS experiment at √s = 13 TeV in 2015 and 2016. No significant excess of events above the estimated backgrounds is observed. The results are in- terpreted in the framework of simplified models of spin-0 dark-matter mediators. For colour- neutral spin-0 mediators produced in association with top quarks and decaying into a pair of dark-matter particles, mediator masses below 50 GeV are excluded assuming a dark-matter candidate mass of 1 GeV and unitary couplings. For scalar and pseudoscalar mediators produced in association with bottom quarks, the search sets limits on the production cross- section of 300 times the predicted rate for mediators with masses between 10 and 50 GeV and assuming a dark-matter mass of 1 GeV and unitary coupling. Constraints on colour- charged scalar simplified models are also presented. Assuming a dark-matter particle mass of 35 GeV, mediator particles with mass below 1.1 TeV are excluded for couplings yielding a dark-matter relic density consistent with measurements

Tundra uptake of atmospheric elemental mercury drives Arctic mercury pollution

Anthropogenic activities have led to large-scale mercury (Hg) pollution in the Arctic. It has been suggested that sea-salt-induced chemical cycling of Hg (through 'atmospheric mercury depletion events', or AMDEs) and wet deposition via precipitation are sources of Hg to the Arctic in its oxidized form (Hg(ii)). However, there is little evidence for the occurrence of AMDEs outside of coastal regions, and their importance to net Hg deposition has been questioned. Furthermore, wet-deposition measurements in the Arctic showed some of the lowest levels of Hg deposition via precipitation worldwide, raising questions as to the sources of high Arctic Hg loading. Here we present a comprehensive Hg-deposition mass-balance study, and show that most of the Hg (about 70%) in the interior Arctic tundra is derived from gaseous elemental Hg (Hg(0)) deposition, with only minor contributions from the deposition of Hg(ii) via precipitation or AMDEs. We find that deposition of Hg(0)-the form ubiquitously present in the global atmosphere-occurs throughout the year, and that it is enhanced in summer through the uptake of Hg(0) by vegetation. Tundra uptake of gaseous Hg(0) leads to high soil Hg concentrations, with Hg masses greatly exceeding the levels found in temperate soils. Our concurrent Hg stable isotope measurements in the atmosphere, snowpack, vegetation and soils support our finding that Hg(0) dominates as a source to the tundra. Hg concentration and stable isotope data from an inland-to-coastal transect show high soil Hg concentrations consistently derived from Hg(0), suggesting that the Arctic tundra might be a globally important Hg sink. We suggest that the high tundra soil Hg concentrations might also explain why Arctic rivers annually transport large amounts of Hg to the Arctic Ocean